医学微生物学实验

Nomenclature: genus+species 种名 属名 S. aureas 金黄色 葡萄球菌 N. meningitidis 脑膜炎 奈瑟菌 E. coli 大肠 埃希菌

病原性球菌 Pathogenic cocci 葡萄球菌属 Staphylococcus 金黄色葡萄球菌 S. aureas 链球菌属 Streptococcus 链球菌 肺炎链球菌 S. pneumoniae 奈瑟菌属 Neisseria 脑膜炎球菌 N. meningitidis 淋病双球菌 N. gonorrhoeae

病原性球菌 生物学性状 致病性 免疫性 微生物学检查 防治 金葡 乙链 肺链 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 形态染色 培养 生化反应 抗原结构 抵抗力 致病物质 所致疾病 金葡 G+ 低 色素 溶血 4指标 SPA 强 耐药株 Coagulase staphylolysin PV Enterotoxin Exfoliatin TSST-1 <超抗原> 侵袭型疾病 食物中毒 假膜性肠炎 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征 不强 直接涂片 分离培养 药敏 防止医源性感染等 乙链 荚膜 较高 菊糖- 胆汁溶菌- 弱 细胞壁成分 外毒素 （红疹毒素 链球菌溶血素） 侵袭性酶 化脓性感染 猩红热 风湿热、 急性肾小球肾炎 同型特异性免疫力 血清学（ASO） 青霉素G 肺链 矛头状成双 草绿色溶血 自溶酶 胆汁溶菌＋ 大叶性肺炎 牢固 荚膜多糖疫苗 脑膜炎奈瑟菌 G- 肾形成双 高 巧克力培养基 内毒素 流脑 体液免疫为主 疫苗 淋病奈瑟菌 咖啡豆成双 淋病 可自愈，免疫不持久 性传播疾病

第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教） 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教） 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

1 病原性球菌的形态染色与培养 示教片： 菌落观察： 葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌 （形状、大小、排列、染色 ） 1 病原性球菌的形态染色与培养 示教片： 葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌 （形状、大小、排列、染色 ） 菌落观察： 金葡、白葡、乙型溶血性链球菌 （形态、大小、表面、边缘、透明度、色素、溶血性）

Streptococcus pyogenes on blood agar, illustration b-hemolysis. Streptococcus pneumoniae on blood agar, illustration a-hemolysis. Staphylococcus aureus on blood agar, illustration b-hemolysis. Staphylococcus epidermidis on blood agar With on hemolysis

第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教） 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

2 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 鉴定致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌得4大指标 色素 溶血素 甘露醇发酵 血浆凝固酶 耐热核酸酶 2 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 鉴定致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌得4大指标 色素 溶血素 甘露醇发酵 血浆凝固酶 耐热核酸酶 致病性葡萄球菌 金葡 金黄色 ＋ 非致病性葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 白色或柠檬色 －

2 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶试管法（示教） 检测哪种凝固酶？ 2 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 0.5%琼脂粉＋牛肉汤＋甘露醇＋指示剂（溴甲酚紫） 血浆凝固酶试管法（示教） 检测哪种凝固酶？

血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 结果观察： 标记后，稀释兔血浆各1滴 无菌操作，取菌苔少许，混匀，观察有无凝集 出现颗粒状凝集：＋ 不凝集：－ S.a S.e

血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 结果观察： 标记后，生理盐水各1滴 无菌操作，取菌苔少许，与N.S. 混匀，观察有无自凝 各加兔血浆1滴，混匀 结果观察： 出现颗粒状凝集：＋ 不凝集：－ S.a S.e

第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教） 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

3 抗“O”试验 原理 方法 结果观察 完全不溶血的血清最高稀释度即为抗“O”抗体的效价。 正常参考值为 400单位以下。 试管号 1 2 3 4 5 生理盐水(ml) - 0.5 0.75 1：200血清(ml) 稀释倍数 1:200 1:400 1:800 还原溶血素“O”(ml) 0.25 摇匀，37C 水浴 45min 1％红细胞悬液(ml) 0.5弃去 结果观察 完全不溶血的血清最高稀释度即为抗“O”抗体的效价。 正常参考值为 400单位以下。

第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教） 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

平板分区划线法 1区(1/10) 烧接种环 2区(1/5) 4区 烧接种环 3区 烧接种环

第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教） 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）