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任务2.3 平板菌落计数
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1. 直接计数, 血球计数板法，其所计为微生物总数
微生物的计数方法: 1. 直接计数, 血球计数板法，其所计为微生物总数 (包括死细胞和活细胞), 而且适用于体积较大的微生物 如酵母、霉菌的孢子等。 2. 间接计数, 平板菌落计数，该方法不受微生物的大 小的限制，所计的只是活的可培养微生物，而且可用 于混合微生物样品的计数。
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平板菌落计数法原理： 将一定稀释度的样品均匀涂布到固体培养基中，培养长出单菌落后，可认为每个单菌落由一个微生物长出，统计菌落数目，即可计算出样品中的微生物浓度。
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操作步骤 1．编号： 取无菌平皿 8套，在皿底分别标记10-3、10-4 、10-5、10 -6各2套。（不得开盖）
操作步骤 1．编号： 取无菌平皿 8套，在皿底分别标记10-3、10-4 、10-5、10 -6各2套。（不得开盖） 另取6支盛有9mL无菌水的试管，排列于试管架上，依次标记10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
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2．稀释 用无菌吸管取1ml样品加入含9ml无菌水的10-1试管中，此即为10倍稀释。将10-1试管振荡，充分混匀。用另一吸管吸取10-1菌液1ml，加至含有9ml无菌水的10-2试管中，此即为100倍稀释。其余10-3、10-4、10-5、10-6稀释依次类推
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3．取样 用4支1mL无菌吸管分别精确地吸取10-3、10-4、10-5、10-6的稀释菌液1ml，对号放入编好号的无菌培养皿中。
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4．倒平板 于上述盛有不同稀释度菌液的培养皿中，倒入溶化后冷却至45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基约10—15mL，置水平位置，迅速旋动混匀，待凝固后，倒置于37℃温室中培养。
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5．计数 培养24小时后，取出培养皿，算出同一稀释度两个平皿上的菌落平均数，并按下列公式进行计算： 每毫升中总活菌数=同一稀释度两次重复的菌落平均数×稀释倍数
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结果记录 一般选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释度计算每毫升的菌数最为合适。 同一稀释度的两个重复的菌数不能相差很悬殊。
结果记录 一般选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释度计算每毫升的菌数最为合适。 同一稀释度的两个重复的菌数不能相差很悬殊。 不同稀释度计算出的每毫升菌液中总活菌数也不能相差悬殊，如相差较大，表示试验不精确。
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