果蝇杂交实验 学 院 学 院： 动物科技学院 课程名称 课程名称： 动物遗传学实验课 主 讲 人 主 讲 人： 蓝贤勇 博士、副教授 陈 宏 博士、教授 雷初朝 博士、教授
实验目的 掌握果蝇雌雄的鉴别方法及野生型和常见突 变型果蝇的形态特征 掌握果蝇实验处理及杂交技术，实验记录及 统计分析方法。 探索果蝇性状的遗传定律。
实验材料及用品 材料：果蝇 e # 、 12 # 、 18 # 、 22 # 用具：显微镜，麻醉瓶，培养瓶等。 药品：乙醚等。
1. 生活史短， ℃条件下完成一个世代需 天。 2. 繁殖率高，一对果蝇可产卵 只。 3. 饲养方便。 4. 突变率高, 且为形态突变, 容易辨认。 5. 唾腺为巨大染色体 6. 染色体数目少 一 果蝇的优点：
果蝇属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇 科、果蝇属。 二 果蝇的生活史
23 ℃下果蝇的生活史 : 成虫 4 天 减数 12 小时 分裂 蛹 精、卵 2.5 ～ 3 天 2 天 三龄幼虫 受精卵 1 天 1 天 二龄幼虫 一龄幼虫 1天1天
生活史周期
果蝇的寄生虫 —— 螨虫
三 果蝇的饲养 （一）果蝇培养基成份（ 100ml ） 水 80ml 玉米粉 8.25g 糖 6.2g 琼脂 0.6g 丙酸（苯甲酸） 0.5ml （ 0.25g ） 酵母少许
（二）配制方法 糖琼脂糖琼脂
（三） 培养瓶、棉塞灭菌
灭菌温度 120 ℃ 灭菌时间 20 分钟
四 果蝇♀♂识别 ♀♂ 个体大小 腹纹 53 腹部末端尖圆 性梳无有
雌雄果蝇
雌性果蝇
果蝇性梳
五 果蝇的麻醉 1 、麻醉剂：乙醚
2 、方法 2. 操作
3 、死亡果蝇的标志
六 果蝇性状观察 3 、眼睛的颜色 2 、翅的大小 1 、身体的颜色
残翅野生型 棒眼 黑檀体 白眼
实验材料 眼色翅形体色 e 2 红白长残灰黑 性状性状 品种品种
实验原理 孟德尔分离规律指出不同对的基因 ( 非同源染 色体上的基因 ) 在杂种形成配子时，各对基因 是独立分配的，自由组合的，因而由两对相 对性状杂交的杂种产生四种数目相等的配子， 自交产生四种表现型个体，其比例为 9 ： 3 ： 3 ： 1
实验原理 果蝇的长翅和残翅是一对相对性状，由 位与第二染色体上的基因 +/vg 所决定， 灰体和黑体是另一对相对性状，由位于 第三染色体上的基因 +/e 所决定。
实验原理 P1 长翅黑体 × 残翅灰体 （ ++ee ） （ vgvg++ ） F1 长翅灰体 （ +vg+e ） F2 9 长灰： 3 长黑： 3 残灰： 1 残黑 9+ ＿ + ＿ ： 3 + ＿ ee ： 3 vgvg + ＿ ： 1 vgvgee
实验方法 收集处女蝇：由于雌蝇生殖器官中有贮精囊，一次交配可保留大 量精子，供多次排卵受精用，因此做杂交实验前必须收集未交配 过的处女蝇。由于孵化出的幼蝇在 12 小时内（更可靠是 8 小时） 不交配，因此必须在这段时间内把雌、雄蝇分开培养，所得的雌 蝇即为处女蝇。 准备好培养基，按正、反交组合，把已麻醉的 e # ♀ 、 12 # ♂ 和 e # ♂ 、 12 # ♀ 分别放入不同管内进行杂交，贴上标签。 6 — 7 天后，见到有 F1 幼虫出现，即除去亲本果蝇（一定要除干 净）。 再过 7 天，观察 F1 成蝇的性状。 如果 F1 果蝇性状整齐一致，挑 3 — 5 对 F1 果蝇换入新的培养基继续 饲养（此处无需处女蝇，为什么？）。 6 — 7 天后除干净 F1 代亲本果蝇。 再过 7 天， F2 代成蝇出现，麻醉后倒在白瓷板上观察, 并进行统计 分析。
实验结果统计 统计 F 2 各种表型，进行 X 2 测定，得出果 蝇性状的遗传规律，并进行实验讨论。