Henrike Potthast 博士(h.potthast@bfarm.de) 如何开展生物等效性试验 药品质量、GMP和生物等效性研究的培训 中国 浙江 嘉兴 2007年11月5日－11月9日 Henrike Potthast 博士(h.potthast@bfarm.de) (WHO短期顾问)

参考指南 WHO Working Document Multisource (Generic) Pharmaceutical Products: Guidelines on Registration Requirements to Establish Interchangeability November 2005 EU “Note for Guidance on the Investigation of Bioavailability and Bioequivalence” CPMP/EWP/QWP/1401/98 and related guidances and documents (www.emea.eu.int/pdfs/human/ewp ) FDA - Guidance for Industry: “Bioavailability and Bioequivalence Studies for Orally Administered Drug Products – General Considerations” (Oct. 2000) Canadian Guidance for Industry: “Conduct and Analysis of Bioavailability and Bioequivalence Studies – Part A: Oral Dosage Formulations used for systemic effects.” (1992)……………………….an related/others

背景知识 通用技术文件CTD 5.3 临床研究报告 5.3.1 生物药剂学研究报告 （生物利用度和生物等效性：“制剂对药物产生什么影响”） 5.3.2. + 5.3.3 人体药代动力学研究报告 （在患处和体内：“机体对药物产生了什么影响”） 5.3.4 人体药效学研究报告 5.3.5 有效性和安全性研究报告

背景知识 药物常通过各种剂型来摄取。 剂型可以影响药物的生物利用度。 药物制剂存在的差异可以导致不同的生物利用度。 制剂差异的效果特别特别适用于口服剂型，这种效果可以通过吸收过程的所 有阶段验证。 体外试验能提供有价值的信息，但是这对于药品的生物利用度或临床试验不 一定是一份可靠的指南。 不能假设相似的剂型是具有治疗等效性，除非治疗等效性（生物等效性）已 经在人身上得到验证。治疗等效性不能简单假设因为还没有治疗非等效的报 道。 (nach D.N. Wade aus ‚Drug Treatment‘, Graeme S. Avery, 1980, Adis Press, Sydney)

定义 生物利用度－活性成分从制剂中释放和扩散，逐渐被循环系统所利用 （药品的特性） 生物等效性－在规定的接受范围内具有相等的生物利用度。 药剂等效性  生物等效性 生物等效性  治疗等效值

定义 ♦ “ 如果两种药品具有药剂等效性或者药物替代性，以及在相同摩尔剂量给药之后两种药品的生物利用度达到相同的疗效，那么它们是生物等效药品。在有效性和安全性方面，本质上是相同的。” （EU中BA和BE指南2.4节） Possible surrogate for full clinical/toxicological documentation

定义 生物等效性是指：药学等效制剂或可替换药物在一个特定的试验中、相同条件下、相同摩尔剂量给药，其活性成分或者活性组成在药物作用部位吸收和扩散程度无显著性差异。 FDA Guidance for Industry Bioavailability and Bioequivalence Studies for orally administered Drug Products-General Considerations March 2003 FDA工业指南：口服制剂的生物利用度和生物等效性研究的总则 2003年 3月

定义 生物等效性主要是指制剂中活性成分具有相同的释放速度，以及接下来在体循环中具有同样的吸收。 WHO Working Document Multisource (Generic) Pharmaceutical Products: Guidelines on Registration Requirements to Establish Interchangeability November 2005 WHO关于多来源（仿制）药品资料：如何建立可互换性的注册要求指导原则 2005年11月

定义 如果药品吸收的部分剂量相同，人体就会对所吸收的化合物有相同的反应。即使在疾病期间，这一观点仍然是一个有效的依据。 [Faassen et al. Clin Pharmacokinet 43 (2004)1117] 药物制剂会对药物成分产生什么影响？

如何计划一个生物等效性试验 生物等效性试验 志愿者的体内比较作为“体内溶出度模型” 生物质量控制 比较药品特性，以确保治疗等效性

伦理问题 IEC/IRB: ICH的定义 医学、科学及非科学领域成员组成的独立机构 职责是确保试验中受试者的权利、安全及福利得到保障。 除了其他的事情之外，要对试验方案、修改方案以及受试者获得及证明的知情同意书中涉及的试验方法和资料进行评价、批准、并提供持续评估。 独立的“风险－收益”评估

伦理问题 ICH GCP的组成要求 至少有5名成员 至少有一名成员的主要研究领域是非科学领域 至少有一名成员和试验无关 成员之间没有利益冲突 只有那些独立于研究者和申办者之外的成员可以对试验相关问题进行评估

伦理问题 例：美国FDA关于IRB组成的附加要求： 多元化背景（种族、性别、文化、资历） 不是同一种性别 可以征用特别专家的意见，但是他们没有投票权

伦理问题 所需的文件 方案（至少需要主要研究者签署） 患者知情同意书 研究者手册 受试者招募过程（例如广告）

伦理问题 研究者批准通知作为试验报告的一部分 及时书面批准 试验确认（标题、方案号、版本、研究者、研究地点） 明确所有要评估的项目 评估的日期和地点 试验/试验的相关决定 修改和异议的原因 至少提供的信息 会议日期 评估文件（版本和日期） 成员名单

试验方案

试验方案 描述试验目的、设计类型、研究方法、数据统计分析以及组织试验的文件通常能给出试验的背景和原理。 参考文献：ICH GCP指南

试验方案 总说明/标题页 题目 方案号 版本号/日期 试验委托人详细信息 姓名、地址、电话 监查员/医疗人员  职责！

试验方案 总说明/标题页 研究者详细信息 主要研究人、医学管理人员 其他实验室/试验机构详细资料  职责！

试验方案 方案的制定 研究职责的定义 组织、地点、人员和质量管理规范（QMS） 临床阶段 （是否保证数据的及时传输？） 生物分析阶段 （是否保证数据的及时传输？） 数据统计和汇报（是否保证数据的及时传输？） 存档

制定方案 原料药/制剂 基本特征如： 药物动力学(半衰期，药峰浓度，药峰时间，药物代谢，差异性等?…) 粗略预计的治疗期和清洗期的可行性 (是否可以交叉设计实验?)

制定方案 原料药/制剂 基本特征如： 重要的副作用 (可为健康志愿者接受，伴随用药的必要性，可接受的有关反应 (例如：呕吐)，是否可为怀孕女性接受？）

制定方案 原料药/制剂 基本特征如： 生物学分析方法的概念？ 足够的、可以计量的血浆浓度（最低检测限LOQ）？ 例如：必要或可能的情况下，服用一倍剂量以上的药品。

制定方案 制剂 有效性 证明性文件 成分 体外溶出度 依据GMP要求准备每个志愿者服用的研究用药品 协议中制剂具体细节的修改是必须的(例如：药品标签)

制定方案 制剂 批次数量 实验用批量? 商业用批量? 不能少于100000单位或一次工业生产批量的 10 % (高于上述任何一个都可以)

制定方案 制剂 分析 接近标签上所述 关于研究用药品的成分上的差异 (受试制剂和参比制剂)最好不要大于5 %

受试者 受试者的选择 健康志愿者的加入 (“体内模型”) 合理的入选和排除标准 (方案和病例报告表CRFs) 全部的口头和书面的信息以及知情同意书 志愿者保险 赔偿

受试者 受试者的选择 男性或者女性或者男女不限? “…主办者可能希望既包括男性也包括女性…”(WHO)

受试者 受试者的选择 女性要安全避孕 (cave: 是否能排除避孕药物对试验用药品的干扰？)

受试者 受试者的选择 志愿者的说明; 吸烟者, 素食者,表型 …. 志愿者健康状况的检查 (例如：心电图, 临床血液化学，血压…) 志愿者的数量取决于变异性; 至少 12名 (EU: 健康, 18-55岁; FDA:男性或女性, > 18岁) 随机性 受试者: 为检测药品的差异性必须使个体差异最小！

受试者 受试者的数目 通过有效的研究文献和初步的研究结果得出的个体差异，决定了受试者需要的数目 “低” 差异性: ~ 12 – 20 名志愿者 “高” 差异性: ~ 24 – 26 名志愿者

受试者 受试者的数目 受试者的数目取决于试验配方和参照配方预期的平均差； 受试者数量的计算见文献 受试者可能退出试验的考虑因素 (Eur J Drug Metab Pharmacokinet 30 (2005) 41; J Biopharm Stat 13 (2003) 529; Stat Med 18 (1999) 93 …) 受试者可能退出试验的考虑因素

受试者 受试者的数目 受试者的数目取决于期望的效果和能力水平 受试者数量的计算见文献 (Eur J Drug Metab Pharmacokinet 30 (2005) 41; J Biopharm Stat 13 (2003) 529; Stat Med 18 (1999) 93 …)

受试者 受试者的数目 “参与到研究中受试者的人数，必须依据已经通过的标准来评估，依据对应的方法来计算(…)。新受试者人数也必须通过研究草案中的受试者人数计算方法证明有效。受试者最少12人。 WHO – working document on multisource (generic) pharmaceutical products (QAS/04.093)

受试者 受试者退出 受试者必须遵守试验的要求 …但是 … 受试者在任何阶段退出受试! 在协议中对受试退出详细说明 (包括原因, 补偿政策, 数据管理, 后期的随访…) 伴随治疗的药物 报告

受试者 “提前确定!!” 受试者的退出 受试者必须遵守试验的要求 但是 … 依据药物成分的药动学确定出呕吐的时间限，例如：如果志愿者在服药后4小时内呕吐就必须退出。 “提前确定!!”

受试者 交叉设计中的随机化 “拉丁方” / 平衡的 /随机的 同体对比! 平行组设计 重复设计 志愿者 第一阶段 第二阶段 1 A B 2 …

受试者 其他 例如., 平行组设计 重复设计

标准化操作 药物摄取的过程 服药的时间 (断食期或进食阶段) 口服液体的体积 服药的可追溯性 cave: 例如：颗粒机、干混悬剂等剂型! (见 ‘方法页’)

标准化操作 禁食状态，例如. 给药前至少10小时要限制受试者饮食 最近一次进食 ~服药前10小时 不能服用食物和水 ~服药前2小时 给药期间 ~服用例如150-200 ml水 少量的标准化食物 ~服药4 h 后

标准化操作 服用标准化的食物和以液体 (时间，组成，摄取量) 严禁饮酒 严禁花黄素的摄入 (咖啡*, 茶, 可乐, 巧克力, 口香糖, 柚子….) 标准化的摄入方式 限制体力活动 … *cave: 停止服用可能会引起头痛。

标准化操作 饮食情况 规定服药和用餐时间(服用标准餐前30分钟服药，餐前服用，餐后服用) 高脂肪饮食会严重影响研究结果

研究用样品 取样 样品数量 取样次数(药峰浓度!) 取样时间(推断AUC max. 20 %) 洗脱期（不少于5个半衰期） 必须对此药物成分的基础药代特征有一定了解 目标，阐述药物的吸收 。 (see e.g. sect. 3.1 of the EU guidance 1401/98)

研究用样品 采样次数 采样3-4次，描述药品的吸收 药锋浓度附近取样3次 采样3-4次，描述药物的排泄 最小值！

研究用样品 采样次数 采样数足以覆盖至少全部药时曲线(AUC)面积的80%. 通常12-18个样本(至少)

研究用样品

研究用样品

研究用样品 维拉帕米; 生物等效性研究; Govi-Verlag 1989

特殊情况 在截尾筛选方案里，最大血药浓度受到取样点的影响。 基于异烟肼和吡嗪酰胺的高溶解性、高渗透性的分子，他们能够很快被吸收。 最高血药浓度需要仔细的计算。 药时曲线下面积是不受取样点影响的重要参数。 [Panchagnula et al., Pharmacol Res 48 (2003) 383]

特殊情况 Panchagnula et al., Pharmacol Res 48 (2003) 383

特殊情况 Panchagnula et al., Pharmacol Res 48 (2003) 383

特殊情况 使用斯皮尔曼相关分析方法分析Cmax, AUCt and AUCinf这些药物动力学参数…结果显示11个采样点，分别在 0, 0.25, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6, and 8 h, 足够证明异烟肼，利福平，等药物的相对生物利用度和生物等效性，但是列表中的6个点，用来检测抗结核药固定剂量复合剂的生物利用度和生物等效性是不够可靠的。 [Gabriels et al., Int J Tuberc Lung Dis 11 (2007) 181]

研究用样品 洗脱期 时间必须足够长以避免残药物残留 与定量限紧密关系 可能要考虑到代谢产物

取样 抽血器材（参照生化分析方法） 血浆，血清的制备 体积 冷却 抗凝血剂 离心 分离 标示 冷冻 转运

生物分析方法 方案中应详细说明 生化分析方法/检测 检测限（预期药峰浓度的1/10应该是可测的） 验证概念 代谢产物是否需要考虑

计算 方案中应详细说明 生化分析结果转化为生化统计学计算 丢失数据的处理 数据的处理

计算 方案中应详细说明 计算程序/方法 具体参数(e.g. AUC, Cmax…) 对药物成分的差别的考虑 可接受区间-能否扩大接受区间？

计算 单次给药 药物特征 AUC – 生物利用度范围（通过梯形法则计算） AUCt – 单次给药的研究 (t=最后可以剂量的浓度) AUCinf – AUCt 推算至无穷大 (完全暴露)

计算 单次给药 生物利用度率 Cmax – 可观察最大浓度 (暴露达峰) Tmax – 最大浓度发生时间

计算 多次给药 直接转换 和 洗脱 主要特征 (e.g. AUCtau, Cmax, Cmin…) 比较浓度波动(e.g. 峰谷比Ptf…) 比较最低有效血药浓度以确定稳态

不利事件 精确度和信息的处理 认真的评估态度 评估和研究用药物的关系。 治疗 (cave:应对伴行用药进行测试、推理，对可能的交叉影响进行分析。) 虽然严重但和研究用药物相关

谢谢！