药物对离体豚鼠回肠收缩的作用 张 雄 浙江大学医学院生理教研室.

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药物对离体豚鼠回肠收缩的作用 张 雄 浙江大学医学院生理教研室

目 的 学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 观察小肠平滑肌的自律性收缩,理解其原理。 目 的 学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 观察小肠平滑肌的自律性收缩,理解其原理。 观察药物acetylcholine (Ach、乙酰胆碱),histamine (His、组胺),BaCl2分别对离体豚鼠回肠平滑肌的作用,并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏)为工具药,初步分析以上药物的作用原理。

原 理(1) 胃肠平滑肌收缩的自动节律性(慢波理论:Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果)。

原 理(2) 乙酰胆碱:M胆碱能受体激动药。Ach与M受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流↑,肌浆[Ca2+]↑,平滑肌收缩幅度增高。 阿托品:M胆碱能受体阻断药。阿托品与平滑肌细胞膜M受体结合,阻断乙酰胆碱与M受体结合,阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用。

原 理(2) 组胺:激动平滑肌细胞膜H1受体,通过激活G蛋白-磷脂酶C系统,使细胞内Ca2+增高,导致平滑肌收缩。 原 理(2) 组胺:激动平滑肌细胞膜H1受体,通过激活G蛋白-磷脂酶C系统,使细胞内Ca2+增高,导致平滑肌收缩。 扑尔敏:H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合,阻断组胺与H1受体结合,从而阻断组胺对H1受体的激动作用。

原 理(3) 氯化钡:肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆,使肌浆[Ba2+]↑,平滑肌收缩幅度增高,但泵出障碍;另一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体,使平滑肌收缩幅度增高。

材 料 豚鼠1只:WT为300 g左右 麦氏浴槽,生物信号采集系统,张力换能器。 材 料 豚鼠1只:WT为300 g左右 麦氏浴槽,生物信号采集系统,张力换能器。 台氏液, 10-2 g/L乙酰胆碱 、1 g/L硫酸阿托品、 10-2 g/L组胺, 10-3 g/L扑尔敏、10 g/L BaCl2 溶液。

方 法 1. 实验装置准备: 打开恒温水浴37℃---加台氏液于麦氏浴槽中---95% O2+5%CO2持续通气(气泡一个个逸出为宜)。 方 法 1. 实验装置准备: 打开恒温水浴37℃---加台氏液于麦氏浴槽中---95% O2+5%CO2持续通气(气泡一个个逸出为宜)。 2. 标本准备: 击昏豚鼠---开腹---减取回肠---冲洗内腔---截取肠段--- 肠段两端对角穿线--- 固定于麦氏浴槽和换能器上。 3. 实验记录: 打开配置(药物对离体豚鼠回肠的作用)---零点设置---调节换能器张力2 g ---稳定10-30分钟(基线和收缩幅度稳定)

标本准备(1) 找到盲肠,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于盛有冰冷台氏液的培养皿中,冲洗干净,将回肠剪成1-1.5cm的几小段。

标本准备(2) 取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角处分别用缝针穿线,并打结。一端系于浴槽固定钩上,另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器 肠管

观察项目 记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。 加入10-2 g/L Ach 0.2ml,观察并记录曲线,作用明显时换液。 重复以上Ach剂量,待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml,观察曲线,此时不换液,待曲线基本稳定后,再加入相同量的Ach,观察并记录收缩曲线,换液。 加入10-2 g/L组胺 0.3ml,作用明显时迅速换液。 预先加入10-2 g/L扑尔敏0.2 ml,5 min后(不换液)加入同量组胺,观察并记录收缩曲线 ,换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml,当作用达到最高点,加入1 g/L阿托品 0.2 ml,观察并记录收缩曲线。

实验结果 Ach 换液 Ach 阿 Ach 换液 His 换液 扑 His Bacl2 阿 (每次换液后稳定15min) 稳定20min

注意事项 注意保持肠管通畅,勿使其封闭。 不要把药物直接滴加到回肠上。 每次加的台氏液量保持相等。 加的台氏液量必须预先加热到37℃。 药物作用明显后,尽早冲洗。 每次换液后稳定10-20min。

实验结果(1) 曲线描记:标上加药时间点,药物名,洗脱时间点。 对曲线进行测量:基础张力,收缩张力。填入表格。

实验结果(2) 表3. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响 组别 标本数 基础张力(g) 收缩幅度(g) 乙酰胆碱 阿托品+乙酰胆碱 组胺 扑尔敏+组胺 BaCl2 BaCl2+阿托品

实验报告 针对实验数据,进行结果描述 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 2. 讨论和结论 分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2对离体豚鼠回肠平滑肌的作用机理。 3. 参考文献 如:[1]陆源,夏强. 生理科学实验. 浙江大学出版社,2004,245-247

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