强心苷对离体蛙心的作用 成都医学院实验技术中心 精品课程 强心苷对离体蛙心的作用 成都医学院实验技术中心
【实验目的】 观察强心苷对心脏的直接作用及与钙的关系，学习离体蛙心灌流技术。
【实验原理】 1（1）当心肌兴奋时膜去极化，Na+内流，使肌浆网池贮存的Ca2+释放， 从而增加心肌细胞内Ca2+浓度，Ca2+与向宁蛋白结合，导致向肌球蛋白构型改变，，使肌球蛋白通过横桥同肌动蛋白结合，激活ATP酶分解ATP释放能量，使肌球蛋白头部作弯曲运动，牵引肌动蛋白向肌节中间滑行，而产生心肌收缩，
肌质网钙的释放
（2）强心苷通过直接与心肌细胞膜上强心苷受体(Na+-K+-ATP酶)结合，该酶活性降低，使细胞内Na+增多，通过Na+/Ca2+交换排出的Ca2+减少，从而增加心肌细胞内Ca2+浓度，使心肌收缩力增强。钙与强心苷均可兴奋心脏，合用易引起心律失常。
2 心脏的工作机制
3 正 常 心脏的跳动
【实验材料】 实验器材：蛙板1块，蛙钉4枚，蛙心夹1个，探针1根，斯氏蛙心插管1个，普通剪刀1把，眼科剪1把，眼科镊1个，二道生理记录仪（或BL生物信息采集系统），张力传感器1个(1g)，铁支架1个，双凹夹2个，木试管夹1个，烧杯(50ml×1)，长咀吸管2根，注射器(1ml×1）。
实验动物： 药品与试剂： 青蛙1只（蟾蜍心脏不敏感）。 任氏液，无钙任氏液，1%氯化钙溶液，0.025%毒毛旋花子甙K(或0.02%西地兰)溶液。
【方法与步骤】 1.制作离体蛙心标本：取蛙1只，用探针破坏其大脑与脊髓，仰位固定于蛙板上。剪开胸腔暴露心脏，小心剪去心包膜，仔细分离左右主动脉。在左主动脉下穿一线备用，在右主动脉下穿线，并结扎右主动脉。在左主动脉上剪一小斜口，让血液尽量流出，用任氏液将流出血液冲洗干净，然后将装有任氏液的蛙心插管经左主动脉小斜口插进心室(应在心脏收缩，主动脉瓣开放时，顺势插入)，当见插管内液面波动明显时，结扎固定蛙心插管。小心提起心脏，在心脏下绕一线，结扎左右肺静脉及前后腔静脉。并于远心端剪断。取下离体蛙心标本，用任氏液反复冲洗至无色，并保留约1ml的液量。
2.安装记录设备：用系有长线的蛙心夹夹住心尖，长线另一端连接传感器，接通二道生理记录仪(或BL生物信息采集系统)，适当调节张力。 3.描记正常的心脏搏动曲线。然后按下列顺序加药，并注意观察心率、振幅和节律的变化。
（1）换入低钙任氏液（制作心功能不全模型）。观察心脏收缩幅度、心率、房一室收缩的协调性变化。 （2）待心肌收缩明显减弱时，向插管内滴加0.025%毒毛旋花子甙K溶液0.1～0.2ml（观察强心作用）。 （3）作用明显时，再向插管加入1%氯化钙0.1ml（Ca2+ 与强心苷有协同作用）。 （4）待作用明显并稳定后，每隔30s向插管内加毒毛旋花 子甙K溶液0.1～0.2ml（或加氯化钙），直到心脏停搏 （观察强心苷过量中毒）。 4. 取下图纸，标注药物剂量，计算心搏曲线各段的振幅 频率和节律。
【实验结果】 观察指标 任氏液 低钙液 强心苷 氯化钙 大量强心苷 心搏振幅(cm) 心率(次/min) 心律
【注意事项】 1.结扎血管要牢固，切勿损伤静脉窦。换药前后心脏插管中液面应保持一致。 2.蛙心对药物的反应变异较大，实验时药物剂量可酌情调整。 3.强心苷过量中毒可出现房室传导阻滞、心脏停搏及早搏等。 4.青蛙对洋地黄较敏感，与人相似。蟾蜍心脏不敏感，故此实验不宜选用蟾蜍
【讨论与思考】 1.强心苷有哪些药理作用？ 2.强心苷和钙剂均可增强心肌收缩力，为何治疗心衰时两类药不联合使用？ 3.临床使用强心苷时要注意哪些问题？
谢谢