三、中间纤维 中间纤维(intermediate filaments,IF)直径10nm左右,介于粗肌丝和细肌丝(或微管与微丝)之间。与微管不同的是中间纤维是最稳定的细胞骨架成分,它主要起支撑作用。中间纤维在细胞中围绕着细胞核分布,成束成网,并扩展到细胞质膜,与质膜相连结。 (一)成分 IF是一类形态上非常相似,而化学组成上有明显差异的蛋白质,成分比微丝和微管都复杂,可根据组织来源的免疫原性分为5类:角蛋白纤维(keratin filament,上皮细胞)、结蛋白纤维(desmin filament,肌细胞)、神经胶质纤维(neuroglial filament,神经胶质细胞)、波形纤维(vimentin filament,间质细胞)、神经元纤丝(neurofilament ,神经元),此外细胞核中的核纤肽(lamin)也是一种中间纤维。
中间纤维
中间纤维
中间纤维具有组织特异性,大多数细胞中含有一种中间纤维,但也有少数细胞含有2种以上,如骨骼肌细胞含有结蛋白和波形蛋白。中间纤维蛋白分子由一个310个氨基酸残基形成的α螺旋杆状区,以及两端非螺旋化的球形头(N端)尾(C端)部构成。杆状区是高度保守的,由螺旋1和螺旋2构成,每个螺旋区还分为A、B两个亚区,它们之间由非螺旋式的连结区连结在一起。头部和尾部的氨基序列在不同类型的中间纤维中变化较大,可进一步分为①H亚区:同源区;②V亚区:可变区;③E亚区:末端区。
中间纤维蛋白分子结构和种类
(二)装配 ①两个单体,形成两股超螺旋二聚体(角蛋白为异二聚体);②两个二聚体反向平行组装成四聚体;③多个四聚体首尾相连组成原纤维;④8根原纤维组成中间纤维。 (三)中间纤维结合蛋白 中间纤维的结合蛋白(intermediate filament associated protein,IFAP)已报道有15种左右,分别与特定的中间纤维结合。如:flanggrin使角蛋白交联成束;Plectin将波形蛋白纤维与微管交联在一起;Ankyrin 把结蛋白纤维与质膜连在一起等。 (四)功能 在细胞中起支架作用,与核定位有关,与核内基因组的功能有关。特异性药物?
中间纤维蛋白的装配示意图
中间纤维的组装
中间纤维形成的模型
几种中间纤维模式图
中间纤维分类与分布
第二节 细胞核骨架 1,形态结构 2,成分: 核骨架纤维直径3-30nm,为网络状的骨架 细胞核分级抽提技术和非树脂包埋-去包埋剂技术 第二节 细胞核骨架 (狭义的仅指核基质,广义的指核基质,核纤层和核孔复合体) 1,形态结构 核骨架纤维直径3-30nm,为网络状的骨架 细胞核分级抽提技术和非树脂包埋-去包埋剂技术 2,成分: DNA Topo II,;核基质蛋白(D, E, F, C4等) (DNA-loop的结合蛋白);Nuc2+蛋白(与富含AT的DNA序列有特异亲和性); ARBP(与MAR序列结合); H1(与维持染色体高级结构有关); 着丝粒缢痕结合蛋白,HMG 1,2(识别富含AT序列); 核纤层蛋白A,B(将染色质锚定于核纤层);核仁蛋白(与富含T的序列结合)等。
3,核骨架结合蛋白: 转录因子(有DNA序列特异性) 酶:组蛋白乙酰化和去乙酰化酶,DNA聚合酶α和β, 酪氨酸激酶。 受体:一些激素(肾上腺皮质激素,雄激素,雌激素, 甲状腺素)的受体。 供体:视网膜母细胞瘤蛋白。 其它:B23,肌动蛋白等。
4,核骨架结合序列 5,功能 核骨架蛋白与富含AT的DNA序列(MAR和SAR)结合, ①参与DNA复制;复制起始点是MAR,DNA聚合酶与核骨架结合而被激活 ②活性基因和RNA聚合酶结合于核骨架上,RNA合成在核骨架上进行 ③与病毒的复制有关 ④参与染色体的构建
核骨架和细胞骨架
核孔复合体和核骨架
三、染色体骨架 四、核纤层 1,染色体骨架的真实性(非组蛋白骨架是DNA放射环 的组织者) 2,染色体骨架的成分:大约30种非组蛋白,包括SCI 和SCII 3,与核骨架的关系 四、核纤层 1,形态结构:厚度30-100nm,纤维直径10nm,呈网络状 2,成分:核纤层蛋白A,B,C,其中A和C是同一基因的不同 加工产物(与中间纤维在结构性质等方面接近) 3,功能:连系核膜,锚定染色质(亲膜结合作用,与 DNA结合)
染色体骨架
核纤层