病原微生物实验室生物安全 上海市卫生局卫生监督所 袁璧翡

一、2010年实验室生物安全工作回顾 1、风险分类监管 2、隐患排摸消除 3、监督抽检支持

一、2010年实验室生物安全工作回顾 1、日常管理各项指标的合格率基本都保持在99%以上 2、菌毒种以及生物阳性标本安全管理的各项指标合格率有了很大的提高，部分指标达到了100%的合格 3、外送标本的生物安全防护日益规范 4、生物安全柜的使用愈加规范

二、薄弱环节 1、个人防护 2、生物安全柜的规范使用 3、废弃物的处置

1、 个人防护

临床检验相关生物危险等级分布

生物安全防护三原则 实验室生物安全防护的内容包括: ---确保实验室工作人员不受实验对象侵染， 确保周围环境不受其污染 。 1、安全设备、个体防护装置和措施（一级防护） 2、实验室的特殊设计和建设要求（二级防护） 3、严格的管理制度和标准化的操作程序和规程等方面采取综合措施 ---确保实验室工作人员不受实验对象侵染， 确保周围环境不受其污染 。

个人防护装备 是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。 在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷濺物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。

个人防护装备 所涉及的防护部位 ： 1、眼睛、 2、头面部、 3、躯体、 4、手、 5、足、耳（听力） 6、呼吸道

个人防护装备 装备包括： 1、眼镜（安全镜、护目镜） 2、口罩、面罩、防毒面具 3、帽子 4、防护衣 ( 实验服、隔离衣、连体衣、围群) 5、手套 6、鞋套 7、听力保护器等。

个体防护的配备原则——BSL－1实验室 工作人员在实验时应穿工作服。 工作人员手上应戴手套。 实验室内不得放置生活物品。

个体防护的配备原则——BSL－2实验室 除符合BSL－1的要求外，还应该符合下列条件： 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒，然后统一洗涤或丢弃。 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。 一次性手套不得清洗和再次使用。

2、 生物安全柜

生物安全柜 为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时： 用来保护操作者本人、实验室环境以及实验 材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能 产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。

生物安全柜 正确使用生物安全柜— 将有效减少由于气溶胶暴露所造成的实验室感染以及培养物交叉污染。

生物安全柜的分级 和试样（产品） I级生物安全柜 保护工作人员和环境 II级生物安全柜 保护工作人员、环境和试样（产品） III级生物安全柜 采用手套箱更严格地保护工作人员、环境 和试样（产品）

Class II 生物安全柜 可开启前窗 从前开口向内的气流用于保护人员 经HEPA过滤后向下送的层流，以保护样品 表面风速在0.38-0.5m/s

Ⅱ级生物安全柜 Ⅱ级生物安全柜在设计上不但能提供个体防护，而且能保护工作台面的物品不受房间空气的污染。 经HEPA过滤的（无菌的）空气流过工作台面。Ⅱ级生物安全柜可用于操作危险度2级和3级的感染性物质。在使用正压防护服的条件下，Ⅱ级生物安全柜也可用于操作危险度4级的感染性物质。 Ⅱ级生物安全柜有四种不同的类型 （分别为A1、A2、B1和B2型）

Class II 生物安全柜的分类 Class II Type A Type B A1 B1 A2 B2

最小平均表面流速0.38 m/s (A1)或 0.5 m/s (A2) A类和B类的区别 Class II Type A Type B 最小平均表面流速0.38 m/s (A1)或 0.5 m/s (A2) 最小平均表面流速为0.5 m/s 气体排入实验室或室外 必须经排风系统将气体 排至室外，带报警装置

物理性能指标 1、工作区平均风速 0.35±0.025m/s 2、工作窗口平均风速 ＞0.4m/s

生物安全柜的使用 1. 正确安装，确保安全柜与外部 排风系统压力平衡，保证安全 柜处于正常工作状态。 2. 定期维护和检测，确保安全性

操作者 生物安全柜如果使用不当，其防护作用就可能大大受到影响。 　生物安全柜如果使用不当，其防护作用就可能大大受到影响。 操作者在移动双臂进出安全柜时，需要小心维持前面开口处气流的完整性，双臂应该垂直地缓慢进出前面的开口。

在生物安全柜上工作 理想的工作台摆放 被污染的区域 垃圾袋 废弃物托盘 干净的物品

生物安全柜的规范操作 1、规范使用步骤—什么实验项目要使用？哪个步骤要使用？ 2、使用后消毒 3、定期进行性能指标检测

废弃物处置 先消毒再处置 高压蒸汽灭菌设备的消毒效果监测 1、化学监测：每次消毒 2、生物监测：每月一次

菌毒种、生物阳性标本的管理 菌毒种：1、实验用的质控菌株如金葡菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等 2、可能用于药敏试验等实验工作的标准菌毒株 3、可能用于生产的菌毒株 4、实验室自己培养的用于科研等用途的实验菌毒株

生物阳性标本：指的是经过病原微生物实验室检验确定为检验项目阳性的标本。主要包括乙肝指标阳性的标本、血培养阳性的标本、结核培养阳性的标本、HIV检测阳性的标本等。 主要用途：质控要求、科研需要

菌毒种、生物阳性标本的管理 保存的地点安全 双人双锁管理 保存记录（入库时间、数量，出库时间、去向、数量，销毁时间、数量）

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