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血涂片的制备和细胞大小的测量
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目的要求 1. 掌握血涂片的制备方法； 2. 认识红细胞及各种白细胞的典型形态； 3. 掌握显微测微尺的使用方法。
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实验原理 涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血 液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对 血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、 细胞大小测量等工作。
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实验用品 1. 器材 : 医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经 脱脂洗净的载玻片 、双凹片（推片） 。 2. 试剂 :Wright’s 染液： Wright’s 色素粉末 0.1g ，溶 于 60 ml 甲醇。
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方法与步骤 一. 血涂片的制备与血细胞的观察 二. 显微测微尺的使用
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采血前用 70 ％酒精棉球 消毒人的指腹
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采血
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由于第一滴血中含单核白细胞较多， 因此弃去第一滴血。
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推片 ：挤出第二滴血置于载玻片的右侧
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再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前 缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片 端展开成线状。
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30~45° 两玻片的角度以 30~45° 为宜，轻轻将双凹片向前 匀速推进，即涂成血液薄膜。
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染色 待涂片在空气中完全干燥 后，滴加数滴 Wright’s 染 液盖满血膜为止，染色 1 ～ 3 min 。然后滴加等量 蒸馏水，使其与染液均匀 混合，静置 10 ～ 15 min 。 用蒸馏水冲去染液，吸水 纸吸干，镜检。
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结果显示
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淋巴细胞
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单核细胞
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嗜中性粒细胞
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嗜酸性粒细胞
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嗜碱性粒细胞
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显微测微尺的使用 显微测微尺是用来测量在显微镜下所观察到的 物体的长度、面积的工具，包括镜台测微尺、 目镜测微尺两部分。 在使用的过程中，镜台测微尺起标定作用，利 用它可以确定目镜测微尺旋钮上每小格代表的 实际长度。 目镜测微尺标定完成后，即可用于细胞样品的 测量。
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每个大格又可分为 10 个 小格，每小格的实际长 度为 0.01mm 总长 0.1mm 镜台测微尺 总长 1mm 共分为 10 格
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目镜测微尺 可以通过旋转旋钮 移动目镜测微尺中 交叉线的位置
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使用方法 1. 取下目镜, 将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中, 旋上透镜； 2. 将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上, 用低倍镜 观察, 调节焦距看清镜台测微尺的刻度； 3. 移动镜台测微尺, 同时转动目镜, 使目镜测微尺与镜 台测微尺平行靠近, 并将两尺的 “0” 点刻度线或某 刻度线对齐. 然后从左向右查看两尺刻度线另一重 合处, 记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格 数. 按下式计算目镜测微尺每格等于多少微米。
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目镜测微尺的标定 n×a n×aX= M X: 目镜测微尺每格的实际长度 a: 镜台测微尺每格的实际长度 n: 镜台测微尺的刻度数。 M: 目镜测微尺的刻度数。
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4. 移去镜台测微尺，换血涂片，目镜测微 尺测量细胞所占小格数 X 目镜测微尺每小 格代表的实际长度 = 被测细胞的实际长度。
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实验报告 绘制各种不同类型的血细胞, 并说明它们 的主要作用； 任选 20 个红细胞，测量其直径，并计算 出平均值。
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