厌氧菌 病原生物学教研室

梭菌属 (Clostridium) 是一群专性厌氧、能形成芽胞、 G ＋的粗大杆菌。 它们广泛分布于自然界的土壤中，有些可寄生在 动物和人体的肠道内。模式种为丁酸梭菌 (C.butyricum) 。 破伤风梭菌 (C.tetani) ：破伤风； 产气荚膜梭菌 (C.perfringens) ：气性坏疽； 肉毒梭菌 (C.botulinum) ：肉毒中毒； 艰难梭菌 (C.difficile) ：假膜性结肠炎。

生物学性状  形态与染色

生物学性状  培养特性 破伤风梭菌 平板培养基：不规则菌落； 肉渣培养基：肉渣部分被消化，微变黑； 肉毒梭菌 (C.botulinum) 平板培养基：不规则菌落； 肉渣培养基：肉渣被消化，有恶臭。

产气荚膜梭菌 血平板培养基：繁殖极快，有双环溶血 内 窄的乙型溶血环； 外 宽的半溶血环； 肉渣培养基：不消化肉渣，粉红色； 牛乳培养基：汹涌发酵 (stormy fermentation) ； 生物学性状  培养特性

生物学性状  抵抗力 繁殖体的抵抗力与一般细菌相似。但芽胞抵抗力很 强，能耐煮沸 15 ～ 90min ， 5% 石炭酸经 15h 才能杀灭， 芽胞在土壤中可存活数十年。

破伤风梭菌  致病物质 破伤风痉挛毒素 (tetanospasmin) ： 1 ）一种强毒性蛋白质，不耐热，可被肠道蛋白酶破坏。 2 ）由细菌质粒编码，由两条肽链借二硫键联结而成： α 轻链：具有毒性作用； β 重键：能与神经节苷脂 (ganglioside) 结合； 3 ）神经毒素，对脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲合力。 4 ）毒性极强，每毫克纯化的结晶可杀死 2000 万只小鼠。 具有免疫原性，经 0.3% 甲醛作用 4w 后脱毒成为类毒素。 致病性与免疫性

 致病条件 1 ）伤口深而窄； 2 ）混有泥土、异物，坏死组织较多、局部组织缺血； 3 ）同时伴有需氧菌混合感染。

致病性与免疫性  发病机理 破伤风梭菌及芽胞 机体 局部生长繁殖 外毒素 脊髓前角，并可到达脑干 封闭抑制性突触的 介质释放 伸肌、屈肌同时强烈收缩 强直痉挛 伤口附近肌肉痉挛， 嚼肌痉挛 ( 引起牙关紧闭和吞咽困难 ); 躯干及四肢肌肉强直 ( 呈特有的角弓反张体征 ); 膈肌痉挛，呼吸困难 窒息而死 。 创伤 神经纤维的间隙 淋巴液和血液

致病性与免疫性  免疫性 破伤风免疫是典型的抗毒素免疫： 微量毒素即可致病，不足以引起免疫；并且毒素迅速与神经 组织牢固结合，不能有效地刺激免疫系统引起免疫应答。 有效地获得抗毒素的途径是通过类毒素的预防注射而获得的 自动免疫，或通过注入大剂量抗毒素而获得的被动免疫。

破伤风的临床诊断主要结合创伤史和观察特有的体 征。微生物学检查对早期诊断意义不大，一般不做。 必要时可取伤口渗出物或坏死组织涂片染色镜检及 厌氧菌培养，并以培养物滤液做动物试验，以确定有 无毒素产生。 微生物学检查法

1. 人工自动免疫 注射精制破伤风类毒素。 （ 1 ）平时：对部队战士、建筑工人及其他易受外伤的人群： 2 次基础 免疫 / 第一年； 1 年后加强免疫 1 次；加强免疫 1 次 /5 ～ 10 年。 满 3 个月至 6 岁儿童：白 - 百 - 破 (DPT)3 联疫苗， 3 次， 4 ～ 6w/ 次。 孕妇：预防新生儿破伤风。 （ 2 ）患者愈后 / 早期接受治疗者：注射类毒素 获得有效免疫。 2. 人工被动免疫 注射破伤风抗毒素 (tetanus antitoxin,TAT) 。 (1) 紧急预防 肌肉注射 1500 ～ 3000 单位 TAT( 防止血清过敏反应 ) 。 (2) 特异治疗 早期足量用 TAT 治疗。一般须用 10 ～ 20 万单位。 3. 抗生素的使用 大剂量青霉素或甲硝唑能有效地抑制破伤风梭菌在局部病灶繁殖， 并对混合感染的细菌也有作用。 防治原则

产气荚膜梭菌 产气荚膜梭菌产生的毒素和酶类 毒素或者酶类生物学活性 α 毒素（卵磷脂酶）增加血管通透性，溶解红细胞、血 小板 β 毒素组织坏死作用 ε 毒素具有通透酶活性 ι 毒素组织坏死作用、 ADP 的核糖基化作 用 δ 毒素溶解红细胞 θ 毒素溶血毒性和细胞毒活性 κ 毒素（胶原酶）胶原酶和明胶酶活性 λ 毒素蛋白酶活性 μ 毒素（透明质酸酶）透明质酸酶活性 ν 毒素脱氧核糖核酸酶活性、溶血毒性 肠毒素增加肠粘膜细胞通透性 神经氨酸酶改变神经细胞表面的神经节苷脂受 体、促进毛细血管血栓形成  致病物质 致病性

 所致疾病 气性坏疽 (gas gangrene) ：气性坏疽是严重的创伤感染性疾病， 以局部组织坏死、气肿、水肿、恶臭及全身中毒为特征。 细菌 8 ～ 48h 内迅速繁殖 周围正常组织 （不入血） 分解肌肉和组织中的糖类 大量气体 气肿 影响血液供应 组织坏死。 食物中毒： A 型产气荚膜梭菌所产生的肠毒素可引起食物中毒。 伤口酶 毒素

气性坏疽发病急剧，后果严重，需要尽早准确的做出微生 物学诊断，争取早期治疗： 标本 镜检：可发现 G ＋ 大杆菌，并伴有其他杂菌和少量形态 不规则的白细胞。 培养基 厌氧培养 进一步鉴定 : 牛乳培养基 生化反应 动物实验 微生物学检查法

预防措施主要是外科处理： 1 ）及时处理伤口，扩创、局部用 H 2 O 2 反复冲洗，切 除感染及坏死组织； 2 ）早期可用多价抗毒素血清； 3 ）同时使用抗生素抑制细菌繁殖。 由于该菌在环境中很快形成芽胞，故必须严密隔 离病人，并对所用器械及敷料彻底灭菌，避免在医院 内传播。 防治原则

肉毒梭菌  致病物质 肉毒毒素： 根据 Ag 不同可将肉毒杆菌分为 A 、 B 、 C1 、 C2 、 D 、 E 、 F 和 G 等 8 个型。对人致病的主要是 A 、 B 、 E 三个型。 肉毒毒素具有嗜神经性，进入机体后作用于脑及周围神 经末梢的神经肌肉接头处，阻止乙酰胆碱的释放，导致肌 肉麻痹。 眼部肌肉麻痹 ( 出现复视、斜视、眼睑下垂、瞳孔散大 ) ； 进而咽部肌肉麻痹（出现吞咽困难、言语不清和呼吸困难）； 若继续发展终因呼吸肌、心肌麻痹而死亡。 致病性

 所致疾病 肉毒中毒 1. 食物肉毒中毒 毒素性食物中毒。 食入肉毒毒素后，经几小时至 3d 左右潜伏期，病人开 始出现恶心、呕吐、头晕、头痛、乏力。继而出现特有 的神经麻痹症状和体征。 2. 婴儿肉毒中毒 婴儿因喂食有该菌芽胞污染的蜂蜜或其他食物而感染 致病。 3. 创伤肉毒中毒 肉毒梭菌的芽胞污染了创伤后，如果局部具备厌氧 条件，芽胞发芽形成繁殖体而产生毒素，毒素被吸收后 而致病。 致病性

动物试验检出毒素： 第 1 组：小鼠腹腔注入上清液各 0.5ml 。如有毒素，一般 于 1 ～ 2d 出现四肢麻痹、眼睑下垂等中毒症状， 最后死于心力衰竭和呼吸困难； 第 2 组：小鼠注射煮沸的上清液，一般不发病； 第 3 组：小鼠注射不加热上清液 + 多价肉毒抗血清，观 察保护作用。如用分型抗毒素还可确定毒素型别。 微生物学检查法

预防主要是加强食品管理和监督，定期抽样检查。 食品进食前加热煮沸即可破坏毒素。 治疗应尽早注射 A 、 B 、 E3 型多价抗血清；同时加 强护理及对症治疗。 防治原则

艰难梭菌 艰难梭菌 (C.difficile) 为 G ＋ 粗大杆菌，芽胞呈卵圆形 位于菌体近极端。 常规厌氧培养生长不好，对培养基的要求较高，故 名。常用的培养基是以蛋黄 - 果糖琼脂为基础培养基， 加入环丝氨酸和头孢西丁作为选择剂。

艰难梭菌是人类肠道中的正常菌群，但数量不多。 当长期使用氨苄青霉素、头孢菌素、红霉素、氯林可 霉素以及抗肿瘤化学制剂，肠道中的乳杆菌、双歧杆 菌及真菌对艰难梭菌的拮抗作用受到影响，耐药的艰 难梭菌可因药物的选择作用而大量繁殖后产生毒素致 病，引发 抗生素相关性腹泻 (antibiotic-associated diarrhea) ； 假膜性结肠炎 (pseudomembranous colitis) 。 临床表现为严重腹泻、腹痛、伴有全身中毒症状， 常并发有毒素性巨结肠的形成。 治疗可用万古霉素或甲硝唑，并口服调整正常菌群 的制剂 。

拟杆菌属 生物学性状 G － 杆菌，长短不一，呈多形性。 牛心脑浸液血琼脂平板上厌氧培养。 本属模式种为脆弱拟杆菌 (B.fragilis) 。

致 病 性致 病 性  致病物质 内毒素、荚膜、菌毛以及所产生的肝素酶和胶原酶。 肝素酶可降解肝素，促进凝血，有利于血栓性静脉 炎和迁徙性脓肿的形成，胶原酶则有利于细菌的扩散。 拟杆菌主要引起颅内、腹腔和盆腔的感染。

 致病条件 ①屏障作用受损手术、拔牙和穿孔等使细菌侵入非正 常寄居的部位； ②菌群失调长期使用抗生素使体内一种或几种厌氧菌 得到优势增长，破坏了正常菌群的平衡。如脆弱拟杆 菌对氨基糖苷类抗生素有耐药性； ③抵抗力降低在治疗中使用激素、免疫抑制剂或 X 线， 恶性肿瘤、糖尿病和大面积烧伤等均可造成免疫功能 下降； ④局部组织供血障碍 如血管损伤、造成局部厌氧微环 境，有助于厌氧菌生长繁殖。 致 病 性致 病 性

 感染特点 ①感染部位接近粘膜表面 发生在口腔、鼻窦、鼻咽 部、胸腔、腹腔和肛门会阴附近的炎症、脓疡及其他 深部脓疡； ②分泌物为血性或黑色，并有恶臭； ③分泌物直接涂片镜检可见到细菌；而一般培养则无 细菌生长； ④长期使用氨基糖苷类抗生素如链霉素、卡那霉素、 新霉素、庆大霉素等治疗无效。 致 病 性致 病 性