空心金纳米颗粒的合成、修饰与表征 沈珏 2013-5-13
前期工作 纳米金是一种目前非常热门的材料,在生化领域也有很大的用途,可以用于癌症检测、免疫测定、生物芯片、生物传感器等。 学习了细胞培养的简单方法,实验了空心纳米金材料的合成手段。考虑利用谷胱甘肽(GSH)作为媒介,将叶酸(FA)共价连接到空心纳米金球上。对空心纳米金和修饰后的空心纳米金进行表征(UV-Vis,FTIR,Zeta potential)
实验部分 1.空心纳米金(HGNs)的合成 真空体系,配置缓冲液 加入CoCl2 加入NaBH4 反应,见到溶液变棕色 加入HAuCl4 反应,见到溶液变成深蓝色 离心清洗,在缓冲液中保存 在反应的过程中,可以看到溶液颜色变化。当用硼氢化钠还原氯化钴以后,溶液变成棕色,加入氯金酸氧化氯化钴,颜色又逐渐变为深蓝色。 用紫外表征得到的空心纳米金球,在738nm处出峰。
实验部分 2.空心纳米金球用谷胱甘肽(GSH)修饰 配置所需溶液(TCEP,GSH,β-ME) 用NaOH调节HGNs的pH到9.0 GSH和β-ME用TCEP活化巯基1h 将GSH和β-ME以10:1的比例加入HGNs 在搅拌下,室温反应过夜(12h) 离心分离得到HGNs-GSH 在反应过程中,要防止颗粒聚集沉积,在加入GSH和β-ME的时候应该缓慢加入,注意搅拌。得到连接有谷胱甘肽的空心纳米金(HGNs-GSH)
实验部分 紫外结果 图1. 空心纳米金球修饰前后的紫外图谱
EDC和NHS活化HGNs-GSH上的羧基1h 实验部分 3.在空心纳米金球表面修饰叶酸 配置所需溶液(EDC,NHS,GSH,FA) EDC和NHS活化HGNs-GSH上的羧基1h 加入叶酸 室温,摇床下反应(4h) 离心分离
实验部分 UV-Vis 图1. 空心金纳米颗粒以及修饰后的的UV-Vis图
实验部分 Zeta potential Grain size Sample HGNs HGNs-GSH HGNs-GSH-FA Zeta potent(mV) ﹣20.1±1.577 ﹣35.9±2.817 ﹣20.5±1.611 Grain size Sample HGNs HGNs-GSH HGNs-GSH-FA Size(nm) 105.6±0.208 72.77±0.123 98.47±0.210
实验部分 FTIR 图2. 空心金纳米颗粒以及修饰后的的FTIR图
工作计划 1.对空心纳米金球以及修饰后的空心纳米金球进行进一步表征(TEM,UV-Vis等) 2.与细胞共培养,观察培养情况(TEM) 3.优化反应条件,寻找最合适的反应比例,提高反应效率 4.查阅文献,探索空心纳米金球(HGNs)其他用途