家兔动脉血压的神经与体液调节 Nervous and humoral regulation of arterial blood pressure in rabbit 陆源 浙大医学院 (luyuan@zju.edu.cn)

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家兔动脉血压的神经与体液调节 Nervous and humoral regulation of arterial blood pressure in rabbit 陆源 浙大医学院 (luyuan@zju.edu.cn)

特别提示 禁止随意转动实验台上的三通阀 组员分工 器械使用 实验善后工作 值日安排 报告提交、原始数据

分工 麻醉家兔 手术过程 实验过程 1人注射 1人协助 1人观察腹部起伏及口唇颜色 1人主刀 1人始终监视家兔的呼吸、状态,兔挣扎时立即按住 1人做处理操作 1人始终监视家兔状态,手轻按在兔的胸部。同时协助处理 1人管记录、监视呼吸、血压变化,呼吸波幅增强时喊停    

讨论 本实验采用何种麻醉剂? 麻醉药物的剂量? 给药途径? 麻醉的基本原则? 麻醉家兔时,如何观察麻醉的深浅? 麻醉家兔时,遇家兔呼吸急停,如何处理? 注射器针头安装有什么要求? 耳缘静脉首次注射时,穿刺点应选在何处? 固定家兔时,家兔前肢的固定方法?

讨论 本次实验,家兔手术的切开部位?切开长度? 采用何种分离方法? 家兔颈部有哪三对肌肉? 家兔颈部的颈总动脉血管鞘位置? 颈总动脉血管鞘内有哪些神经、血管? 如何分辨颈部三根神经? 分离神经、血管应采用哪种器械? 颈总动脉、神经的分离长度? 结扎颈总动脉应注意什么?

讨论 做颈总动脉插管切口前,动脉夹应夹在何处? 颈总动脉插管切口的位置、方向、大小、形状? 插管插入前,插管头端是否需要抗凝处理? 如何固定插管? 压力换能器-多道生理信号采集系统在实验前如何进行零点校正?

讨论 正常血压曲线可见几种波动? 血压曲线上的几种波动是如何形成的? 未插管一侧的颈总动脉短时夹闭对全身的血压和心率有何影响?为什么? 刺激减压神经的中枢端和外周端对血压和心率的影响有何不同?为什么? 迷走神经为何要切断后,再刺激外周端?结果如何?为什么? 为什么选择刺激右侧迷走神经?用什么实验方法验证你的说法? 注射去甲肾上腺素后,血压、心率会有什么变化?为什么? 乙酰胆碱对血压及心率有什么影响?为什么?

【目的】采用直接测量法记录家兔动脉血压,观察神经和体液因素对动脉血压的调节。 1.材料 家兔(浙江大学动物中心);RM6240微机生物信号采集处理系统(成都仪器厂),血压换能器(成都仪器厂);去甲肾上腺素,乙酰胆碱。 2.方法 2.1 系统连接和仪器参数 压力换能器置于家兔心脏同一水平面并接微机生物信号采集处理系统第1通道:1通道模式为血压,时间常数为直流,滤波频率100Hz,灵敏度12Kpa(90mm),采样频率800Hz,扫描速度 5s/div。连续单刺激方式,刺激强度5V,刺激波宽2ms,刺激频率30Hz(统一)

标记组

换能器高度

耳缘静脉 进针点

2.2 手术准备 2.2.1 家兔称重后,按1g/kg体重的剂量于耳缘静脉注射氨基甲酸乙酯麻醉。动物麻醉后仰卧于手术台上,固定四肢,前肢交叉固定,用棉绳钩住兔门齿,将绳拉紧并缚于兔台铁柱上。 麻醉固定视频:http://10.71.149.149/onpc/vidsim/bo/rabbit/rab1.htm

2.2.3 颈总动脉插管 抗凝处理。再进行下一步骤。 2.2.2 剪去颈部被毛,切开颈部皮肤5-7cm,钝性分离颈部肌肉、暴露颈部气管和血管神经鞘,用玻璃分针仔细分离右侧迷走神经和减压神经,穿细线备用。用玻璃分针分离两侧颈总动脉,各穿一线备用。 2.2.3 颈总动脉插管 抗凝处理。再进行下一步骤。 2.2.4 颈总动脉插管 在左颈总动脉远心端结扎,近心端用动脉夹夹住,并在动脉下面预先穿一细线备用。用眼科剪在靠近结扎处动脉壁剪一“V”字形切口,将动脉套管向心方向插入颈总动脉内,扎紧固定。打开动脉夹。 血管神经鞘 迷走神经 减压神经 颈总动脉 气管

动脉插管视频http://10.71.149.149/onpc/vidsim/bo/rabbit/rab3.htm

2.3实验观察 2.3.1 记录正常血压 启动记录按钮,除去动脉夹,记录正常血压 2.3.2 用动脉夹夹闭右侧颈总动脉10秒,观察血压变化 2.3.3 用两细线在减压神经中部两处结扎。在两结扎间切断神经,用强度5V,频率30Hz,波宽2ms的电脉冲分别刺激神经中枢端和外周端20秒,观察血压变化 2.3.4 将右侧迷走神经穿线结扎,在结扎上端切断该神经,用强度5~10V,频率30Hz,波宽2ms的电脉冲刺激其外周端和中枢端10秒,观察血压变化 2.3.5 静脉注射0.1g/L去甲肾上腺素0.3ml,观察血压变化 2.3.6 按0.1ml/kg体重剂量静脉注射10-2g/L乙酰胆碱,观察血压变化 注意:每项处理完毕必须等需要恢复稳定后再做下一项处理

二级波 一级波

2.4 数据测量 3.结果 列各项处理前后的动脉血压的收缩压,舒张压,平均动脉压,心率数据表格。用文字和数据逐一描述实验结果。 4.讨论 论述各项处理对动脉血压的影响及机制。包括分析影响实验结果的主要干扰因素及改进方法。

标记记录

表1 各因素对家兔动脉血压的作用 观察项目 收缩压(mmHg) 舒张压(mmHg) 心率(bpm) 处理前 处理后 夹闭颈总动脉10s 表1 各因素对家兔动脉血压的作用 观察项目 收缩压(mmHg) 舒张压(mmHg) 心率(bpm) 处理前 处理后 夹闭颈总动脉10s 5V/30Hz刺激减压神经外周端 5V/30Hz刺激减压神经中枢端 5V/30Hz刺激迷走神经外周端 5V/30Hz刺激迷走神经中枢端 i.v 0.1g/L NA 0.3ml i.v 0.01g/L ACh 0.1ml/kg

实验注意事项 采取保温措施,防止麻醉后体温下降 夹闭颈总动脉和刺激神经,应注意保护,均要避免过度牵拉,应尽可能在原位置上轻柔地进行,在实验中应经常滴加生理盐水以防神经干燥 每项实验后,应等血压基本恢复并稳定后再进行下一项,每项观察项目的记录必须有前后对照 导管前端必须抗凝,否则会导致凝血,实验失败。 实验过程中,记录仪按record键记录。不要在preview状态观察。做好标记。

图1 神经、体液因素对家庭动脉血压的影响