实 验 二 放线菌和真菌形态 的观察
放线菌和真菌形态的观察 目的要求 实验材料 实验程序 思考题
目的要求 学习观察放线菌和真菌形态的基本方法 加深理解放线菌和真菌的形态特征
实验材料 放线菌和真菌培养物 1. 放线菌培养物：青色链霉菌（Streptomyces glaucus）或“5406”产生菌（St. microflacus）四天培养物。 2. 啤酒酵母（Saccharomyces cervisiae）24至28h液体培养物或斜面培养物。 3. 黄曲霉（Aspergillus flavus）4d平面培养物。 4. 各种真菌示范片。 显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊子等。 乳酚油、碘液、酒精、蒸馏水等。
实验程序Ⅰ 观察放线菌链霉菌的形态 观察酵母菌的形态 观察霉菌的形态
实验程序Ⅱ（观察放线菌链霉菌的形态） 个体形态直接观察法： 观察菌丝和孢子丝自然生长的性状，其中包括气生菌丝（较粗），基内菌丝（较细）和孢子丝的形状，如分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘图说明。 印片染色法： 印片 微热固定 石炭酸复红染色1min 水洗 晾干 镜检
实验程序Ⅲ（观察放线菌链霉菌的形态） 插片染色法： 280C插片培养4—6d，轻轻取出盖玻片，进行固定、染色、水洗、晾干、镜检。观察方法同“直接观察法”，观察基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的卷曲状况，及分生孢子的形状。
放线菌的形态 特征：丝状分枝、 多核、 单细胞（细胞核之间没有分隔） “种籽” “枝” “花” “根”
实验程序Ⅳ（观察酵母菌的形态） 观察酵母菌形态和无性繁殖： 用高倍镜观察啤酒酵母的形态和出芽繁殖。 酵母肝糖染色法： 在洁净的载玻片上滴一小滴路哥氏碘液（Lugol），取一环酵母菌液与碘液混匀，盖上盖玻片，镜检，菌体呈淡黄色，肝糖粒呈红褐色。在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、肝糖粒，并绘图。 酵母脂肪粒染色法： 在洁净的载玻片上加一滴，取一环啤酒酵母与福尔马林混匀，静止5min，加1滴美兰染色液，10min后再加一滴苏丹Ⅲ染色液，盖上盖玻片，镜检。原生质呈兰色，脂肪粒呈粉红色，而液泡无色。
实验程序Ⅴ（观察霉菌的形态） 观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子）： 在洁净载玻片中央加一滴酒精，用接剖针挑取黄曲霉培养物少许放入其中，再加入酒精和蒸馏水各一滴（重复一次），使分生孢子分散，便于观察。倾去酒精和蒸馏水，加一滴乳酚油（防止细胞变形和气泡产生，又可防止干燥以保持较长时间），盖上盖玻片，镜检、观察。 用同样方法制取青霉（Penicillium sp.）封片，示范片，观察菌丝有无分隔和分生孢子梗、小梗、及分生孢子排列方式，并绘图。 用同样方法制取镰刀霉（Fusarium sp.）封片，示范片，观察孢子丝和着生部位的构造，并绘图。
实验程序Ⅵ（观察霉菌的形态） 取黑曲霉（Rhizopus niger）5d平板培养物，用其皿盖，在低倍镜下观察菌丝体形态（假根、匍匐菌丝、孢囊梗及孢囊等）并绘图。 更好的是采用载片培养法，可制成永久的封片，更便于保存。 做蘑菇切片。观察担子菌担子着生情况及其孢子的形态等，示范片，并绘图。 观察梨头霉（Absidia sp.）或根霉的接合孢子，示范片，并绘图。
1.毛霉属
2．根霉属（假根处分枝）
镰刀—孢子囊形状呈镰刀形、长柱形、球形，有多细胞与单细胞之分。 新 月 藻 3．镰刀霉属 镰刀—孢子囊形状呈镰刀形、长柱形、球形，有多细胞与单细胞之分。
4．交链孢霉属 霉腐、致癌、过敏性鼻炎 交链—孢子囊链式相连 单个孢子呈纺锤形，有横和竖的隔膜将孢子分隔呈砖壁状。
思考题 在用放线菌菌苔直接观察气生菌丝和孢子丝的形态时，要注意些什么？ 在制取酵母菌的水浸片时，要注意哪些要点？ 制取酵母水浸片时为什么不用水，而用乳酚油？