有机磷的测定 Ca-EDTA 法 胡必忠 02081093
磷测定的重要性：由于许多有机物都含有磷，特别是很多对环境造成污染的物质都是含磷物质，因此精确的测定磷的含量有深远意义。 如有机试样采用硫酸和过氧化氢消煮，使磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵。 此化合物经对苯二酚、亚硫酸钠还原成兰色化合物--钼蓝。用分光光度计在波长660nm处测定钼蓝的吸光值，以测定磷的含量。 H3PO4+12（NH4）3MoO4+21HNO3→（NH4）3PO4·12MoO3+21NH4NO3+12H2O 。 亚硫酸钠溶液最好每次实验前临时配制，否则可能会使钼蓝溶液发生浑浊。 比如DNA中的基本组成脱氧核糖核酸中就只含有一分子磷酸，先让DNA聚合，后分离，DNA经过酶的水解后产生脱氧核糖核酸，通过测定磷就可以测定脱氧核糖核酸的量，也可以测定DNA中磷的含量。 但是现在的教材有关磷的测定很少，故大家应该知道一下磷的测定方法。
磷的测定-------------采用返滴定法 主要试剂方法：Ca—EDTA方法 有机含磷物质经强酸和氧化剂反应后，所有的磷都变成PO43-，而其中的C元素先变成CO3-后经酸化后成为CO2气体排除了干扰。 后加碱NaOH中和至弱碱条件下，用NH3—NH4Cl做缓冲溶液，加入定量但过量的Ca2+使PO43-变成Ca3(PO4)3完全沉淀，后过滤，过量的Ca2+用EDTA标准溶液返滴。 主要误差来源过滤中Ca2+的损失，所以为消除误差可以取已沉淀静置的中上层的清液，用EDTA进行滴定。
可行性分析: 设Ca2+的量为0.1mol/L由 kspCa3(PO4)2=2.0*10-29可以求得[PO43-]=1.414*10-23,而对于H3PO4:pkb1=1.64, pkb2=2.3*10-2,因为[PO43-]→0,所以水解很难进行,[PO43-]受酸度的影响很少. 由于 kspCa3(PO4)2=2.0*10-29,在弱碱性下可以使Ca3(po4)2完全沉淀，且在弱碱性条件下滴定过量的Ca2+ 试剂EDTA受酸度的影响可以忽略,且Ca(OH)2是中强酸Ca2+ = 0.1mol/L 时PH=3,lgαCa(OH)=0.3,当缓冲溶液的PH=9.26, Ca2+ 基本不与OH-络合. Ca2+也不与NH3络合.
试剂: (1)EDTA溶液(0.01mol/L) (2)氨性缓冲溶液(PH=10) (3) CaCO3标准缓冲溶液 (4)铬黑T指示剂(1%)
具体方法: EDTA溶液的标定 准确称取0.22—0.26gCaCO3于100ml烧杯中，加数滴水润湿，盖上表面皿，缓慢滴入（1+1）HCl溶液至CaCO3完全溶解，加20ml水，小火煮沸2min，冷却后转移到250ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。 移取上述溶液25.00ml于锥形瓶中，加50ml水及3mlMg—EDTA 溶液，预加15mlEDTA标准溶液，再加10ml氨性缓冲溶液及4滴铬黑T指示剂，立即用EDTA标准溶液滴定至溶液由紫红变为纯蓝色，即为终点。平行滴定三份。计算EDTA标准溶液的浓度a。
制取Ca2+标准溶液:称取1gCaCO3,后加入足量的盐酸,加热使之完全融解,靜置待用. 有机试样Mg经HNO3-HCl溶解后,加热赶跑气泡,后加NaOH中和至PH=10,加入适量的NH4-NH4CL缓冲溶液于100ml容量瓶,加入Ca2+标准溶液沉淀,后加水至100ml. 移取25.00ml试液于锥形瓶,加15ml水,15ml氨性缓冲溶液及4滴铬黑指示剂,用EDTA滴定至溶液由紫红色刚变为纯蓝色.平行滴定三份.平均消耗为VL.
结果: P的量: (1/100)*0.1-(4V*a)=x 百分数:(x/M)*100%