凝血时间的测定 目的要求 学习凝血时间的测定方法。
基本原理 血液流出血管后,受到刺激的血小板就会释放出一系列凝血因子,使血中的纤维蛋白原转换成网状的纤维蛋白,血液发生凝固。 凝血时间是指从血液流出体外时起至凝固时止所需的时间。测定凝血时间可反映血液本身的凝血因子是否缺乏或减少。
实验动物与器材 兔;蟹; 注射器、玻片、针、秒表。
方法与步骤 取血 凝血时间的观察:将血小心滴注在事先准备好的玻片上,记下时间,每隔30s用针尖挑血一次,直至挑起细纤维血丝为止。从开始出血到挑出细纤维血丝的时间即为凝血时间。
注意事项 针尖或牙签挑血应向一个方向直挑,不可多个方向挑动或挑动次数过多,以免造成破坏纤维蛋白网状结构,造成不凝血的假象。 比较兔和蟹的凝血时间。
红细胞渗透脆性的测定 目的要求 1. 学习测定红细胞渗透脆性的方法。 2. 观察红细胞的溶血现象。
基本原理 正常的红细胞悬浮于等渗的血浆中。若置于高渗溶液内,红细胞会因失水而皱缩;反之,若置于低渗溶液内,则水进入红细胞,使之膨胀;若环境渗透压继续下降,红细胞会因继续膨胀而破裂,释放出血红蛋白,称之为溶血。
基本原理 红细胞膜对低渗溶液具有一定的抵抗力,这一特征称为红细胞的渗透脆性。将血液滴入不同的低渗溶液中,可检查红细胞膜对低渗溶液抵抗力的大小。 开始出现溶血现象的低渗溶液浓度,为该血液红细胞的最小抵抗力;开始出现完全溶血时的低渗溶液浓度,则为该血液红细胞的最大抵抗力。
动物与器材 兔;3.8%柠檬酸钠、171mmol/L氯化钠溶液、蒸馏水;注射器(2ml或5ml)、针头(6号或6.5号)、5ml试管12支、5ml移液管3支、滴管、试管架、吸耳球。
方法与步骤 1. 配制不同浓度的低渗NaCl溶液:取试管12支,分别标记后,排列在试管架上,按表3-1配制各种浓度的NaCl溶液。 2.取血,每管1滴,轻轻摇匀后于室温下静置1~2hr后观察各试管之溶血情况。
3.结果判断:从高浓度管开始观察—— 未发生溶血者:液体下层有大量红细胞下沉,上层为无色透明,表明无红细胞破裂; 部分红细胞溶血者:液体下层有红细胞下沉,上层出现透明淡红(淡红棕)色,表明部分红细胞已经破裂,称为不完全溶血; 红细胞完全溶血者:液体完全变成透明红色,肉眼观察管底已无红细胞,表明红细胞完全破裂,称为完全溶血。 开始完全溶血试管之溶液浓度代表红细胞的最高抵抗力,即最小脆性;开始不完全溶血管之溶液浓度代表红细胞的最低抵抗力,即最大脆性)。 4. 记录开始溶血和完全溶血的两管NaCl浓度。