Charaterization of Antimicrobial Substances Produces by Enterococcus faecalis MRR 10- 3, Isolated from the Uropygial Gland of the Hoopoe (Upupa epops)

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Charaterization of Antimicrobial Substances Produces by Enterococcus faecalis MRR 10- 3, Isolated from the Uropygial Gland of the Hoopoe (Upupa epops)

前言 此篇文章是第一篇描述由尾脂腺分離出的細菌產 生之 bacteriocin 。 在某些鳥類 ( 例如:戴勝 ) 尾脂腺的分泌物會受到 性別和季節的影響,在繁殖季節時雌鳥及剛出生 的鶵鳥的分泌物會由白色變成褐色,而且會變得 比雄鳥更黏、更臭。 當鳥以啄整理羽毛,使尾脂腺的分泌物遍佈在全 身羽毛會讓牠的羽毛更加柔順且能水,而且在幫 助鳥對抗掠食者及寄生者扮演一個重要角色。

前言 作者從一個剛出生的鶵鳥中分離出一株細菌,藉 由表型及基因型的方式明確鑑定出此細菌為 Enterococcus faecalis 。 E. faecalis 產生的抗菌物質可抑制全部的 gram- positive 及一些 gram-negative 在此實驗中被分析的 菌,此抗菌物質被分辨出為 enterocins 中的一個 bacteriocin 。 這個藉由生長在尾脂腺的 Enterococcal strain 產生 的廣效性抗菌物質對於巢的衛生、蛋及鶵鳥的健 康可能是重要的。

方法 菌種是由 Guadix 在 2004 年繁殖季節時,剛出生鶵 鳥的尾脂腺分泌物中取得,藉由 micropiptte 直接從 活鳥的尾脂腺吸取。 為了減少汙染,在取樣前腺體的開口周圍的羽毛 被分開。 E. faecalis MRR 10-3 被選擇做為產生抗菌物質的 菌株, E. faecalis S-47 為一個分析抑菌能力的指標 菌,其它在 table 1 所列菌是為了建立抗菌物質的 抑制範圍。

方法 為了辨別 E. faecalis MRR 10-3 藉由表型的觀察、 生化方法 ( 如: API ID 20 Strep system) 、 PCR 。 所有的菌在 37 o C 培養於 BHI broth 上 18 小時。 為了避免有機酸對抑制效果的影響, BHI agar 必 須溶解在於 0.1M 的磷酸鈉緩衝液中 (pH7.2) 。 Bacteriocin 是由 complex medium broth 和隔夜培養 的 E. faecalis MRR 10-3(4% vol/vol) 混合一起在 37 o C 培養 10 小時,然後分離出來。

補充 Hoopoe (Upupa epops) :戴勝,台灣為春秋兩季稀有的過境鳥。大抵 營巢於土穴裡,雛鳥受驚時會由皮脂腺排出極強的霉味,故在大陸有 臭婆娘之稱。通常在地上單獨或 2~3 隻成小群,鳴聲「 hoopo , hoopo 」,故英名 Hoopoe 。雖然牠們在地上奔跑快速,但飛翔卻不快。 喜歡捕食蠅、蜘蛛、煌蟲、蚯蚓,或蜥蜴等小動物。金門人稱戴勝為 墓坑鳥,因牠們常棲息或營巢於破墓穴(按閩南語墓穴音為幕坑)而 名。也因為牠們常在墳地出入,故金門人認為戴勝是一種不吉祥的鳥 類。成鳥約長 : 27~29 公分。

補充 Uropygial gland :尾脂腺,會產生油狀分泌物,直到以啄整理羽毛, 使羽毛潤滑並產生防水作用。 腦心浸出物培養液( Brain Heart Infusion Broth 簡稱 BHI Broth ) Caalf brain infusion 22g Beef heart infusion 5g Proteose peptone 1.5g NaCl 4g Na2HPO4 ‧ 12H2O 1.5g Dextrose 5g 蒸餾水 1000ml 加熱溶解後,分裝於試管中,以 121 ℃滅菌 15 分鐘, 最後 pH 值為 7.4 士 0.2 。