第19章 支原体 Mycoplasma 南华大学医学院 吴移谋 教授
第一节 概述 定义 缺乏细胞壁 形态上呈高度多形性 能通过除菌滤器 在无生命培养基中能生长繁殖 最小的原核细胞型微生物 能形成有分支的长丝,故称支原体
支原体分类 柔膜体纲 支原体目 支原体科 无胆甾原体科 螺原体科 支原体属 脲原体属 解脲脲原体 肺炎支原体,人型支原体,生殖支原体,穿透支原体,发酵支原体,梨支原体 解脲脲原体
一、生物学性状 (一)形态 0.3~0.5 μm 无细胞壁 高度多形性:球、杆、丝状和分枝状等 一般Giemsa染色较好,染为淡紫色
(二)结构 细胞膜厚,分外中内三层,内外两层为蛋白质及糖类,中层为脂类(磷脂为主),胆固醇位于磷脂分子之间,保持细胞膜完整性有作用。凡作用于胆固醇的物质,如皂素、洋地黄甙、二性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡。 特殊的顶端结构: 粘附宿主上皮 细胞表面,与支原 体的致病有关。
(三)培养特性 营养丰富的培养基: 10%~20%人或动物血清以提供胆固醇与其 它长链脂肪酸,多数还需添加酵母浸液、组 织浸液、核酸提取物和辅酶。 pH:适宜7.6~8.0(<7.0易死亡),但解脲脲 原体最适pH5.5~6.5 兼性厌氧: 大多寄生性支原体在37℃时在微氧环境(含 5%CO2和90%N2)中生长最佳。 繁殖方式多样:二分裂繁殖外,还有分节、断裂、 出芽或分枝等方式
固体培养基: 2~7天长出直径约10~600 μm的典型的“荷包蛋样”菌落:低倍镜下见菌落呈圆形,中心致密隆起,深入琼脂,外周由颗粒包绕。 液体培养基: 清亮,用颜色变化 单位(CCU)表示。 需用放大镜/低倍显微镜观察
支原体典型菌落
支原体与细菌L型的异同点 不同点 相同点 缺乏细胞壁,形态多样,能通过滤菌器。 固体培养—菌落呈荷包蛋样或颗粒状。 细胞壁缺失原因 在遗传上与细菌无关 与原菌相关,可以回复细胞膜 含高浓度固醇 细胞膜不含固醇 培养特性 需要胆固醇 大多需要高渗培养 菌落大小 生长慢,菌落小 菌落稍大 ( 0.6~1.0) 液体培养 液体培养混浊度极低 有一定混浊度,可附壁 相同点 缺乏细胞壁,形态多样,能通过滤菌器。 固体培养—菌落呈荷包蛋样或颗粒状。 临床表现相似—间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等
生化反应 支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附细胞 致病性 流产及不孕不育 肺炎支原体 + — — 红细胞 肺炎、支气管炎 支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附细胞 致病性 肺炎支原体 + — — 红细胞 肺炎、支气管炎 人型支原体 — + — — 泌尿生殖道感染 生殖器支原体 + — — 红细胞 泌尿生殖道感染 穿透支原体 + + — 红细胞 条件感染 CD4+T细胞 多见于艾滋病 巨噬细胞 溶脲脲原体 — — + — 泌尿生殖道感染 流产及不孕不育
(五)抵抗力 ♣对化学消毒剂敏感,对结晶紫、 醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力; ♣对影响细胞壁合成的抗生素天然耐受,但对干扰蛋白质合成的抗生素如强力霉素、交沙霉素等敏感。
二、致病性与免疫性 (一)致病机制 ♣粘附素:粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞 ♣ 荚膜或微荚膜:抗吞噬作用 ♣毒性代谢产物:神经毒素、磷脂酶C、核酸酶、过氧化氢和超氧离离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理损伤 ♣超抗原:免疫调节 ♣其它:如穿透支原体粘附侵入CD4+ T细胞引起损伤
二、致病性与免疫性 (二)所致疾病 支原体 致病性 肺炎支原体 原发性非典型肺炎、支气管炎 人型支原体 泌尿生殖道感染 支原体 致病性 肺炎支原体 原发性非典型肺炎、支气管炎 人型支原体 泌尿生殖道感染 生殖器支原体 泌尿生殖道感染 穿透支原体 多见于艾滋病 溶脲脲原体 泌尿生殖道感染
第二节 肺炎支原体 一、生物学性状 0.2~0.3μm,高度多形性; 初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中,一般10天左右长出菌落;多次传代后生长加快,菌落呈“油煎蛋”状; 能发酵葡萄糖,不能利用精氨酸与尿素; 对美蓝、醋酸铊、青霉素不敏感。
二、致病性与免疫性 (一)致病性 1.主要经飞沫传播,但大多数发生于夏 末秋初,5~15岁青少年发病率最高。 2.含特殊的顶端结构:P1表面蛋白(170 kDa)和P30(32 kDa)为主要的粘附蛋白,使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。 3.肺炎支原体具有超抗原作用,能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子(如TNF-α、IL-1、IL-6)引起组织损伤。
二、致病性与免疫性 (二)所致疾病 原发性非典型性肺炎(primary atypical pneumonia),临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主,有时并发支气管肺炎、皮疹、心血管和神经系统症状。
四、防治原则 防治原则 大环内酯类药物 喹诺酮类药物
第三节 解脲脲原体 一、生物学性状 形态:0.05~0.3 μm,单个或成双排列 固体培养:48 h后长出直径15~30 μm “油煎蛋”状菌落。 最适pH为5.5~6.5。 生化反应:分解尿素,不分解糖类和精氨酸 抵抗力:对1:2000醋酸铊不敏感 抗原:MB抗原是其主要膜抗原,将解脲脲原 体分为A、B两大群,14个血清型
二、致病性与免疫性 (一)致病机制 -粘附于宿主细胞表面,引起细胞膜损伤; -产生毒性代谢产物如NH3,对宿主细胞有 急性毒性作用; -磷脂酶损伤宿主的细胞膜。
二、致病性与免疫性 (二)所致疾病 非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睾炎等泌尿生殖道疾病,还与自然流产、早产、死胎和男性不孕有关。 造成不孕症可能原因: 1.吸附于精子表面,阻碍精子运动。 2.产生神经氨酸酶样物质,干扰精子与卵子结合。 3.与精子有共同抗原,机体产生抗体对精子造成免疫损伤。
三、微生物学检查法 病原体检测 接种液体培养基,分解尿素产碱,酚红指示剂由橘黄色变为红色;再取0.2ml培养物转种于固体培养基,在5%CO2和90%N2的环境中经37℃培养24~48h,用低倍镜观察菌落,进一步鉴定需用血清学检测。
三、微生物学检查法 核酸检测 PCR检测: 检测尿素酶基因、多带抗原(MB-Ag)基因和16SrRNA基因。此法快速、特异,适宜于大批量标本检测。
思考题 1、支原体的生物学性状与L-型细菌的区别如何?