实验十三 粗脂肪的定量测定─索氏提取法
一、目的要求 1.学习和掌握粗脂肪的定量测定法─索氏提取法
二、原理 脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸结合成的脂类化合物, 能溶于脂溶性有机溶剂。 本实验用重量法,利用脂肪能溶于脂溶性溶剂这一特性,用脂溶性溶剂将脂肪提取出来,借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行。通常使用的脂溶性溶剂为乙醚或沸点为30ºC -60 ºC的石油醚。用此法提取的脂溶性物质除脂肪外,还含有游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等,故称为“粗脂肪”。
三、材料、试剂与器材 材料:全脂奶粉 试剂:乙醚 器材:粗脂肪测定仪、干燥箱
四、操作方法 1.操作前准备:抽提筒用蒸馏水洗净,置干燥箱在105 oC温度下烘1小时,取出移入干燥缸内,冷却后称重编号备用。 2.样品准备:样品磨碎,称取2—5g在105℃温度下烘30分钟,趁热倒入研钵中,加入约2g脱脂细砂一同研磨。将试样和细砂研到出油状后,全部置入滤纸筒内(筒底塞一层脱脂棉,并在105 oC温度下烘30分钟),用脱脂棉蘸少量乙醚揩净研体上的试样和脂肪,并入滤纸筒内,最后再用脱脂棉塞入上部,压住试样。 3. 移动滑动球,把滤纸筒置入抽提简内,使磁钢把过滤筒吸住,并观察滤纸筒是否在抽提筒上口对准下压紧圈的园柱孔,两者平面保持良好接触。
4.在抽提筒内注入无水乙醚约50ml,然后将抽提筒移置加热板上,调节位置使抽提筒上口对准下压紧圈的圆柱孔,两者平面保持良好接触。 5.开启电源,根据所需加热温度调节电加热旋钮到60oC,显示屏上直接显示加热温度值。 6.移动滑动球(上滑)使试样置入抽提筒内(此时)滤纸筒底与抽提筒底接触,做到不使滤纸筒脱落,使试样完全浸入溶剂内浸泡)。 7.从溶剂挥发开始浸泡适当时间 ,然后将纸筒升高5cm进行抽提,约1 h 后再将滤纸筒提升1cm(最高位置),同时将冷凝管调旋塞完全关闭(即旋塞于柄位置与水平面平行),进行溶剂回收。 8.将抽提筒从加热板上取出,置入恒温箱内,烘去水份,然后移入干燥缸内冷却后称重,计算含油量。 9.使用完毕关闭电源,并保持机内干净。
根据下表将实验结果分别填入并计算样品的粗脂肪百分含量:样品 五、结果处理 根据下表将实验结果分别填入并计算样品的粗脂肪百分含量:样品 样品重量 抽提桶重 抽提桶及脂肪重 脂肪重 粗脂肪含量 (g) (g) (g) (g) (%)
六、注意事项 1.乙醚为易燃有机溶剂,实验室应保持通风并禁止任何明火。 六、思考题 (1) 本实验制备得到的是粗脂肪, 若要制备单一组分的脂类成分, 可用什么方法进一步处理? (2) 本实验样品制备时烘干为什么要避免过热?