北京协和医学院 实验三 血小板计数、血沉测定、出凝血检查 要求： 掌握血小板计数的原理、操作与临床意义 了解血小板假性减少问题及对策 熟悉血小板形态（示教） 掌握血沉测定的方法与临床意义 出凝血检查（苏薇老师）

血小板计数 BLOOD PLATELET COUNT 【原理】 普通光学显微镜，直接计数法 血液经稀释后，红细胞和白细胞大部分被溶解， 混匀后充入计数池内，在显微镜下计数。经过公 式计算，得出每升血液中血小板数量。 【试剂和主要器材】 血小板稀释液（许汝和液或草酸胺稀释液） 计数板/盖片，吸管等

血小板计数 BLOOD PLATELET COUNT 【操作】 用1ml吸管吸取血小板稀释液0.38ml，加于小试管内。 用20ul毛细吸管准确吸取20ul EDTA-2k抗凝血液，拭去管 尖外附着血液，轻轻吹入稀释液内，立即充分混匀。待完 全溶血后（约10min）再混匀1min。 用滴管取少量混匀血小板悬液，注入计数池内，室温静置 10~15min。 用高倍镜计数中间大方格内的四周和中间共5个中方格内血 小板。

血小板计数 BLOOD PLATELET COUNT 【计算】 计算公式：PLT×109/L= 5个中方格内PLT总数 ×5×10×20× 106 *：×5表示0.1mm3内PLT平均数； ×10表示1mm3内 PLT数； ×20表示稀释倍数； ×106表示换算成国际 单位制。 【参考值】 （100~300）×109/L

血小板（PLT） （10x)

血小板（PLT） （40x)

血涂片中的血小板

血小板 （大、小/瑞氏染色/100x)

血小板 （成堆聚集/瑞氏染色/100x)

血小板卫星现象

血小板聚集现象

EDTA抗凝剂导致的血小板假性减少现象

EDTA导致血小板假性减少问题(EDTA-PTCP) 导致计数错误 多发生在使用静脉抗凝血测定血常规检测中 导致临床误判 实验室必须建立复检规则，识别这种问题 与临床沟通并有效解决该问题

血小板计数 BLOOD PLATELET COUNT 【临床意义】 生理变化： 剧烈运动或体力劳动后升高 妇女月经早期血小板降低，经期后升高，分娩后1~2天降低。 新生儿血小板较少，6个月后才达到成人水平。

血小板计数 BLOOD PLATELET COUNT 病理变化： PLT减低：是引起出血常见原因 (20~50) ×109/L可有轻度出血或手术后出血；  20×109/L可有较严重的出血；  5×109/L常严重出血。 PLT生成障碍：如急性白血病、再生障碍性白血病、 急性放射病等。 PLT破坏过多：如药物中毒、ITP、SLE、脾功能亢 进等。 PLT消耗过多：如DIC等。

血小板计数 BLOOD PLATELET COUNT 病理变化： 血小板数增多（>400 ×109/L ） 骨髓增生性疾病：MDS、CML、真性红细胞增多症等。 原发性血小板增多症 急性反应：急性感染、急性失血、急性溶血等。 其他：近期外科手术，尤其是脾切除后等。 * 在不明原因的血小板增高标本中，约有50%来自恶性 疾病患者

红细胞沉降率(血沉) ERYTHROCYTE SEDIMENTATION RATE，ESR 【概念】 指离体抗凝血静置后，红细胞在单位时间内沉降的速度。 【过程】一般分为3期： 缗钱状红细胞形成期（数分种~10min） 快速沉降期（约40min） 细胞堆积期（又称缓慢沉降期或挤紧期） 【测定方法】 魏氏法（Westergren法）——推荐方法 血沉仪法（得到血沉值和红细胞沉降高度H与对应时间t相 关曲线）

自动化仪器测定法

血沉测定 WESTERGREN法，魏氏法 【原理】血液经抗凝后，置于魏氏法血沉管内，垂直立 于室温条件下，1h后红细胞下降的毫米数，以第一小时 沉降毫米数报告。 【试剂与器材】 3.18%枸橼酸钠（109mmol/L）抗凝剂 抗凝剂：血液=1：4（0.4ml: 1.6ml） (黑色头盖的试管) 魏氏血沉管，血沉架，洗耳球。

用血沉管将抗凝血吸取至0刻度处，拭去管外 血液，将管直立在血沉架上。 室温中静置1h，读取红细胞下降处的mm数。 男： 0～15mm/h 【操作】 静脉采血，抗凝混匀。 用血沉管将抗凝血吸取至0刻度处，拭去管外 血液，将管直立在血沉架上。 室温中静置1h，读取红细胞下降处的mm数。 【参考值】 男： 0～15mm/h 女： 0～20mm/h

ESR测定影响因素 血沉管和血沉架：血沉管倾斜会加速红细胞沉降 速度，经研究发现血沉管倾斜3°，沉降率可增加 30％。因此血沉管必须垂直竖立。 标本：脂血可造成ESR减慢，因此需空腹采血。 正确的抗凝剂和采血比例。标本中不要出现血块。 温度：会影响ESR，血沉应在18～25℃条件下测 定，室温过高ESR加快，室温过低ESR减慢。 器材:注射器、试管、血沉管需洁净，避免溶血。 测定时间：标本在室温条件下放置时间不可超过 2h，在4℃冰箱中放置不要超过6h。

红细胞沉降率(血沉) ERYTHROCYTE SEDIMENTATION RATE，ESR 【临床意义】较为常用而缺乏特异性的实验 生理性血沉加快： 女性高于男性 经期、妊娠3个月至产后1个月血沉加快。 12岁以下儿童和60岁以上老年人

红细胞沉降率(血沉) ERYTHROCYTE SEDIMENTATION RATE，ESR 病理性血沉加快：见于一些器质性病变和病变的活 动期。 各种急、慢性炎症。如严重感染；风湿、类风湿、 结核病等疾病，当复发或活动时血沉加快，而静 止期血沉正常。故观察血沉动态变化，有助于监 视病情发展和预后评价。 恶性肿瘤。临床常以血沉作为鉴别良、恶性肿瘤 的一项筛选试验。 组织损伤及坏死。如严重创伤和大手术后。急性 心肌梗死后3~4天血沉加快，并持续1~3周。 其他：如高球蛋白血症、贫血、高胆固醇血症。

实验报告 撰写一篇1000字左右的，有关EDTA抗凝剂导致血 小板假性减少的小型综述稿件。 包括发生机制，流行病学，解决方案等。 阅读国内外相关文献，至少5篇。 列出参考文献。