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遗传病的分析3 培养细胞的染色体制备
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定 义 在细胞的生长周期中，中期染色体的长短、大小、恒定性正适合我们对其进行分析、研究。
因此利用人工的方法，使大部分分裂细胞处于中期而不向后期转化，并获得之，经处理，制片后观察分析。
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器 材 细胞株 普通光学显微镜 冰载玻片 酒精灯
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试 剂 0.25%胰旦白酶液 0.075M KCL 秋水仙素 固定液（冰醋酸/甲醇 1:3） Giemsa染液
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操 作 1. 收集细胞前6h，培养细胞中加5ug/ml秋水仙素2滴，混匀后继续培养 2. 0.25%胰旦白酶液消化细胞，并收集细胞于离心管中
%胰旦白酶液消化细胞，并收集细胞于离心管中 3. 离心1800转/min×10min，弃上清，取沉淀 4. 加0.075M KCL低渗液4ml，充分打匀细胞，室温静置20min 5. 再加入固定液1ml，并与原有的低渗液充分混匀，室温静置5min 6. 离心，弃上清，取沉淀
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操 作 7. 加固定液5ml，轻轻打匀，室温静置30min 8. 离心，弃上清，取沉淀 9. 加少量固定液，制成染色体悬液
8. 离心，弃上清，取沉淀 9. 加少量固定液，制成染色体悬液 10. 取1-2滴染色体悬液，滴加在冰玻片上，迅速吹片，酒精灯下烤干玻片 11. Giemsa染色5min，自来水冲洗，待干 后，显微镜下观察
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光镜100倍下人染色体G带照片
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注 意 浓度与时间 秋水仙素、低渗 临用时新鲜配制 固定液、染液 固定液的比例 制片和染色
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