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第八章 脂类总量的测定 脂类:能够溶解在非极性和弱极性溶剂中,不溶 于极性溶剂中的一类物质。 一、 脂类的来源
第八章 脂类总量的测定 脂类:能够溶解在非极性和弱极性溶剂中,不溶 于极性溶剂中的一类物质。 一、 脂类的来源 动物:肉、蛋、乳等 植物:果实、种子(菜籽、花生、大豆等) 全脂奶粉26-32% 、脱脂奶粉1-1.5% 、油脂100% 、果蔬<1.1% 、花生仁 30-39%、油菜籽30-38% 。
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二、脂类的分类 1. 脂肪酸 2. 中性脂肪和油 3. 蜡 4. 磷脂 5. 甾酮、甾醇 6. 脂溶性维生素
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饱和脂肪酸(Saturated fatty acids)
辛酸
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不饱和脂肪酸(Unsaturated fatty acids)
3 – 辛酸 3, 6 – 二烯辛酸 简式: 8:1 (D3) 8:2 (D3,6)
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顺、反脂肪酸(Cis & Trans fatty acids)
顺 9 – 十八烯酸 反 9 – 十八烯酸
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DHA 脑黄金
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常见含反式脂肪酸的加工食品有: 珍珠奶茶,薯条,薯片; 蛋黄派或草莓派; 大部分饼干; 方便面; 泡芙,薄脆饼,油酥饼,麻花;
巧克力,沙拉酱; 奶油蛋糕,奶油面包; 冰淇淋; 咖啡伴侣或速溶咖啡。
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脂肪和油(Fats & oils) 主要为甘油三酸酯: 甘油 个脂肪酸
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甘油酯 (Glycerides) 甘油单酸酯 甘油二酸酯 甘油三酸酯
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蜡(Waxes) 蜡:高级脂肪酸 + 高级脂肪醇 对于植物和动物非常重要: 1)在水果、蔬菜、其它植物等表面形成保护膜。
2)在一定意义上讲,影响动物的外观并有一定的保护作用。 鲸油、鲸脑 蜂蜡
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磷脂(Phospholipids) 卵磷脂(Lecithin、phosphatidyl choline)
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甾酮、甾醇(Sterols) 雄性和雌性激素(Male & female sex hormones) Vitamin D
肾上腺素(Adrenal corticosteroids) 胆固醇 (Cholesterol )
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脂溶性维生素(Fat soluble vitamins)
Vitamin A:
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Vitamin D2: Vitamin E:
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三、脂类总量的测定 (一)分类 1. 重量法(Gravimetric Method)
(1) 碱性乙醚提取法、罗斯-哥特里氏法(Rose Gottlieb) (2) 索氏提取法(Soxhlet Method) 2. 容量法 (Volumeric Method) (1) 巴布科克(Babcock Method) (2) 盖勃 (Gerber Method)
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(二) 提取剂的选择 根据相似易溶原理。常用乙醚、石油醚(bp oC)作为脂类的提取剂。 用乙醚作提取剂的特点 除溶解脂肪外,还可以溶解一些其它脂类成分。所以用乙醚提取出的脂肪叫粗脂肪。 乙醚可饱和2%的水,这样提取中易将水溶性成分提出。 用石油醚作溶剂的特点 石油醚不与水混溶,但对脂肪溶解性比乙醚差些。 总之:用乙醚,石油醚提取的为游离脂肪。
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1、碱性乙醚提取法、罗斯哥特里氏法(Rose-Gottlieb) 准确度高,乳和乳制品公认的标准方法(GB、ISO) 以牛奶为例:
(1) 10 ml 牛奶 ml NH3·H2O 混匀,60 oC水浴 5min,振荡2min,破坏脂肪保护膜。 NH2R(COO)6Ca3 + 6 NH3·H2O → NH2R(COO)6(NH4)6 + 3Ca(OH)2
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(2) 冷却后,加 1 ml 乙醇 –––充分振摇1min,提取水溶性成分, 防止蛋白凝胶化。
(5) 分出醚层,除去溶剂,烘干称重。
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2、索氏提取法(Soxhlet Method )
原理: 提取筒中的样品被有机溶剂连续提取,提取后除去溶剂,称量脂肪的重量。 ←索氏提取法装置 干燥样品→无水乙醚或石油醚→水浴回流6-8 h →回收乙醚→烧瓶(称量) ← 有机溶剂
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计算公式: 脂肪(%)=(W1-Wo)/S×100 W1:脂肪+烧瓶总重 Wo:烧瓶重 S:样品重
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3、巴布科克、盖勃法(Babcock, Gerber Methods)
原理: 1)在专用的乳脂瓶(巴布科克乳脂瓶、盖勃乳脂计)中,用浓 H2SO4处理样品。 2)离心分出脂肪层。 3)直接测量脂肪的含量。
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巴布科克法 1)加17.6 ml牛乳于巴布科克乳脂瓶中。 2)加17.5 ml浓H2SO4 —使脂肪呈游离、液态。
3)离心1000rpm 5min。 4)加60 oC或以上热水,使脂肪瓶球部充满,离 心1000rpm 2min。 4)加60 oC或以上热水,使液面接近4(%)刻线, 离心1000rpm 1min。 5)在55-60 oC下读数,即牛乳脂肪重量百分数。
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说明: 1)硫酸的浓度要严格遵守规定的要求,如过浓会使乳炭化成黑 色溶液而影响测定;过稀则不能使酪蛋白完全溶解,会使测
定值偏低或使脂肪层浑浊。 2)硫酸除可破坏脂肪球膜,使脂肪游离出来外,还可增加液体 的密度,使脂肪容易浮出。 3)巴布科克法中采用17.6ml标准吸管取样,实际上注人巴氏瓶 中的样品只有17.5ml,牛乳的相对密度为1.03,故样品重量 为17.5×1.03=18 g。巴氏瓶颈的刻度(0-10%)共10个大 格,每大格容积为0.2ml,在60℃左右,脂肪的平均相对密 度为0.9,故当整个刻度部分充满脂肪时,其脂肪重量为 0.2×10×0.9=1.8g。18g样品中含有1.8g脂肪,即瓶颈全部 刻度表示为脂肪含量10%.每一大格代表1%的脂肪。故瓶 颈刻度读数即为样品中脂肪百分含量。
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盖勃法 1)加10 ml浓H2SO4。 2)11 ml牛乳和1 ml异丙醇混匀—使脂肪 呈游离、液态。
3)65-70oC水浴5min,离心1000rpm 5min。 4)60-65oC水浴5min,离心1000rpm 5min。 4)调节橡皮塞,使脂肪柱在刻度范围内。 5)读数,即牛乳脂肪重量百分数。
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4、折光法 原理: 利用折光率较大的有机溶剂提取脂肪,然后根据混合液的浓度之间的关系,来确定脂肪的含量。
通常选用a-氯萘、a-溴萘作为有机溶剂提取脂肪。
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操作 --样品、海砂、a-氯萘或a-溴萘 、无水Na2SO4 --研磨1min --过滤 --滤液测折光率
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计算公式 V— a-氯萘或a-溴萘的体积(ml) n1— 有机溶剂的折光率 d — 纯脂肪的比重 n2— 滤液的折光率
W— 样品的重量(g) n — 纯脂肪的折光率
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