造血干细胞移植 临床应用 与新进展 血液内科: 苏国宏
什么是造血干细胞? 造血干细胞(Hemapoietic Stem Cell, HSC) 是指一群在特定时期能够分裂的未分化细胞,具有自我更新能力和产生高度特异性的功能后代细胞。
CFU-L CFU-E CFU-GM CFU--MK 胸腺、淋巴结 造血干细胞 定向造血干细胞 造血祖细胞(CFU-GEMM) CFU-L CFU-E CFU-GM CFU--MK CFU-G CFU-M 原淋 原红 原粒 原单 原巨 幼淋 早幼红 早幼粒 幼单 幼巨 中幼红 中幼粒 颗粒巨 大小淋巴 晚幼红 晚幼粒 产板巨 网织红 裸巨 淋巴 红细胞 粒细胞 单核细胞 血小板 CD34+ MNC
什么是造血干细胞移植? 造血干细胞移植(Hemapoietic Stem Cell Transplantation, HSCT) 是指将异体或自体的造血干细胞植入到受者体内,使其造血及免疫功能恢复。
根据供体的不同,HSCT分: 1、同基因(Syngeneic): 指同卵双胎,供受者基因型完全相同。 2、异基因(Allogeneic): 非同卵双胎,人类白细胞抗原(HLA)相合,来自患者的兄弟姐妹,无关供髓者,脐带血。 3、自体(Autologous):自体解救措施。
根据供体的不同,HSCT分: 1、同基因(Syngeneic): 指同卵双胎,供受者基因型完全相同。 2、异基因(Allogeneic): 非同卵双胎,人类白细胞抗原(HLA)相合,来自患者的兄弟姐妹,无关供髓者,脐带血。 3、自体(Autologous):自体解救措施。
根据HSCT来源的不同分为: 1. 骨髓移植: 1~3×108有核细胞/kg 2. 外周血造血干细胞移植: >2×106 CD34+细胞/kg 3. 脐带血干细胞移植: >3×107有核细胞/kg
主要适应症(EBMT) 淋巴瘤和骨髓瘤:53%,其中异基因4%,自体96%。 白血病:32%,其中异基因76%,自体24%,包括AML、ALL、CML、MDS、CLL。 实体肿瘤:7%,其中异基因8%,自体92%,包括、神经母细胞瘤、脑胶质细胞瘤、胚胎细胞瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌等。 非恶性疾病:4%,其中异基因92%,自体8%,包括再生障碍性贫血、范可尼氏贫血、地中海贫血、严重联合免疫缺陷症、自身免疫性疾病等。
干细胞移植过程 自体造血干细胞移植: 异体造血干细胞移植: 供者细胞无须冻存,直接输注。 合适 支持治疗 患者 患者 植活 预处理 动员 冻存干 细胞 40度水浴 采集
APBSCT治疗步骤和策略 1、常规化疗4~5个疗程 白血病患者达到CR后,巩固治疗4~5次; 实体肿瘤消失或进入平台期。 2.外周血干细胞动员、采集及冷冻保存。 3.预处理、细胞回输。 4.并发症的防治及支持治疗。
目前常规动员方案可归纳为2种方式: 正常健康人采用: G-CSF 5ug/Kg/d×5-7d 目前常规动员方案可归纳为2种方式: 正常健康人采用: G-CSF 5ug/Kg/d×5-7d or GM-CSF 5ug/Kg/d + G-CSF 5ug /Kg /d 病人作自身移植的动员方案为: 化疗方案+细胞因子(G-CSF or GM-CSF + G-CSF)
三种不同冷藏方法的优缺点 1.4℃冰箱 (直接冷藏) 优点:方法简便,不需配制冷冻保存液。 缺点:如 >72h,细胞存活率及干细胞回收率明显减少 2.-80℃冰箱(缓慢降温法) 优点:操作容易,花费时间短。 缺点:需要专箱专用,保存时间只能在3—6个月之间。 弥补方法:-80℃冰箱保存2小时后,再置入-176℃的液氮, 可长期保存。 3.程序降温仪及-196℃液氮保存 优点:细胞经程序降温,损伤少,细胞存活率高且干细胞 回收率高,保存的时间长。 缺点:需要相应设备配置,操作时间长
预处理 治疗非肿瘤性疾病 预处理:指移植前给予患者亚致死剂量的化疗和全身放疗。 预处理的目的 治疗肿瘤 最大程度清除患者体内残存的肿瘤细胞 预处理的目的 治疗肿瘤 最大程度清除患者体内残存的肿瘤细胞 为移植的干细胞留出空间,以便于其定位、增殖分化 免疫抑制 治疗非肿瘤性疾病 清除异常细胞 提供细胞植入的空间
干细胞及其他领域
干细胞技术临床应用 目前的研究表明,当组织器官受到损伤时,干细胞被激活,对受损的组织进行修复重建。但这种自身修复毕竟是有限的,必须通过移植干细胞才能达到治疗相关疾病的目的。 但是成体干细胞由于数量很少,难于克隆而使其应用受到限制。
比较成熟的干细胞移植 临床应用 ¥造血干细胞移植 1.下肢缺血性疾病:糖尿病足、血栓闭塞性脉管炎、动脉硬化闭塞症等。 2.股骨头坏死。 3.缺血性心脏病:心梗…… 4.失代偿期肝硬化。 5.神经系统疾患:脑梗死、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、脑脊髓损伤(因创伤、缺血、变性疾病等造成神经元损伤)等。
来 源 大部分来源于骨髓或经动员后采集的外周血干细胞。 少数来源于脐血干细胞。
采集方法 骨髓:密度梯度离心分离细胞。吸取单个核细胞。 外周血:生长因子动员后细胞分离机采集单个核细胞。
干细胞移植在糖尿病足临床研究 2003年11月-2007年4月治疗 380例,总有效率达87.2%,使患者疼痛、冷感缓解,行走间距延长,溃疡愈合,免除了截肢致残的严重后果。
干 细 胞 移 植 术 在手术室进行干细胞移植术 患者接受全凭静脉麻醉 MNC配制成(1-6)×108细胞 /ml细胞悬液 按3cm×3cm间距进行肌肉注射
冷感消失 (90.8%) 1-21d 行走间距延长 (44.6%) 4-6m 溃疡缩小愈合 (92.3%) 3-6m 移植后临床情况 疼痛缓解 (87.2%) 1-28d 冷感消失 (90.8%) 1-21d 行走间距延长 (44.6%) 4-6m 溃疡缩小愈合 (92.3%) 3-6m 坏疽好转 (20.2%) 4-6m
临 床 研 究 病例选择 2004年7月~2007年4月224例股骨头坏死患者接受动脉内骨髓干细胞移植治疗 临 床 研 究 病例选择 2004年7月~2007年4月224例股骨头坏死患者接受动脉内骨髓干细胞移植治疗 病因 皮质激素、外伤、饮酒、原因不明 诊断 髋关节X线摄片、MRI、CT 核素扫描
经动脉干细胞移植术 股动脉穿刺 DSA血管造影 导管超选插入旋股内 旋股外 闭孔动脉 骨髓单个核细胞悬液缓慢灌注入动脉内
治疗结果—临 床 指 标 髋关节疼痛缓解率 82.7% 行走间距延长 54% 关节功能改善 30.2% 总有效率达 80.6%
干细胞移植6m血管造影前后对照
自体干细胞移植 治疗失代偿肝硬化 36例失代偿肝硬化: 乙型肝炎肝硬化 27例 酒精肝硬化 9例
术后1、4、8、12周观察 临床症状:12周 1.腹水减轻19例 52.7% 2.食欲改善28例 77.7% 3.体力好转20例 58.3% 1.腹水减轻19例 52.7% 2.食欲改善28例 77.7% 3.体力好转20例 58.3% 4.腹胀减轻17例 47.2%
1.谷丙转氨酶(ALT)逐渐减低 25例 69.4% 2.总胆红素逐渐下降 22例 61.1% 3.白蛋白逐渐升高 27例 75% 4.凝血酶原活动度全部不同程度升高。