抗高血压药物对离体血管平滑肌的作用
实验目的 制备离体血管平滑肌标本模型,观察抗高血压 药物对血管平滑肌收缩作用的影响。
实验材料 实验动物:家兔 2.5kg 实验器材:兔台,手术器械 1 套,纱布,棉球, 恒温水浴箱,浴管,张力换能器,注射器, 4 或 5 号针头。 药品与试剂:克氏液 10-2mol/L , 4mol/L 氯化钾, 3×10-3mol/L 去甲肾上腺素,哌唑嗪, 10- 2mol/L 普萘洛尔, 10-2mol/L 硝普钠, 95%O 2 及 5%CO 2 的混合气体。
方法与步骤(一) 1. 制备兔冠状动脉平滑肌条和胸主动脉平滑肌条。家兔 1 只, 猛击头部致昏,迅速剖胸,分离右冠状动脉条和胸主动 脉下段 ( 胸主动脉于近心端及远心端在膈肌处剪断 ) ,迅 速置于充氧的克氏液中,剔除血管外结缔组织及脂肪, 洗去凝血块,轻轻套在与之同样粗细的玻璃棒上,然后 用眼科剪将主动脉、右冠状动脉剪成宽 3-4mm 、长 2- 3cm 的螺旋形条片。两端分别穿线结扎,置于麦氏浴管 内,其中一端接在水浴管内的 L 型管上,另一端连在张 力换能器上。调节水浴温度达 37±1 ℃。麦氏浴管内充有 30ml 克氏液,并通 95%O 2 及 5%CO 2 的混合气体。将记 录仪与张力换能器连接并调整零点。
方法与步骤(二) 2. 待右冠状动脉条, 胸主动脉条稳定约 1 小时后,描记其 正常张力曲线,按如下顺序给药: ( 1 )加入 3×10 -3 mol/L 去甲肾上腺素 0.1ml ,待最大反应后,冲洗 标本。 ( 2 )待右冠状动脉条, 胸主动脉条恢复后,加入 mol/L 哌唑嗪 0.2ml , 15 分钟后,重复( 1 )。待作用稳定后,冲洗标本。 ( 3 )向浴管内加入 4mol/L 氯化钾 0.1ml ,待作用明显后冲洗。 ( 4 )待曲线平稳后加入 mol/L 硝普钠 0.2ml ,待作用明显后冲洗。 ( 5 )向浴管内加入 3×10 -3 mol/L 异丙肾上腺素 0.1ml 待作用明显后冲 洗。 ( 6 )待曲线平稳后加入 mol/L 普萘洛尔 0.2ml 。 ( 7 ) 15 分钟后,重复加入异丙肾上腺素 0.1ml ,待作用稳定后,冲 洗标本。
结果与讨论 观察、记录、分析实验结果,并思考与讨论下 面几个问题 : 1. 去甲肾上腺素,氯化钾诱导血管平滑肌收 缩的机制是什么? 2. 抗高血压药物作用于血管平滑肌的导致血 管扩张的机制是什么?
注意事项 制备主动脉条标本时操作要轻柔,切勿用力牵拉, 以免损害主动脉的平滑肌组织。 克氏液必须临时新鲜配制。 向浴管内通入混合气体时,注意通气量,一般为 40 ~ 60 个气泡 / 分钟。