病理生理学教研室 细胞信号通路检测(一) 总蛋白提取.

Slides:



Advertisements
Similar presentations
簡介 …………………………p.1 健康新天地 ………………….p.2 小食餐單 …………………….p.3 士多啤梨 蘋果 之營養 p.4 蕃茄 葡萄之營養 p.5 鮮奶的益處 ………………….p.6 有關圖片...…………………..p.7 總結.
Advertisements

中医护理 —— 鱼腥草 护理 1334 班 小组成员:郭丽丹 43 杨专 39 张建 35 李晓敏 27 陈燕红 25 张良州 8 分工合作: 收集整理 43 郭丽丹 35 张建 27 李晓敏 讲解 39 杨专 25 陈燕红 8 张良洲.
护理基本技术 第十二单元 冷热疗技术 雅安职业技术学院护理系 Tel :
手工加工全框眼镜技术 前调整确定加工基准制作模板割边 磨边磨安全角 (抛光) 装配 后调整检测.
融资融券业务的保证金与保证金比例 光大证券 · 信用业务管理总部 2015 年 12 月 ★融资融券业务投资者教育活动材料★
第三节 排气护理. 一、肠胀气病人的护理 肠胀气是指胃肠道内有过多的气体积聚,不能 排出。 1. 心理护理 2. 适当活动 3. 必要时遵医嘱给药或行肛管排气 4. 健康教育.
第四章 基础护理操作技术 中 国 医 科 大 学朱 闻 溪中 国 医 科 大 学朱 闻 溪 中 国 医 科 大 学朱 闻 溪中 国 医 科 大 学朱 闻 溪.
道家養生保健長壽藥膳 藥膳應用原則: 天人相應,道法自然 藥膳有兩個職能: 一是保健增壽,一是治療疾病。 ◎ 黃蕙棻.
鼻后孔阻塞综合征 程靖 1 、吴小海 2 1. 广东药学院附属第一医院(临床医学院) 耳鼻咽喉科学教研室 广州 广东药学院附属第二医院耳鼻咽喉科.
实验六 发育生物学常用 研究方法之三: Western blot. 实验目的 通过 Western blot 技术,研究特定蛋白在 不同发育阶段的果蝇体内表达情况,从而 推测该蛋白的功能。 通过 Western blot 技术,研究特定蛋白在 不同发育阶段的果蝇体内表达情况,从而 推测该蛋白的功能。
张 猛,陕西安康人。 振东健康培训经理。 曾任教育培训师、保健品营销主管等职务。 从事中药保健养生护理用品研发工作 3 年,带领团 队完成 4 项课题 10 个产品的研发工作.
客家娘酒 生命科学院 062 第二组 组长:李宗权 组员:林立强 李嘉豪 郑灿明 李耀斌 程惠源.
第二节 脉搏的评估及异 常时的护理. 教学目标  1 、解释有关名词  2 、说出脉搏、呼吸的正常值  3 、叙述脉搏、呼吸的测量方法;识别脉搏、 呼吸的异常变化  4 、叙述测量脉搏、呼吸的注意事项  5 、正确记录脉搏、呼吸,做到认真负责,实 事求是。
小儿脑性瘫痪 广州中医药大学第二临床医学院 针灸教研室 樊莉. 概述 定义:指由于大脑在尚未成熟阶段受到损 伤所导致的运动障碍和姿势障碍,可伴有 智力低下、惊厥、听觉与视觉障碍、学习 困难等。是一种非进行性中枢性运动功能 障碍。 发病率为 1.3% ,男多于女。 属中医 “ 五软 ” 、 “ 五迟.
小荳荳-義大利麵 組員: 顏瑄誼.林欣嫻.李昱暄.黃珮瑜.潘錡..
项目四、腻子的施工  一、准备工作  二、安全与卫生  三、板件表面的处理  四、准备腻子  五、刮腻子  六、腻子的干燥  七、腻子的打磨  结束.
冷 热 疗 法.
第二节 散剂的特点及制备 散剂:系指药物或与适宜的辅料经粉碎、均 匀混合制成的干燥粉末状制剂,分为 口服散剂和局部用散剂。 特点 :①起效快 ②相对比较稳定 ③制法简 单 ④应用方式灵活 ⑤不宜制成散剂 的药物.
中医美容保健.
個人理財規劃 第八章 投資規劃.
成为顾客贴心、老板放心的金牌服务人员 ——顾客服务案例培训
第7章 隔离技术 厦门医学高等专科学校 基础护理教研室.
保育员工作职责.
开天门 梅州市中医医院 郑雪辉.
小儿斜颈的诊断与治疗.
关 爱 老 人 关 爱 健 康 第八章 老年人呼吸系统的变化及护理.
生活护理技术 项目一 医院感染的预防与控制 项目二 排泄护理技术 项目三 促进呼吸功能护理 项目一 冷热疗法 项目二 标本采集 项目三
春季是细菌、病毒繁殖滋生的旺季,肝脏具有解毒、排 毒的功能,负担最重,而且由于人们肝气升发,也会引起旧 病复发,如春季肝火上升,会使虚弱的肺阴更虚,故肺结核 病会乘虚而入。中医认为,春在人体主肝,而肝气自然旺于 春季。如果春季养生不当,便易伤肝气。为适应季节气候的 变化,保持人体健康,在饮食调理上应当注意养肝为先。
吸烟有害健康 课题调查报告 无锡市新安中学初三(4)班.
中式面点技艺 长春市商业职业技术学校 王成贵 中式面点技艺 长春市商业职业技术学校 授课教师: 王 成 贵.
健管之刊 ——处暑养生 健 康 管 理 部 第十四期.
膳食调查与评价 1.
消防安全知识讲座 ---校园防火与逃生 保卫科.
阳性克隆的快速检测 一、实验目的 学习蓝白斑筛选试验中阳性克隆的快速检测方法 掌握蓝白斑筛选的原理和方法.
7.5 乳化作用.
乳酸杆菌对仔猪肠道非益生菌群粘附细胞的抑制作用的研究
实验一 小鼠骨髓细胞染色体的制备和观察 河北大学 基础医学实验教学中心 医学遗传学实验.
第三章 儿童少年、女子及 中老年的体育卫生 第一节 儿童少年的体育卫生
操作技能-2 长宁区公共卫生人员规范化培训系列课程 主讲人:长宁区疾病预防控制中心 综合办/应急办 庄建林 2015 年 8月 28 日.
学生学业水平诊断与提升策略探究 平阳中学 周秀丽.
征服火灾是全社会的事业,它需要科技的进步,需要消防监督,也需要消防科学知识的普及和提高。通过各类的消防安全培训,从而使人们更好的掌握消防常识和了解消防法规,提高消防安全意识,提高自防自救能力,使我们的生产和生活远离火灾的侵袭。
月经不调的简易 分类诊断与治疗.
月经生理.
足球運動情報蒐集與分析 趙榮瑞 教授.
講師:賴玉珊 心理師 證照:諮商心理師(諮心字第001495號) 學歷:國立台南大學諮商與輔導研究所 畢 現任:長榮大學諮商中心專任心理師
研究發展處 業務簡報 報 告 人:國立高雄餐旅大學 張明旭 研發長 中華民國105年4月14日.
二、汽化和液化.
复习: 一、细胞膜的成分 1、脂质 2、蛋白质 3、糖类 二、生物膜的功能: 1、界膜 2、控制物质的进出 3、进行细胞间信息交流.
粪 便 检 查 主讲老师:沈萍.
单位:临朐县龙岗镇上林初中 作者:王晓英 王复刚 课时量:1课时 适合学段:初中
营养早餐 小组成员:李鸿磊.官鸿铭.李智恒.梁振.徐林焰.林禧.胡喜燕.黄晟.林梦舒.徐锦海.陈莹、陈斯杭。
盆腔炎的护理 梅剑娟.
第1节人体内物质的运输 人体的组织细胞每时每刻都需要营养物质和氧,并不断产生二氧化碳、尿素等废物。这些物质在人体内运输主要依靠 系统。人体的血液循环系统由 、 和 组成。 血液循环 血管 心脏 血液.
课件 第 三 单 元 物质构成的奥秘 课 题 1 分子和原子(1) 华池县五蛟初中 张诚
的蒸气压增大到与外界压力相等时,就有大量气泡从液体内部逸出,即液体开始沸腾。这时的温度称为液体的沸点。 纯粹的液体有机化合物在一定的压力下具有恒定的沸点(沸程 ℃)。液体有机化合物含有水等杂质时,沸点通常会降低,沸程变宽。据此我们可以测定纯液体有机物的沸点及定性检验液体有机物的纯度。蒸馏还是提.
第3节 以水为主要传热介质 的烹调方法.
第三部分 动作与技能实验 实验一 反应时实验 实验二 反应时运动时实验 实验三 敲击速度实验 实验四 动作稳定性实验 实验五 手指灵活性实验
第一章 汽车的解体与清洗 第一节 汽车解体工艺 一、零件的拆卸原则 1、拆卸前应熟悉被拆总成的结构
Western印迹.
细胞信号通路检测(二) Western Blot
評分標準.
AD相关LncRNA调控及分析方法研究 项目成员:魏晓冉 李铁志 指导教师:张莹 2018年理学院大学生创新创业训练计划项目作品成果展示
细胞器的分级分离 [目的要求] 1.掌握差速离心法和密度梯度离心法的原理。 2.熟悉哺乳动物细胞的细胞核、线粒体分离和纯化的实验方法。
实验五 旋光度的测定 (有机化学与药物化学教研室)
化疗药物诱导细胞凋亡(一) 肿瘤细胞总DNA提取
遗传病的分析3 培养细胞的染色体制备.
床上洗头.
BAFF在活动性SLE患者T细胞中的表达:
Presentation transcript:

病理生理学教研室 细胞信号通路检测(一) 总蛋白提取

背景知识

背景知识

蛋白质表达水平和细胞内定位研究 信号蛋白分子表达水平及分子量检测 Western Blot analysis 信号蛋白分子在细胞内定位研究 IMMUNOHISTOCHEMISTRY/IMMUNOCYTOCHEMISRY IMMUNOFLUORESCENCE (IF) GREEN FLUORESCENT PROTEIN (GFP, LIVE CELLS)

实验方法、流程 细胞培养 细胞总蛋白提取(本次实验内容) WB 检测信号通路相关蛋白表达

实验材料 HepG2肝癌细胞,细胞培养皿,细胞刮,RIPA裂解液,PBS,低温离心机,冰盒,EP管,移液器

操作步骤 弃去细胞培养基,4℃预冷的PBS清洗细胞1次 留适量PBS(一般为1ml,大皿可酌情增加)刮取细胞,12000rpm 4℃离心2min,去除上清液。 向细胞沉淀中加入适量RIPA蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制剂)轻吹充分混匀,放置冰上裂解30min(每隔5min涡旋混匀一次) 4℃ 14000rpm离心10min,收集上清至新的EP管中即为蛋白样品 紫外-可见光分光光度计检测蛋白浓度-20 ℃ 保存

讨论 为了更好的观测信号通路的活化,蛋白操作过程中应注意哪些问题? 为何使用WB方法可以检测信号通路的活化?