诊断和基本检查 中国医科大学附属盛京医院 检验科 卢丽萍.

Presentation on theme: "诊断和基本检查 中国医科大学附属盛京医院 检验科 卢丽萍."— Presentation transcript:

1 诊断和基本检查 中国医科大学附属盛京医院 检验科 卢丽萍

2 本次课主要内容 肝功能实验 肝炎病毒检验 肿瘤标志物检验

3 物质代谢功能 生物转化作用 分泌排泄功能 肝功能实验 LIVER FUNCTION TEST

4 肝脏功能检查涉及的内容： 1、蛋白质代谢功能的检查 2、胆红素代谢功能的检查 3、酶学检查 4、肝功能及肝病实验室检查的选择原则

5 血清总蛋白和白蛋白、球蛋白比值测定 Total protein 、 Albumin 、A/G
蛋白质代谢功能检查 血清总蛋白和白蛋白、球蛋白比值测定 Total protein 、 Albumin 、A/G 血清总蛋白 白蛋白测定 慢性肝损害 肝实质细胞的储备能力

6 干扰因素： 1).溶血：背景呈色增加 1g/LHb %TP 2).乳糜血 :影响检测准确性 3).药物： 氨苄青霉素 干扰白蛋白与染料结合

7 参考值： TP：60~80g/L A：40~55g/L（ 35~55） G：20~30g/L （25~30） A/G：1.5~2.5:1（1.1 ~2.0:1)

8 临床意义 球蛋白 1.总蛋白 白蛋白 少见，脱水致血液浓缩: 重度腹泻、呕吐、高热、休克等
白蛋白 少见，脱水致血液浓缩: 重度腹泻、呕吐、高热、休克等 球蛋白 高蛋白血症：TP >80g/L, G>35g/L

9 慢性肝脏疾病：肝硬化、慢活肝、慢性酒精性肝病
M-球蛋白血症：多发性骨髓瘤、淋巴瘤 自身免疫性疾病：SLE、类风湿性关节炎 慢性感染：细菌、病毒、寄生虫感染（结核、疟疾和血吸虫等）

10 2.总蛋白 球蛋白 合成降低如肾上腺皮质功能亢进, 白蛋白 先天性免疫缺陷,免疫抑制剂的应用
球蛋白 合成降低如肾上腺皮质功能亢进, 先天性免疫缺陷,免疫抑制剂的应用 白蛋白 低蛋白血症: TP <60g/L. A <25g/L

11 摄入不足: 营养不良 合成不足：慢性肝病 去路增加： 丢失过多：肾病综合征 严重烧伤 消耗过多：恶性肿瘤、甲亢

12 白蛋白(A)变化的意义 A的高低与有功能的肝细胞数量呈正相关 A半衰期约为21天, 急性肝炎时A无明显变化
A<25g/L以下, 腹水产生, 且二者呈正相关 A在治疗后回升为病情好转指征 A逐渐下降或持续降低，提示临床预后不良

13 3. A/G 倒置意义: A /G 慢性肝病 M蛋白血症 多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症 恶性淋巴瘤 慢性肝炎,慢性酒精性肝病,
肝硬化、原发性肝癌 M蛋白血症 M蛋白（单克隆免疫球蛋白），是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的、 具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子或分子片段（如轻链、重链等），一般不具有抗原性。 多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症 恶性淋巴瘤

14 血清蛋白电泳 原理： 泳动速度:等电点、分子量、带电荷数 电泳区带:A、a1、a2、ß、r

15

16 参考值： A：62~72% a1 ：3~4 % a2 ：6~10% ß：7~11% r：9~18%

17 ※临床意义： 肝脏疾病： 慢性肝炎、肝硬化\肝癌 A a1 a2 ß r 肝硬化：ß-r融合 肝 癌：a-球 偶见A与a1之间AFP带

18 肝硬化

19 2.M蛋白血症： 多发性骨髓瘤 巨球蛋白血症 单克隆免疫球蛋白 明显升高 Γ球蛋白增高 多发性骨髓瘤

20 肾病综合征 3.肾病综合征 糖尿病肾病： a2 ß A r

21 血清前白蛋白测定 原理： 在肝细胞内合成，在电泳图谱上位于白蛋白前方的一条染色很浅区带
半衰期短（1.91天），早期肝细胞损伤时PA下降往往早于其他血清蛋白成份的改变

22 方法：免疫比浊法、免疫扩散法 参考值：成 人：280~360mg/L 1 岁：100mg/L 1~3 岁：168~281mg/L

23 临床意义： 1.PA升高：甲亢、肾病综合征、 胶原病、何杰金病 ※2.PA降低： 1).营养不良、慢性感染、恶性肿瘤
2).肝病：肝炎、肝癌、梗阻性黄疸 注：PA下降程度与肝细胞损伤程度一致，92%急 肝PA下降，重症肝病下降近于零，多数肝病 患者PA降置50%，而白蛋白正常

24 血浆凝血因子测定 ☆多数凝血因子来源于肝脏 ☆半衰期较短
肝功能受损早期白蛋白尚未降低时，即有凝血因子的明显减少（尤以Vitamin K依赖的凝血因子降低明显） ☆可用于肝脏早期的过筛试验

25 过筛试验： 1.PT（凝血酶原时间）：外凝系统 血浆+组织因子+Ca 血浆凝固 反映血浆因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ含量 PT延长是肝硬化失代偿期的特征 协助诊断DIC

26 2.APTT（活化部分凝血活酶时间）：内凝 血浆+接触因子激活剂+磷脂+Ca2+ 血浆凝固 反映因子Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ含量 APTT延长：肝病、Vitamin K缺乏

27 3.TT（凝血酶凝固时间）： 血浆+ “标准化”凝血酶溶液 血液凝固 纤维蛋白原含量、结构改变 FDP的存在 用于肝硬化或肝衰合并DIC的诊断 4.AT-Ⅲ （抗凝血酶-Ⅲ ）： 肝脏合成 抑制凝血酶，肝病时明显减少

28 血氨测定 原理： 肠道 肾泌氨 NH3 肝脏鸟氨酸循环 尿素 肌肉 肝病时NH3不能从循环中清除 NH 神经毒 肝性脑病

29 参考值：11~35umol/L 临床意义： 1.血氨升高：严重肝损害、上消化道出 血尿毒症、休克 2.血氨降低：低蛋白饮食、贫血

30 脂类代谢功能检查 胆固醇(脂) 磷脂 甘油三脂 游离脂肪酸 来源于肝脏 血清脂类

31 血清胆固醇和胆固醇脂测定临床意义 （1）总胆固醇降低： 肝细胞损伤如肝硬化、暴发性肝衰竭 营养不良及甲亢 （2）胆固醇增加： （以游离胆固醇增加为主） 胆固醇脂与游离胆固醇比值降低 胆汁淤积

32 胆红素代谢检查 胆红素的代谢 生成、运输、 动态 平衡 肝内代谢、肝外代谢 重点环节 由粪、尿排出 当胆红素代谢的某一环节发生障碍时，血
清胆红素含量可增高，若>18μmol/L称为 高胆红素血症

33 葡萄糖醛酸转移酶 肠道细菌 85%

34

35

36 梗阻性黄疸时胆红素代谢

37 胆红素的测定 血清总胆红素测定 （Serum total bilirubin,STB) 血清结合胆红素
（Conjugated bilirubin,CB） 非结合胆红素测定 （ Unconjugated bilirubin，CB） 尿胆红素(Urobilin) 尿胆原(Urobilinogen)

38 血清总胆红素的测定 原理： CB UCB TB=CB+UCB 参考值：成人：3.4~17.1umol/L 直接反应 重氮胆红素 表面活性物质

39 ※临床意义： 1.判断有无黄疸及黄疸程度 17.1 34.2 隐性黄疸 171 轻度 342 中度 重度 正常

40 2.推断黄疸病因： 溶血性黄疸： <85.5umol/L 肝细胞性黄疸： 17.1~171umol/L 梗阻性黄疸： 完全： >342umol/L 不完全：171~342umol/L

41 3.判断黄疸类型： + 肝细胞性黄疸 ++ 微量 梗阻性黄疸 溶血性黄疸 CB UCB TB

42 血清结合胆红素和非结合胆红素 原理：血清 + 重氮试剂 结合胆红素 TB-CB=UCB 参考值： CB：0~6.8umol/L
原理：血清 + 重氮试剂 TB-CB=UCB 参考值： CB：0~6.8umol/L UCB：1.7~10.2umol/L CB/STB：0.2~0.4 1min 结合胆红素

43 CB/TB 临床意义： 1.黄疸的鉴别诊断： <20% —— 溶血性黄疸 20~50% —— 肝细胞性黄疸
<20% —— 溶血性黄疸 20~50% —— 肝细胞性黄疸 >50% —— 梗阻性黄疸 2.肝损伤： 早期：30%~50%病人CB增高而STB正常 CB/TB

44 尿胆红素和尿胆原测定 1.正常人尿中无胆红素存在（UCB不能透过肾小球，CB仅微量存在，通常不能测出）当血中TBil >34.2μmol/L（肾阈值）尿中即可出现胆红素 2.正常少量尿胆原可经肠肝循环入血，随尿经肾脏排出

45 参考值： 尿胆红素： （-） （-）或（±） 0.84~4.2umol/L 尿胆原

46 Dubin-Johnson和Rotor综合征 2.尿胆红素阴性： 溶血性黄疸： 黄疸伴随肾损伤
※临床意义： 1.尿胆红素增高： 梗阻性黄疸：胆石症、胆管肿瘤、胰头 癌 肝细胞性黄疸：肝炎、肝损伤 Dubin-Johnson和Rotor综合征 2.尿胆红素阴性： 溶血性黄疸： 黄疸伴随肾损伤 Gilber和Crilber-Najjar综合征

47 3.尿胆原增高： 肝细胞损伤：肝脏重吸收尿胆原受阻 溶贫、巨幼贫：非结合胆红素生成增多 肠梗阻、便秘：尿胆原吸收增多 碱性尿：肾小管对尿胆原重吸收减少 4.尿胆原减少： 梗阻性黄疸：完全梗阻时可缺如 新生儿：肠内细菌缺乏酸性尿 酸性尿

48 黄疸的鉴别诊断 血清胆红素 尿胆色素 ＞0.5 梗阻性 CB/STB CB UCB 尿胆原 尿胆红素溶血性 ＜0.2 肝细胞性 ＜0.5
血清胆红素 尿胆色素 CB/STB CB UCB 尿胆原 尿胆红素溶血性 ＜0.2 ＜0.5 ＞0.2 ＞0.5 肝细胞性 梗阻性

49 一、血清酶学 概述 临床应用的及临床意义： ALT、AST、ALP及其同工酶、GGT

50 20%AST ALT GGT 80% AST ALP

51 肝病酶血清浓度变化机理 变 化 机 理 常见血清酶 酶存在于肝细胞内，肝细胞受损后酶从细胞内释放入血，使血清酶活性升高
酶由肝细胞合成，肝脏疾病时肝细胞合成酶减少，使血清酶活性减低 维生素K依赖性凝血因子，因胆汁淤滞，胆汁酸盐不能进入肠道使维生素K吸收障碍，肝脏不能合成这些酶因子 胆道梗阻，酶排泄受阻，使血清酶浓度升高 肝脏纤维组织增生时某些酶活性升高 ALT、AST、ALD、LDH、GDH CHE、LCAT 各种凝血因子 凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ ALP、GGT MAO、PH、PⅢP、HA

52 肝脏疾病诊断酶分类 分 类 代 表 酶 肝细胞损害为主的酶 胆汁淤滞为主的酶 肝脏纤维组织增生为主的酶 协助诊断肝细胞癌的酶类
分 类 代 表 酶 肝细胞损害为主的酶 胆汁淤滞为主的酶 肝脏纤维组织增生为主的酶 协助诊断肝细胞癌的酶类 丙氨酸氨基转移酶（ALT） 门冬氨酸氨基转移酶（AST） 谷氨酸脱氨酶（GDH或GLDH） 乳酸脱氢酶（LDH） 谷胱甘肽S转换酶（GST） 胆碱脂酶（CHE） 卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT） 碱性磷酸酶（ALP） γ-谷氨酰转换酶（γ-GT或GGT） 亮氨酸氨基肽酶（LAP） 5’-核苷酸酶（5’-NT） 单胺氧化酶（MAO） 脯氨酰羟化酶（PH） 胶原酶（collagenase） γ-谷氨酰转移酶同工酶Ⅱ（γ-GTⅡ） α-L-岩藻糖苷酶（AFU） 碱性磷酸酶同工酶Ⅰ（ALP-Ⅰ） 5’-核苷酸磷酸二脂酶同工酶Ⅴ（5’-NPDⅤ） 醛缩酶同工酶A（ALD-A）

53 Reference interval: ALT: 10 - 40 U/L AST: 10 - 40 U/L
丙氨酸氨基转移酶 Alanine aminotransferase (ALT) 天门冬氨酸氨基转移酶 Aspartate aminotransferase (AST) ALT 参考值： Reference interval: ALT: U/L AST: U/L ALT/AST ≤ 1 20% AST 80% AST

54 65% 4% ALT、AST体内分布情况及半衰期变化 分布 漏出率 半衰期（小时） 脏器 肝细胞 ALT 肝脏、骨骼肌、肾脏、心肌等 胞质
47 AST 心肌、肝脏、骨骼肌、肾脏等 80% 线粒体 20% 胞浆 4% 17

55 临床意义 ALT,AST 病毒性肝炎： 急性病毒性肝炎 转氨酶阳性率80-100% 早期 ALT > AST (峰值可为20~100ULN) ALT //胆红素 ALT高低与病情轻重平行，判断急性肝炎恢复的指标 慢性病毒性肝炎 ALT ↑ ＞AST ( 100～200u/L) AST ↑ ＞ALT Activity

56 非病毒性肝病 酒精性肝病： AST↑↑, ALT (-) 药物性肝炎, 脂肪肝：ALT/AST＜1 肝硬化、肝癌： ALT/AST＜1 取决于肝细胞坏死和肝脏纤维化程度 胆汁淤积 ALT.AST 轻度升高 心肌损伤 AST>ALT（达4~10ULN） 其他：皮肌炎、进行性肌萎缩、 传染性单核细胞增多症 流感病毒感染

57 临 床 意 义 N：正常；↑：轻度升高；↑ ↑：明显升高；↓：降低 疾 病 ALT与AST ALT/AST 急性病毒性肝炎
疾 病 ALT与AST ALT/AST 急性病毒性肝炎 Acute viral hepatitis ↑↑ ＞1 慢性病毒性肝炎 Chronic viral hepatitis N或↑ 酒精性肝病、脂肪肝Alcoholic liver diseases , Fatty liver ＜1 肝硬化 Liver cirrhosis N、↓或↑ N：正常；↑：轻度升高；↑ ↑：明显升高；↓：降低

58 Alkaline phosphatase (ALP)
碱性磷酸酶 Alkaline phosphatase (ALP) 分布脏器 肝、骨、肠等，主要在肝 肝内分布：肝细胞血窦侧 毛细胆管侧的微绒毛 升高： 胆汁排出不畅 毛细胆管压力增加 诱发产生大量ALP 骨骼疾病时，ALP也可升高 胆汁排入小肠

59 同工酶（Isoenzyme of ALP） - ALP1 - liver ALP ( ALP2 ) - bone ALP ( ALP3 )
肝 骨/胎盘 巨肝 肠 - ALP1 - liver ALP ( ALP2 ) - bone ALP ( ALP3 ) - placental ALP ( ALP4 ) - intestinal ALP ( ALP5 ) - ALP6

60 临 床 意 义 生理性增高 1.妊娠：ALP4 （胎盘分泌） 2.生长发育：ALP3 儿童 1～2X 成人
参考值范围 成人 U/L 儿童 1～2X 成人 临 床 意 义 生理性增高 1.妊娠：ALP4 （胎盘分泌） 2.生长发育：ALP3

61 病理性增高： 1.梗阻性黄疸：癌性梗阻 ALP1>ALP2 ALP—明显 ↑↑ 与胆红素升高平行 2.急性肝炎：ALP2>ALP1 3.肝硬化：ALP5 ， ALP1( - ) 4.佝偻病、软骨病、 畸形性骨炎：ALP3 5.肿瘤：合成分泌ALP亢进

62 黄疸时ALP、BIL及ALT的变化 黄 疸 类 型 ALP BIL ALT 阻塞性黄疸 ↑↑↑ ↑ 肝细胞性黄疸 N或↑ ↑↑ 溶血性黄疸
黄 疸 类 型 ALP BIL ALT 阻塞性黄疸 ↑↑↑ ↑ 肝细胞性黄疸 N或↑ ↑↑ 溶血性黄疸 N ↑～↑↑ 注： ↑：增高； ↑↑：较明显增高； ↑↑↑：明显增高

63 Gamma glutamyltransferase(GGT)
γ-谷氨酰转移酶 Gamma glutamyltransferase(GGT) GGT 存在部位：细胞膜，微粒体 功能: 谷胱甘肽代谢 体内分布: 肾脏, 胰腺，肝脏,肠，心肌 血清 GGT: 来自肝胆系统 参考值范围: Reference interval: <50U/L

64 临床意义： 1.胆道疾病： 肝外胆汁淤积（胆石症、胆管炎、胰头癌） GGT升高（5~30ULN），幅度与胆红素、ALP相一致， 高于肝癌GGT升高的幅度 2. 肝脏疾病： ☆急性病毒性肝炎、脂肪肝、肝硬化活动期 ☆药物性肝病 ☆酒精性肝病： 急性：>1000U/L 慢性：<300U/L 戒酒后可随之下降

65 ☆肝癌 GGT升高10倍以上，其活性与肿 瘤大小、疾病严重程度成正比 3.尿GGT测定有助于肾脏疾病诊断 4.GGT的同工酶：
GGT2：肝癌，与AFP联合提高阳性率 GGT3：胆汁梗阻 肝癌: AFP+GGT2+ALP1

66 血清胆碱酯酶测定 Cholinesterase, CHE
分类 乙酰胆碱酯酶：红细胞、脑灰质 丁酰胆碱酯酶：肝、脑白质、血清 临床意义： 1.CHE活性减低： 有机磷中毒：两种CHE活性均减低 肝实质损害：评价肝细胞合成功能 肝、胆疾病鉴别 2.CHE活性增加：脂肪肝、肾病综合征、糖尿病

67 单氨氧化酶测定（MAO） 临床意义： MAO增高:表明有肝细胞坏死和纤维化形成 （1）肝脏病变： 重症肝硬化(80%) 、肝癌 中、重度慢性肝炎（50%） 急性肝炎多正常（早期肝硬化不敏感） （2）肝外疾病： 慢性心衰、糖尿病、甲亢、系统性硬化等

68 谢 谢

69 病毒性肝炎标志物的检查 肝炎病毒 甲、乙、丙、 丁、戊,其他

70 乙型肝炎病毒 HBsAg DNA Polymerase HBcAg Double-Stranded RNA HBeAg
Dane Particle 双链DNA病毒 中央为核苷酸含病毒DNA，周围包有表面蛋白和抗原。

71 乙型肝炎病毒抗体和DNA测定 1.乙肝病毒表面抗原（ HBsAg ） 1). 感染后1~2月血清出现 肝脏中有HBV存在，不含DNA
1). 感染后1~2月血清出现 肝脏中有HBV存在，不含DNA 本身不具有传染性常与HBV同时存在 基因突变 乙肝潜伏期和急性期 慢性肝炎、肝硬化、肝癌 慢性HBsAg携带者 2）HBsAg（+）

72 效价与保护作用呈平行关系 2.乙肝病毒表面抗体（Anti-HBs ） 1). HBsAg转阴后出现 对HBsAg产生的中和抗体，为保护性抗体
对乙肝病毒有一定的免疫力 接种乙肝疫苗 被动获得Anti-HBs 效价与保护作用呈平行关系

73 3.乙肝病毒e抗原（ HBeAg ） 1). 由感染的肝细胞分泌入血，可游离存在 病毒复制活跃 传染性强的指标 肝细胞有进行性损害
持续阳性： 乙肝活动期易转为慢性或肝硬化 3).孕妇——垂直传播70~90%感染率 2）.HBeAg（+）

74 4.乙肝病毒e抗体（ Anti-HBe） 1).非保护抗体，乙肝潜伏期的后期出现 急性感染恢复期 HBV部分被清除或抑制
复制减少，传染性降低 预后良好 急性肝炎 易转为慢性 慢性活动性肝炎 易转为肝硬化 2).抗HBe(+) 部分乙肝病人HBeAg转阴是HBV基因突变所致， 故血中仍有HBV颗粒，

75 存在于Dane颗粒核心，被HBsAg包裹， 不易检测
5.乙肝病毒核心抗原 （ HBcAg ） 存在于Dane颗粒核心，被HBsAg包裹， 不易检测 阳性：病毒复制活跃，传染性强，预后差 6.乙肝病毒核心抗体（ Anti-HBc） 不是中和抗体，反映肝细胞受病毒侵害 包括IgM、IgG、IgA

76 1). 抗HBc-IgM 乙肝病毒感染后血中最早出现的特异性抗体 乙肝急性感染及病毒持续复制的指标有强传染性 与乙肝转归有关：阴 阳：复发 对HBsAg阴性的急性乙肝诊断更有意义 慢性活动性肝炎

77 2). 抗HBc-IgG 病毒感染后1个月开始升高，持续终身，无保护性 高滴度：正在感染 低滴度：既往感染指标 慢肝、肝癌中检出率高 献血员、血制品安全性筛选

78

79 7.乙肝病毒DNA （ HBV-DNA ） HBV的基因物质 HBV感染最直接、最灵敏、最特异的检测指标 1).阳性，乙肝直接诊断依据 2).应用疫苗后垂直传播的阻断效果监测 3).复制，高度传染性最可靠的指标

80 丙型肝炎病毒标志物检测 1. HCV-RNA 1).阳性：HCV复制活跃，传染性强，活动性感染 2).评价干扰素等疗效
2. Anti-HCV-IgM 1).病后4周，持续1~4周，6月转阴 2).病毒复制，传染性强，用于早期诊断 3. Anti-HCV-IgG 1).已有HCV感染，输血后肝炎占80~90% 2).易转为慢肝、肝硬化肝癌

81 丁型肝炎病毒抗体检测 丁型肝炎病毒(HDV)： 缺陷病毒，需HBV或其 他嗜肝病毒的辅助才能复制传播 临床意义：
抗原检测：HDVAg出现早，持续1~2周 抗体检测： IgM：出现早，持续2~20周 早期诊断 IgG：只能在HBsAg阳性的血清中测得， 可靠诊断指标 HDV感染终止后仍可保持多年

82 戊型肝炎病毒抗体检测 临床意义： IgM（+）持续时间短，急性感染的诊断指标 IgG效价（恢复期）≥急性期4倍者，提示HEV新近感染。

83 庚型肝炎病毒抗体检测 目前HGV感染的血清学检测方法还不成熟 临床意义： 抗体（+）： 曾感染过HGV 输血后肝炎
使用血液制品引起HGV合并HCV感染者

84 输血传播病毒检测 输血传播病毒（TTV)：PCR为主要检测方法 参考值：PCR法阴性 临床意义：

85 TTV DNA（+）：表明有TTV存在，但普通人
基因异源性较高，导致PCR法阳性率较高。因 此尚不能全面了解TTV的临床和流行病学特征

86 评价肝功能状态应注意 贮备、再生和代偿能力很强 肝脏 功能繁多 灵敏度 检验肝功的方法 特异性 结合临床、影像、内窥镜
病原学（肝炎病毒标志物） 病理学（肝活检） 免疫学（自身抗体，肝癌标志物） 结合临床、影像、内窥镜

87 肝病检查项目的选择 1、选择原则： 2）尽量选择敏感性、特异性高的指标 1）病情需要 3）常规检查项目与特殊检查项目相结合
4）实验室条件允许

88 2、选择项目优化组合 1）健康查体: ALT、TB、ALB、A/G，肝炎病毒标志物 必要时加血清蛋白电泳

89 2）疑似肝炎： 急性（无黄疸）:肝炎病毒标志物、ALT、PA、胆汁酸 血清胆红素、尿胆原 慢性（无黄疸）: 加上AST、ALP、TP、 A/G、γ-GT、血清蛋白电泳

90 3）黄疸的诊断与鉴别： 血清胆红素、尿胆原、尿胆红素、ALP， GGT，胆汁酸 4）怀疑肝纤维化或肝硬化： 转氨酶，血清胆红素，白蛋白，球蛋白，蛋 白电泳 附加检查：MAO，Ⅲ型前胶原肽

91 5）原发性肝癌： 一般肝功（转氨酶，γ-GT，胆红素） 加测AFP、CEA、ALP同功酶、γ-GT同功酶等

92 6）疗效观察和病情观察： 急性肝炎：ALT，AST，PA， 胆红素，尿胆原，尿胆红素 慢性肝炎：ALT，AST，胆红素， 总蛋白，白蛋白，A/G，血清蛋白电泳 必要时附加：MAO，Ⅲ型前胶原肽 原发性肝癌随访：AFP，γ-GT，ALP及其同 功酶

93 我院一般肝功能检查项目 蛋白电泳 A/G 血浆凝血因子 血氨等 肝合成功能 肝排泄功能 胆汁酸 肝细胞损伤 血清酶学 肿瘤、胆道通畅
总蛋白（TP） 白蛋白（A） 前白蛋白（PA） ALT AST ALP GGT CHE 总胆红素（STB） 直接胆红素（CB） 间接胆红素（UCB） A/G 蛋白电泳 血浆凝血因子 血氨等 蛋白质代谢 肝合成功能 肝细胞损伤 血清酶学 肿瘤、胆道通畅 肝合成功能 胆红素代谢 肝排泄功能 胆汁酸

94 肿瘤标志物检测 （tumor markers,TM)
1978年Herberman在美国国立癌症研究所召开的人类肿瘤免疫诊断会上提出 1979年确认并开始使用 TM是表示肿瘤存在并反映其一定的生物特性的生化物质 TM主要是指那些在血液、体液及组织中可检测到的与肿瘤相关的物质，这些物质达到一定的水平时能揭示某些肿瘤的存在。 TM的临床意义： （1）诊断 （2）复发 （3）判断疗效（4）预后

95 肿瘤标志物的分类 1. 细胞型肿瘤标志物 在肿瘤组织和肿瘤细胞膜上表达细 胞膜上的抗原、生长因子与激素受 体、染色体、癌基因和抑癌基因
来源和存在部位 1. 细胞型肿瘤标志物 在肿瘤组织和肿瘤细胞膜上表达细 胞膜上的抗原、生长因子与激素受 体、染色体、癌基因和抑癌基因

96 2．体液型肿瘤标志物 作为机体对肿瘤的反应而形成 在血清、尿液和其他体液检测到 由肿瘤组织合成并分泌 肿瘤细胞结构的一部分
肿瘤组织分解时释放 作为机体对肿瘤的反应而形成 在血清、尿液和其他体液检测到

97 本身的生化学特性和免疫学特性 （1）癌胚抗原标志物 （2）糖类抗原标志物 （3）酶类标志物 （4）蛋白质类标志物 （5）激素类标志物
（6）基因类标志物

98 理想的TM ： 特异性高，对肿瘤与非肿瘤鉴别的准确性可达100%。 敏感性高，能在极早期发现肿瘤的存在，不漏诊。
在体液中的浓度应与瘤体大小、临床分期密切相关，并可据此判断预后。 半衰期短，可根据其水平的升降监测治疗效果及肿瘤是否复发或转移。 检测方法灵敏可靠，操作简便，价格低廉。

99 常用肿瘤标志物 甲胎蛋白（AFP） 癌胚抗原（CEA） 糖类抗原（CA50、CA125、CA15-3、CA199、CA242、CA72-4）
ß2-微球蛋白（ ß2-MG） 铁蛋白（Ft） 细胞角质素片段抗原21-1（CYFRA21-1） 神经元特异性烯醇化酶（NSE） 鳞状上皮癌相关抗原（SCC-Ag） 前列腺特异抗原（PSA） 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 核基质

100 肿瘤标志物常用检测技术 免疫学检测技术 酶免疫测定技术 荧光免疫测定技术 放射免疫测定技术（RIA) 免疫组织化学技术

101 分子生物学检测技术 DNA提取技术 DNA杂交技术 限制性内切酶片段长度多态分析 （RFLP） PCR技术

102 肿瘤标志物的测定 ： 肿瘤细胞特异或相关抗原的测定 肿瘤相关酶含量活性的测定 肿瘤相关激素水平及其受体数量的测定 细胞刺激因子的测定
癌胚基因产物、癌基因及其癌基因蛋白、抗癌基因等测定

103 肿瘤标志物测定中的几个重要事项： 动态变化比单次数据更有意义 良性疾病常呈一过性升高或轻微异常 即使在正常范围内浓度有增加可能也有意义
动态肿瘤标志物含量也可指示肿瘤复发或转移的类型和位置。 迅速升高（＞4ng/ml. 6months） 骨或肝转移 缓慢升高（＞2ng/ml. 6months） 脑、软组织 皮肤转移 肿瘤标志物测定值很大程度上取决于 肿瘤抗原的异质性和转移 产生、分泌、血液供应及清除等因素 术后CEA

104 肿瘤标志物的临床应用 筛选:用于有症状人群或有某种危险因素 人群的筛选（AFP) 分期:结直肠癌的CEA 预后:有预后价值的标志物：CEA、
β2-微球蛋白、CA125等 不适宜基本诊断、肿瘤定位(PSA/PAP例外）

105 治疗: 制备对肿瘤标志物的单抗（瘤细胞表面抗原抗体），再用化疗药物标记抗体，使药物得以较集中的集聚至瘤细胞表面，达到治疗目的。
疗效的检查和监测(最有意义的适用指标) 判断手术、放疗或化疗及免疫治疗是否成功 治疗: 制备对肿瘤标志物的单抗（瘤细胞表面抗原抗体），再用化疗药物标记抗体，使药物得以较集中的集聚至瘤细胞表面，达到治疗目的。 降至正常水平 肿瘤完全切除或消退 肿瘤标志物 恒定或下降 重新增加 肿瘤残留或潜在转移 正常 增加 肿瘤复发

106 常用肿瘤标志物 （一）癌胚抗原（Carcinoembryonic Antigen，CEA）
其生物半寿期为2~8天。 CEA主要用于结肠直肠癌患者的治疗检查和监测。 在这些病例中，CEA的浓度与肿瘤的分期有关，术前CEA含量与术后无复发的时间间隔及存活时间有关。

107 在监测可治疗的手术后的患者中，CEA比CT、超声及内窥镜更敏感。
[正常参考范围] 健康非吸烟者＜3ng/ml 吸烟者3~20ng/ml

108 [临床意义] 肿瘤预后： 手术治疗成功，于6~8周降至正常水平 降而复升，表示肿瘤有进展、复发或转移 逐渐上升（2~4ng/ml. 6months） 局部复发 迅速增加 有转移 消化道癌肿：CEA＞20ng/ml 肺腺癌：胸水中CEA ＞ 10ng/ml 其他肿瘤：乳腺癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌 宫颈癌、卵巢肿瘤 良性疾病：胶原性疾病，心血管疾病 糖尿病和非特异性结肠炎 CEA

109 甲胎蛋白Alpha-Fetoprotein(AFP)
1956年Bergstrand等在胎儿血清中发现 主要在胎儿肝脏和卵黄囊中合成，妊娠12~16周 达最高水平，然后逐渐下降，出生后不久（一年 内）降至正常水平。孕妇在32~36周血中AFP达 高峰，可达500 ng/ml 生物半寿期约5天 AFP主要用于原发性肝细胞癌的诊断和监测 [参考值] 男人和非妊娠妇女＜8.5ng/ml 国内： 20ng/ml（20ug/L） （1U/ml×1.21=ng/ml)

110 胚胎瘤： 非精原细胞睾丸细胞癌、卵黄囊肿瘤 联合测定AFP和CEA鉴别肿瘤
[临床意义] 原发性肝癌：继发于肝硬化和慢性肝炎 AFP测定适合于肝细胞癌早期诊断， 原发性肝细胞癌患者AFP＞1000ng/ml 胚胎瘤： 非精原细胞睾丸细胞癌、卵黄囊肿瘤 联合测定AFP和CEA鉴别肿瘤 胃癌、结直肠癌、胰腺癌及肝转移癌、肝炎、肝硬化、crobn’s病、息肉（＜400ng/ml）、先天性胆管闭锁 妊娠：胎儿神经管开放性缺陷、肾畸形、脐膨出 明显升高 N或稍高 原发性肝癌 低 高 肝转移癌 AFP CEA

111 注意： 持续1个月以上,能排除妊娠、活动性肝炎、 幼儿性睾丸或卵巢、畸胎瘤等可确诊肝癌。
原发性肝癌 定性 （+） 定量> 500 ug/L(77%) 持续1个月以上,能排除妊娠、活动性肝炎、 幼儿性睾丸或卵巢、畸胎瘤等可确诊肝癌。 继发肝癌 一般不升高

112 肝炎 一过性升高，< 300ug/L，随着肝细胞修复而下降
病毒性肝炎肝细胞重新具有了产生AFP的能力. 急性、慢性肝炎均可升高

113 绒毛膜促性腺激素 （Human Chorionic Gonadotrophin，HCG） HCG：唾液糖蛋白，由α、β亚单位组成 链与LH、FSH、TSH相同 主要功能：维持黄体的功能，有利于子宫内膜增生 [正常参考值] 总HCG：非妊娠妇女≤4mIU/ml 绝经期后≤9mIU/ml

114 [临床意义] HCG升高 受孕1周后诊断怀孕 滋养层肿瘤：葡萄胎、绒毛膜癌 胚胎瘤的诊断和监测，如睾丸胚胎瘤，卵巢胚胎瘤 癌症分期，肿瘤质量及绒癌和胚胎瘤的预后有关 卵巢癌、子宫内膜异位症的治疗监测 HCG减低：流产、宫外孕、妊毒症、死胎

115 癌抗原15-3 （Cancer Antigen15-3，CA15-3） CA15-3属糖蛋白，为乳腺癌相关抗原 是乳腺癌的标志物 主要用于乳腺癌的辅助诊断和乳腺癌治疗期间的监测乳腺癌转移、复发的诊断和监测 对蛋白酶、神经酰胺酶敏感，血清应避免微生物污染 [正常参考值] 0~22U/ml（95%界限） 0~30U/ml（99%界限）

116 [临床意义] CA15-3升高 乳腺癌： CA15-3＞100U/ml 乳腺癌转移 卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌等晚期
联合CEA增加乳腺癌早期诊断敏感性和特异性 CA15-3＞100U/ml 乳腺癌转移 卵巢癌、子宫颈癌、子宫内膜癌等晚期 支气管癌、肺癌、大肠癌、胰腺癌 肝硬化、肝炎、良性乳腺病 （升高的幅度小而恒定）

117 （Carbohydrate Antigen19-9，CA19-9）
糖抗原19-9 （Carbohydrate Antigen19-9，CA19-9） CA19-9胃肠癌相关抗原，从大肠癌中分离出来 生物半寿期为7小时 胎儿胃、小肠、大肠、胰腺和肝的上皮细胞中含有此类抗原 正常人分泌物（唾液、精液、乳汁、消化液）也存在 [正常参考值] 健康人：0~25U/ml （95%） ＜37U/ml（ 99%）

118 [临床意义] CA19-9升高 胰腺癌的主要标志物，阳性率70~92% 术后10~20天 恢复至正常水平 复发前6~12个月 持续升高
术后10~20天 恢复至正常水平 复发前6~12个月 持续升高 联合CEA胰腺癌诊断敏感性可升高5~7% ＞10000U/ml 血源性转移 肝胆系统癌、胃癌和大肠癌， 阳性率分别为67~85%、25~60%、18~58% 急性肝炎、慢性肝、胆道疾病、胆囊炎、胰腺炎

119 癌抗原72-4（Cancer Antigen72-4，CA72-4）
是消化道肿瘤和卵巢癌的标志物 [正常参考值] U/ml [临床意义] CA72-4升高 胃癌：监测的首选标志物，灵敏度优于CA19-9和CEA 三者联合提高诊断阳性率，达70%

120 卵巢癌：辅助鉴别粘蛋白性卵巢癌（CA125正常）
结肠癌、胰腺癌和非小细胞肺癌 良性疾病及正常人罕见CA72-4升高

121 鳞状细胞癌相关抗原 (Squamous Cell Carcinoma Antigen ，SCC抗原) SCC抗原是肿瘤相关抗原TA-4亚成分 Kato等1977年首先报道 正常和病理性鳞状细胞中均可检出 [正常参考值] ≤2.5ng/ml

122 [临床意义] SCC升高： 诊断鳞癌的肿瘤标志物：宫颈癌、肺癌、鼻咽癌等 其浓度随病期加重而增高 肿瘤疗效复发转移 推荐和CEA联合使用 肝炎、肝硬化、胰腺炎、肺炎、肾功衰竭、妇科良性病 注：因汗液、唾液中存有SCC，实验中应注意防止污染

123 癌抗原125（Cancer Antigen125，CA125）
在癌变的卵巢上皮细胞膜上表达 半寿期2~6天 是最重要的卵巢癌相关抗原 [正常参考值] ＜35U/ml 35~65U/ml常被定为“grey zone” 由于由免疫肺腺癌细胞 pc -9产生的单抗130-22和145-9识别的分子同免疫卵巢癌细胞珠产生的单抗Dc125识别的分子（CA125）相同，故肺癌患者血清CA125水平亦明显升高，阳性率可达 55%，但特异性差故不适于肺癌诊断评价。

124 [临床意义] CA125升高 卵巢癌： 诊断敏感性90% 与卵巢癌的质量、分期及预后有关 卵巢癌复发的极早期即升高 上皮性卵巢癌（尤其浆液性腺癌）明显升高 粘液性一般不升高

125 子宫内膜癌、结肠癌、乳腺癌（59%） 肺癌：明显升高，阳性率 55% 特异性差，不适于诊断 妇科疾病、子宫内膜异位症、乳腺病等良性

126 （Prostate-specific Antigen ，PSA）
前列腺特异抗原 （Prostate-specific Antigen ，PSA） PSA是一种糖蛋白，1979年由Wang等从人前列腺中分离出来 正常情况下，前列腺腺胞-淋巴系统间屏障作用 血内含量甚微 肿瘤或其它屏障破坏病变 血中PSA升高 人PSA是一种丝氨酸蛋白酶，借助分解纤维连结蛋白参与精液的液化 生物半寿期2~5天 主要用于前列腺癌的诊断，治疗检查和监测 前列腺腺胞内富含PSA的内容物与淋巴系统间存在一屏障（由内皮层、基底细胞层和基底膜构成） 当肿瘤或其它病变破坏了此屏障，腺胞内容物即可漏入淋巴系统并随之入血，致血中PSA升高。

127 [正常参考值] ≤40岁 ~ 1.3g/L 41~ ~2.5g/L 51~ ~3.5g/L 61~ ~4.5g/L ＞70岁 g/L ＞4g/L可做为cut off值

128 以PSA4g/L为诊断标准，敏感性71%，特异性49%
[临床意义] 前列腺癌： 诊断特异性和敏感性均明显优于PAP 肿瘤生长的早期指征 ＞50岁男性用PSA筛选的意义在讨论中 以PSA4g/L为诊断标准，敏感性71%，特异性49% 急性前列腺炎和良性前列腺肥大 PSA测定是明确诊断的方法，可以做出有前列腺癌的可能性

129 结合PSA（Combined PSA,CPSA）
游离PSA（Free PSA , F-PSA） 结合PSA（Combined PSA,CPSA） 1抗糜蛋白酶结合 PSA-ACT，占绝大部分 结合PSA（CPSA） 80%~90% 总PSA 2巨球蛋白结合 PSA-MG，小部分 （TPSA） 游离PSA（FPSA） 10~20%

130 CPSA占TPSA的百分率具有重要的诊断价值
TPSA 4.0~10.0g/L 血清FPSA/TPSA25% 良性增生： FPSA/TPSA＞25% 普查： 以F/TPSA21~23%作为良性的临界值， 其特异性可达90%（DPC公司） F/T25%，C/T75%作为恶性的诊断标准 F/C0.15作为恶性的诊断标准 当PSA与2巨球蛋白结合时它会被封闭影响检测 恶性肿瘤：

131 （Neuron-Specific Enolase，NSE）
神经元特异性烯醇酶 （Neuron-Specific Enolase，NSE） 在中枢和末稍神经元 神经外胚层来源的恶性肿瘤 （如支气管小细胞癌、成神经细胞瘤、肠癌等） NSE是以组织为基础，血清中NSE的检测表示瘤细胞有坏死 （不适于早期肿瘤的诊断） 治疗前NSE含量有预后价值 产生NSE NSE可用于组织学分型，小细胞支气管癌是生长非常迅速的癌症，采用化学疗法基本上可以治愈。使用NSE早期分类可促进疗法的选择。 [正常参考值] ＜15g/L

132 诊断、治疗检查和监测 [临床意义] 小细胞支气管癌 成神经细胞瘤 NSE应与CEA联合使用
肝胚细胞瘤、起源于神经外胚层或神经内分泌的肿瘤、白血病 脑外伤、败血症休克、肺炎等良性病 注： 溶血时NSE值升高 (红细胞、浆细胞和血小板含有NSE) 标本放置时间达60~90分钟可见有意义的升高 诊断、治疗检查和监测

133 可溶性细胞角蛋白19片段 （cytokeratin 19 fragments， CYFRA21-1） 细胞角蛋白适合作为肿瘤病理学的鉴别标志物 完整的细胞角蛋白溶解性极差，但可在血清中检测到可溶性片段 CYFRA21-1是细胞角蛋白19片段 [正常参考值] ＜3.3ng/ml

134 [临床意义] CYFRA211升高 非小细胞肺癌的辅助诊断和治疗监测 侵袭肌层的膀胱癌的病程监测 急性肺炎、肺结核 间质性肺疾病 肝硬化和肾衰 轻微升高

135 联合检测方案 提高肿瘤诊断的阳性率和特异性 各 种 肿 瘤 联 合 检 测 方 案 结肠直肠癌 CEA + CA19-9 + CA50
胰腺癌 CA CEA 乳腺癌 CA CEA + CA549 卵巢癌 CA125 + CEA + CA72-4 肺癌 CEA，NSE，CYFRA21-1

136 各 种 肿 瘤 联 合 检 测 方 案 子宫颈癌 CEA，SCC 睾丸癌 HCG，AFP，SP-1 甲状腺癌 HTG，CT，CEA
前列腺癌 PSA，PAP 耳鼻喉鳞癌 SCC，CEA 肝细胞癌 AFP + CA19-9，CEA 食道癌 SCC，CEA 膀胱癌 TPA，CEA

137 谢 谢