L/O/G/O Your Company slogan in here 诊断日本血吸虫病的新途径与新方法探究 —— 指导老师：彭丁晋
目录 项目的技术路线 国内外研究现状和发展动态 该项目要解决的主要问题 项目研究的目的、内容 1 实验预期结果 5
①项目研究的目的 日本血吸虫病是由血吸虫感染所引起的一种危害人 体健康的寄生虫病，是我国 5 种主要的寄生虫病之 一，其感染所导致的病情是最为严重的，也是防治 难度最大的。 血吸虫病的诊断在其防治工作中占据重要的地位， 是确定血吸虫感染率、考核防治效果、监测传播和 制定防治策略的主要依据。因此，找到一种简单方 便、特异性强、准确性高的血吸虫病检测方法显得 尤为重要
由于血吸虫多于肠黏膜下层静脉末梢产卵，故肠黏 膜组织抗原浓度应高于循环血液中浓度。而现有诊断方 法都是检测血清中循环抗体，不仅诊断时检测率较低， 治愈后假阳性率也较高。因此，我们认为直接检测肠粘 膜中抗原，不仅可以提高检出率，而且也降低了假阳性 率和假阴性率，降低漏诊率。而这一研究经查证国内外 均还没有人员研究。
②项目研究和实验内容 1. 制备抗血吸虫毛蚴分泌抗原的高效价 IgY 抗体。 2. 建立用 IgY 抗体检测血吸虫感染鼠模型结肠黏膜中 毛蚴分泌抗原的敏感方法：即微管凝胶环状沉淀法和 夹心 ELISA 法。 3. 比较检测血吸虫病鼠模型与其治疗鼠的结肠黏膜中 毛蚴分泌抗原，评价新的检测途径与方法对血吸虫感 染诊断及疗效考核的效果及意义
该项目要解决的主要问题 1 制备抗血吸虫毛蚴分泌抗原的 IgY 抗体是 完成本实验的前提，能否达到预期目的 这是关键和难点，其中获取高纯度的毛 蚴分泌抗原就存在一定难度； 2 准确获取鼠模型的肠黏膜定量组织也是 确保检测可靠的重要环节，否则会出现 较大试验误差而影响结果。
国内外研究现状和发展动态 1. 日本血吸虫病诊断方法的研究现状 ①. 传统的病原学方法（粪便检查）是诊断血吸虫病 最为经典和可靠的途径，是判断血吸虫感染与否的 “ 金标准 ” 。 ②. 在病原学诊断中还有临床常用的一种传统方法 - 直 肠镜检法，用其对慢性血吸虫病诊断其到弥补粪检不 足的作用。 ③. 血吸虫病免疫诊断常用的方法主要包括三种常规检测 方法：皮内试验、间接血凝试验、环卵沉淀试验，同时还 有酶联免疫吸附试验免疫酶染色试验、酶联免疫印迹技术 、胶体染料试纸条法、斑点金免疫渗滤法等几种特异性检 测方法。
3. 日本血吸虫分泌的抗原及鉴定的研究现状 吸虫抗原按其来源可分虫体抗原、纯化抗原、重组抗原等。 虫体抗原包括成虫和虫卵抗原、循环抗原；纯化抗原包括 SEA 的纯化片段 CEF6 、 31 ／ 32 ku 组分抗原、 SEA-4D12 组 分抗原等；重组抗原包括重组蛋白 PR26 、钙结合蛋白 (SmEl6 蛋白 ) 等。 4. 卵黄抗体研究现状 根据哺乳动物源抗体与 IgY 的优点和局限性分析，可以引入一 种单克隆卵黄抗体概念。这种抗体兼具 IgY 种属距离优势和单 抗的高特异性与稳定性，抗体的专一性进一步加强，有望在针 对哺乳动物高保守蛋白的抗体研发及特异性检测上获得突破。 如进一步将 mIgY 组装成嵌合抗体或人源化抗体，则能促进抗 体介导靶向药物以及临床应用的发展。
项目的技术路线 Yea r 1. 抗血吸虫可溶性虫卵抗原的 IgY 制备与鉴定 2. 血吸虫小鼠模型的建立及分组 3. 检测样本的收集及处理 4. 抗原检测方法建立 5. 肠黏膜中抗原检测实验 6. 结果分析 ①各方法检测数据与小鼠体内检获虫体的情况比较，分析各法和 各类样本检测数值与感染度（虫数）的相关关系。 ②整理个样本检测结果，获得各法对各类检测样本的阳性检出率、 敏感性、特异性和疗效考核价值（转阴率）。采用 SPSS-17 统计 软件统计分析两种方法对检测血样本和肠黏膜样本中抗原的敏感 性和可靠性的差异，确认新方法新途径对鼠模型的诊断效率及考 核疗效价值。 总之，将检测结果通过对照组与实验组之间的比较，可望为诊断 新途径和新方法的进一步研发提供可靠的试验依据。
预期结果 (1) 利用抗血吸虫可溶性虫卵抗原的 IgY ，运 用双抗体夹心 ELISA 的方法，可以更方便、 更精确地检查小鼠患日本血吸虫病的情况。 从而为临床检查血吸虫病提供一种新的诊断 方法，弥补现行诊断方法不足； (2) 预期可发表 1-2 篇较高水平的科研论文； (3) 亦有可能申报一项国家发明专利。
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