Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University

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Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University 医学微生物学 Medical Microbiology 病原生物学教研室 Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University

第二章 微生物的生物学性状 第一节 细菌

一、定义 1. 广义: Bacteria, mycoplasmas, chlamydiae, rickettsiae, spirochete, actinomyces. 细菌是一类体形微小、结构简单、有细胞壁和原始核质、无核仁和核膜、RNA+DNA、除核糖体外无其他细胞器的原核细胞型微生物。 有肽聚糖,真菌没有 2. 狭义:

二、大小与形态 (一)大小 测量单位:μm 球菌直径:约1μm 2. 测量方法: 测微尺

(二)形态 Coccus Vibrio Coccobacillus Spirillum helicobacterium Bacillus

1. 球菌(coccus) 圆球形或近似球形

Tetrad Sarcina Cell Arrangement Staphylococcus Coccus (Diplococcl) Division in plane (Diplococcl) (Chain) Neisseria Streptococcus Division in two planes (Tetrad) Sarcina three planes (Sarcina) Staphylococcus (Clustor) Multi- planes Tetrad

(1)双球菌(diplococcus) 肺炎链球菌 (S. pneumoniae) 淋病奈瑟菌 (gonococcus)

(2)链球菌(streptococcus) 甲型溶血性链球菌 (α-hemolytic streptococcus)

(3)葡萄球菌(staphylococcus) 金黄色葡萄球菌(S. aureus)

藤黄八叠球菌 四联球菌(tetrad) 八叠球菌 (sarcina)

2.杆菌(bacillus)

3.螺形菌(spiral bacterium) 弧 菌: 霍乱弧 菌 螺 菌: 鼠咬热螺菌 螺杆菌:幽门螺杆菌 特点:培养8-18h,典型形态

三、基本结构 Nucleoid Cytoplasm Mesosome Pili Capsule Cytoplasmic membrane Cell Wall/outer Membrane (If present) Flagellum Granular inclusion Ribosomes 三、基本结构

细胞壁 基本结构 细胞膜 细胞质 细胞核/核质 特殊结构 荚膜 菌毛 鞭毛 芽胞

(一)基本结构: Gram stain(革兰染色) Gram positive bacteria G+菌 Gram negative bacteria G-菌

1、 细胞壁 (1)肽聚糖(Peptidoglycan) 聚糖骨架 β-1,4糖苷键 N-乙酰葡糖胺(G) N-乙酰胞壁酸(M) 四肽侧链 五肽交联桥: 甘氨酸 仅存在于G+菌

β-1,4糖苷键

(2)G+菌细胞壁特殊组分 a)磷壁酸 多, 占细胞壁干重50% 作用:致病/分型 分类: 壁磷壁酸 膜磷壁酸(LTA) b)表面蛋白质 壁厚:20-80nm 15-50层 a)磷壁酸 多, 占细胞壁干重50% 作用:致病/分型 分类: 壁磷壁酸 膜磷壁酸(LTA) b)表面蛋白质 SPA M蛋白 膜磷壁酸 壁磷壁酸 胞壁酸 细胞壁 肽聚糖 糖脂 磷脂 蛋白质 细胞膜

(3)G-菌细胞壁特殊组分 外膜:约占细胞壁 干重80% 脂蛋白 脂质双层 特异多糖 脂多糖 核心多糖 脂质A 壁薄: 10-15nm 1-2层 外膜:约占细胞壁 干重80% 载体蛋白 肽聚糖 营养结合蛋白 脂蛋白 脂质双层 孔蛋白 脂多糖 外膜 脂蛋白 脂质双层 脂多糖 特异多糖 核心多糖 脂质A

脂多糖(lipopolysaccharide, LPS) a) 脂质A 毒性部位 无种属特异性 b)核心多糖 属特异性 c)寡糖重复单位 种特异性 菌体抗原(O抗原)

(4)G+菌与G-菌CW的区别 CW G+菌 G-菌 强度 较坚韧 较疏松 厚度 厚(20-80nm) 薄(10-15nm) 强度 较坚韧 较疏松 厚度 厚(20-80nm) 薄(10-15nm) 肽聚糖层数 多(15-50层) 少(1-3层) 肽聚糖含量 多(50-80% ) 少(10-20% ) 糖类含量 多(45% ) 少(15-20% ) 脂类含量 少(1-4% ) 多(11-22% ) 磷壁酸 + — 外膜 — +

(5)Function of cell wall ①维持细胞形态、抗低渗 ②保护作用 ③物质交换 ④诱发免疫应答 ⑤细菌致病性 ⑥染色性

(5)细菌L型(bacterial L form) 又名细菌细胞壁缺陷型 G+菌仅有细胞膜:原生质体 G-菌有细胞膜+细胞外膜:原生质球 固体:油煎蛋菌落 与支原体鉴别 培养 液体:絮状颗粒沉于管底、 培养液澄清 形态:多形态 Gram stain:G-

葡萄球菌L型

荷包蛋样(L型) 颗粒型(G型) 细菌L型菌落类型 丝状型(F型)

2 细胞膜(cell membrane) 拟线粒体 ①位置 厚~7.5nm 占细胞干重10 ~30% ②组成 蛋白质、磷脂、不含胆固醇 ③功能 物质转运、生物合成、分泌、呼吸 参与细胞分裂中介体 拟线粒体

3 细胞质(cytoplasm) ②质粒(plasmid) ①核糖体(ribosome) proteins RNA 34% 66% 细菌染色体外的遗传物质 特性:自行复制、随细菌分裂到子代细胞

③胞质颗粒(Granular inclusion) 内含物:如异染颗粒

4 核质(nuclear material) 又名拟核(nucleoid) 无核膜与核仁 是细菌的遗传物质/细菌的染色体 单一密闭环状DNA,反复回旋卷曲盘绕松散网状结构

(二)特殊结构 capsule flagellum Special structure pilus/fimbriae spore/endospore

1 荚膜(capsule) ①概念:包绕在细胞壁外的一层粘液性物质。 ②化学组成 大荚膜/荚膜:厚≥ 0.2 μm 多糖:大多数荚膜 如肺炎球菌荚膜 多肽:少数荚膜 如炭疽杆菌荚膜 ②化学组成

固体培养基:有荚膜 菌落 粘液型(M型)/光滑型(S型) 无荚膜 菌落 粗糙型(R型) ③染色: 墨汁负染

④功能 a)抗吞噬 重要的毒力因子 b)粘附 生物膜 感染 龋齿: 蔗糖 变异链球菌(荚膜粘附牙齿表面) 乳酸,破坏牙齿釉质 蔗糖 变异链球菌(荚膜粘附牙齿表面) 乳酸,破坏牙齿釉质 c)抗有害物质的损伤 如抵抗溶菌酶、补体、抗体、抗生素等

2 鞭毛(flagellum) ①概念: Chromosome Pilus (fimbria) Ribosomes Inclusion Ribosomes Pilus (fimbria) Chromosome ①概念: 在菌体上附着的细长并呈波状弯曲的丝状物。是细菌的运动器官。 Cell wall Capsule or slime layer Plasmid Cell membrane

②类型 Structure Flagella Type Example Monotrichous Vibrio choierae Lophotrichous Bartonella bacilliformis Amphitrichous Spirillum serpens Peritrichous Escherichia coli

a)单毛菌 如霍乱弧菌 b)双毛菌 如空肠弯曲菌 c)丛毛菌 如铜绿假单胞菌 d)周毛菌 如伤寒沙门菌

④功能 a)运动: 某些与细菌致病性有关 b)抗原:鉴定及分类

3 菌毛 (pilus/fimbriae) 在菌体表面存在的比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物。 ①概念: 许多G-菌,少数G+菌。

②类型 a)普通菌毛(ordinary pilus):黏附功能 粘附结构 与宿主细胞表面受体结合 与致病性有关

b)性菌毛/F菌毛 G-菌,由一种致育因子(fertility factor, F因子) 的质粒编码(F质粒) F+菌/雄性菌: F菌毛 质粒 F-菌/雌性菌: 无F菌毛

3 芽胞(spore/endospore) ①概念: 细菌细胞质脱水浓缩形成一个圆形或卵圆形的小体,为细菌的休眠形式。 G+菌

②形成与发芽 繁殖体 发芽 芽胞形成 芽胞

形成特点 芽胞基因控制 动物体外形成,营养条件较差 芽胞 菌体 不是繁殖体 繁殖体 1个 1个 热、pH、水

③结构 ④功能 抵抗力强:100℃ 数小时杀灭 可靠方法:高压蒸气灭菌 鉴别细菌: 细菌芽胞结构模式图 外膜 内膜 芽胞外衣 芽胞壁 核心 芽胞壳 皮质 内膜 核心 芽胞外衣 细菌芽胞结构模式图 ③结构 ④功能 抵抗力强:100℃ 数小时杀灭 可靠方法:高压蒸气灭菌 鉴别细菌:

四、细菌的理化性质与新陈代谢 细菌的营养类型 自营菌:以简单的无机物为原料 异营菌:以多种蛋白质、糖类等有机物为营养 寄生菌:从宿主体内的有机物取得营养。 腐生菌:以植物尸体、腐败食物为营养物质 所有的病原菌都是异营菌,大部分属寄生菌

四、细菌的理化性质与新陈代谢 意义:物质交换 (一)理化性质 物理性状: 1 光学性质:半透明体 液体:混浊度与细菌数成正比 2 表面积大 1 光学性质:半透明体 液体:混浊度与细菌数成正比 2 表面积大 直径1μm葡萄球菌 1cm3表面积60000cm2 直径1μm生物体 1cm3表面积6cm2 意义:物质交换

3 带电现象 菌体成分50-80%为蛋白质 G+菌等电点为pH2-3 G-菌等电点为pH4-5 近中性或弱碱性环境中,细菌均带负电荷,G+菌带得更多 意义:染色、凝集反应、抑菌、杀菌

4 半透性 物质交换 吸收营养,排出废物 5 渗透压 高渗,G+菌(20-25大气压)大于G- (5-6)菌 意义:高盐高糖保存食物

化学组成 1 水 75-90%细胞重量 有机物 C、H、O、N、P、S 蛋白质、 脂类、糖类、核酸等

3 无机离子 K、Na、Fe、Mg、Ca、Cl等 作用:构成菌细胞各种成分 4 特有成分 维持酶活性 维持跨膜化学梯度 3 无机离子 K、Na、Fe、Mg、Ca、Cl等 作用:构成菌细胞各种成分 维持酶活性 维持跨膜化学梯度 4 特有成分 肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、吡啶二羧酸、二氨基庚二酸(DAP)

(二)细菌的新陈代谢 Ⅰ能量代谢 1 发酵 以有机物为受氢体的代谢过程 (1)概念 (2)分类 a)磷酸戍糖途径 b)EMP途径

2 需氧呼吸 3 厌氧呼吸 以分子氧为受氢体的代谢过程 1分子葡萄糖产生38个ATP 以其他无机物为受氢体的代谢过程 2 需氧呼吸 1分子葡萄糖产生38个ATP 3 厌氧呼吸 以其他无机物为受氢体的代谢过程 1分子葡萄糖产生2个ATP

Ⅱ 代谢产物 1 分解代谢产物及生化反应 (1)糖发酵试验 大肠埃希菌 伤寒沙门菌 葡萄糖 + + 乳 糖 + -

(2)V-P试验(voges-proskauer test) 产气肠杆菌 葡萄糖 发酵 丙酮酸 脱羧 乙酰甲基甲醇 OH- (中性) 红色化合物 胍基化合物+ 二乙酰

(3)甲基红试验(methyl red test) 乙酰甲基甲醇(中性) 产气肠杆菌 pH大于5.4,甲基红试剂呈桔黄色 (-) 大肠埃希菌 分解葡萄糖生成丙酮酸,pH≤5.4,红色(+)

(4)吲哚试验(Indol test) 色氨酸 大肠埃希菌 吲哚(靛基质) 对二甲基氨基苯甲醛+ 玫瑰吲哚(+)

(5)枸橼酸盐利用试验(citrate utilization) 氨 碳酸盐 铵盐 (氮源) 枸橼酸盐(碳源) 产气肠杆菌 (+)

I M Vi C 试验 大肠埃希菌 + + - - 产气杆菌 - - + +

(6)硫化氢试验 含硫AA (胱AA、半胱AA) 沙门菌、变 形杆菌等 硫化氢 硫化亚铁 (黑色化合物)

(7)尿素酶试验 尿素 变形杆菌 氨 (尿素酶) 尿素酶试验(+)

(1)热原质(pyrogen)/致热原 a)概念:热原质是细菌合成的、可引起 人/ 动物发生发热反应的物质。 多数G-菌:LPS Ⅲ 合成代谢产物及其在医学上的意义 (1)热原质(pyrogen)/致热原 a)概念:热原质是细菌合成的、可引起 人/ 动物发生发热反应的物质。 多数G-菌:LPS

吸咐剂/特殊石棉滤板 蒸馏法 内毒素 外毒素 b)性质:耐高热、高压蒸气灭菌不被破坏 250℃干烤 (2)毒素与侵袭性酶 G-菌LPS,菌体死亡游 离出来。 a)毒素 外毒素 多数G+菌,少数G-菌 分泌产生的蛋白质。

b)侵袭性酶 透明质酸酶、链激酶、链道酶等 (3)色素 a)水溶性色素 铜绿假单胞菌 b)脂溶性色素 金黄色葡萄球菌

(4)抗生素 概念: 大多由真菌和放线菌产生 (5)细菌素 概念: 亲缘关系的细菌 (6)维生素 大肠埃希菌:VitB、VitK

五、细菌的营养与生长繁殖 (一)细菌生长的环境因素 1、营养物质 (1)水 溶解营养物,有利于营养物的吸收与代谢 (2)无机盐 (1)水 溶解营养物,有利于营养物的吸收与代谢 (2)无机盐 (3)蛋白胨(或氨基酸) (4)生长因子:维生素、某些氨基酸、 嘌呤、嘧啶、 X因子、V因子

2 酸碱度 多数菌:一般为pH7.2-7.6 嗜碱:霍乱弧菌pH8.4-9.2 嗜酸:结核分枝杆菌pH6.5-6.8 3 温度 (1)嗜冷菌:-5-30℃ 最适温度:10~20℃ (2)嗜温菌:10-45℃ 最适温度:20~40 ℃ (3)嗜热菌:25-95℃ 最适温度:50~60℃

4 气体 (1)专性需氧菌 结核分枝杆菌 (2)微需氧菌 空肠弯曲菌、幽门螺杆菌 低氧:5-6%,大于10%不生长 (3)兼性厌氧菌 大多数病原菌 (4)专性厌氧菌 破伤风梭菌、脆弱类杆菌

厌氧菌为什么不能在有氧的环境中生长? 5 渗透压 a)缺乏氧化还原电势(Eh)高的呼吸酶 b)缺乏分解有毒氧基团的酶 如细胞色素、细胞色素氧化酶 b)缺乏分解有毒氧基团的酶 过氧化氢、超氧离子等具有杀菌作用 2O2- + 2H+ SOD H2O2+O2 2H2O2 触酶 2H2O +O2 2H2O2+AH2 过氧化物酶 2H2O+A 5 渗透压 嗜盐菌需适量的氯化钠 如:副溶血性弧菌需 3%氯化钠

(二)生长方式与速度 1 方式:二分裂无性繁殖方式 代时:细菌分裂数量倍 增所需的时间。 一般为20-30min 例外:TB

2 生长曲线(群体) (1)迟缓期 1-4h (2)对数期 8-18h (3)稳定期 (4)衰退期

(三)培养 1、培养基:由人工方法配制而成 的,能提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物需要的多种营养物质的混合物。

培养基的分类: 按营养组成和用途分: 按物理性状分: 基础培养基(basic medium) 增菌培养基(enrichment medium) 选择培养基(selective medium) 鉴别培养基(differential medium) 厌氧培养基(anaerobic medium) 按物理性状分: 液体培养基 固体培养基 半固体培养基

2、细菌在培养基中生长表现 1)液体培养基:均匀浑浊、沉淀、菌膜多用于增菌

2)半固体培养基: 含0.5%琼脂,浑浊生长或沿穿刺线生长 用于检测细菌的动力和保存菌种

3)固体培养基:含1-2%琼脂 菌落:单个细菌生长后形成的肉眼可见的细菌集团. 用于分离鉴定细菌-----纯种 光滑型 粗造型 粘液型

六、细菌的分类与命名 (一)分类 界、门、纲、目、科、属、种、亚种、 属、型、株 标准株 (二)命名 Staphylococcus aureus S. aureus 属名(用名词) 种名(用形容词)

第二节 病 毒 一、概述 1、定义 病毒(Virus)是一类体积微小,结构简单,只有一种类型核酸(DNA或RNA),在活的易感细胞内以复制方式增殖的非细胞型微生物。

2、virus的特点 体积微小; 结构简单; 只含一种类型核酸; 专性细胞内寄生; 以复制方式繁殖; 对干扰素敏感,对抗生素不敏感。

3、病毒与人类疾病的关系 1、约75%的人类传染病由V所致。 ㈠传染病的主要病原体; 2、部分V传播迅速,短期内可造成大流行。 如:流感V;

至今尚未找到抗病毒的特效药,因而对于病毒性疾病,应以预防为主。 ㈡致先天畸型 如:风疹V。 ㈢引起免疫缺陷 如:HIV。 ㈣与肿瘤的形成相关 如:HBV 肝癌; EBV 鼻咽癌。 至今尚未找到抗病毒的特效药,因而对于病毒性疾病,应以预防为主。

二、病毒的大小与形态 病毒体(virion): 完整的成熟病毒颗粒,具有典型的形态 结构,并有感染性。

(一)病毒的大小 1、测量单位为纳米(nm,为1/1000m) 2、大小悬殊: <50 nm 小型病毒 50 nm -150 nm 中等大小病毒(大多数) > 150nm 大型病毒(最大300 nm)

3、测量V大小方式: (1)电镜测量法(electron microscope,EM) (2)X线衍射分析法(X-ray diffraction) (3)超速离心沉淀法 (4)分级超滤膜术

微生物的大小比较 A、大肠杆菌噬菌体 ( 65 ×95nm ) B、腺病毒 (70nm ) 衣原体 390nm 立克次体 450nm C、脊髓灰质炎病毒 (30nm ) G A 葡萄球菌 (1000nm) D、乙脑病毒 ( 40nm ) F 牛痘病毒 300×250nm E、蛋白分子 (10nm ) B E C F、流感病毒 ( 100nm ) D G、烟草花叶病毒

轮状病毒的电镜照片 噬菌体的电镜照片

流感病毒的电镜照片 腺病毒的EM照片

(二)病毒的形态(virus shape) 球形/近似球形(脊髓灰质炎V、HBV)。 少数V: 杆状(烟草花叶V); 丝状(部分流感V); 子弹状(狂犬V); 砖块状(痘V); 蝌蚪状(噬菌体)等。

砖形(痘病毒) 子弹形(狂犬病病毒) 蝌蚪形(噬菌体) 杆状(烟草花叶病毒)

二、病毒的结构与化学组成 包膜子粒 包膜 包膜 病毒 壳粒 衣壳 核衣壳 核心(核样物) 病毒体结构模式图

(一)病毒的结构(Virus Structure) 1、 核心:核酸(DNA或RNA)→基因组genome 功能:1)决定病毒遗传、变异和复制; 2)V分类依据之一。 V按核酸构成不同分两大类 DNA-V RNA-V

2、 衣壳capsid 壳粒capsomere 多肽 1)壳粒排列不同 形成V衣壳结构的几种 对称类型 螺旋对称型(Helical Symmetry) 二十面体立体对称型( Icosahedral Symmetry ) 复合对称型(Complex Symmetry )

ICOSAHEDRAL SYMMETRY CAPSOMER = PENTON (pentamer)

2)作用: ⑴ 保护V核酸,免受核酸酶的破坏; ⑵ 介导无包膜V进入宿主细胞; ⑶ V体(无包膜V)的主要抗原。

3、包膜envelope 1)来源:宿主细胞膜或核膜。 2)部分V包膜有钉状突起 :包膜子粒(peplomere) 如:流感V的HA和NA 或刺突(spike) 如:流感V的HA和NA

3)作用: ⑴ 与包膜V致病性有关; ①参与病毒对易感细胞的吸附与穿入。 ②包膜脂蛋白 发热、中毒症状。 ⑵ 构成V体表面Ag; ⑶ 含脂质较多,对脂溶剂敏感。

(二)病毒的化学组成 1、核酸 功能:(1)病毒的复制 (2)决定病毒的特性 (3)具有传染性

2、病毒蛋白质:由病毒核酸编码 1)结构蛋白 组成病毒体的成分 衣壳蛋白 包膜蛋白 基质蛋白—连接衣壳蛋白与包膜蛋白的部分, 1)结构蛋白 组成病毒体的成分 衣壳蛋白 包膜蛋白 基质蛋白—连接衣壳蛋白与包膜蛋白的部分, 有跨膜及锚定功能区 功能:保护病毒核酸 参与感染过程 具有抗原性

2)非结构蛋白 酶(病毒内) 特殊作用蛋白(感染细胞内) 2、脂类和糖:

三、病毒的增殖 ㈠病毒增殖的部位:易感活细胞内。 ㈡病毒增殖方式:复制( replication) 病毒复制周期:病毒基因为模板,籍DNA多聚酶、RNA多聚酶等,指令细胞停止合成细胞的蛋白质与核酸,使细胞转为复制病毒的基因组,转录、转译出相应的病毒蛋白,最终释放出子代病毒。

病毒的复制分为四个步骤: 吸附adsorption 穿入penetration 脱壳uncoating 生物合成biosynthesis 组装成熟与释放assembly maturation and release

Virus attachment proteins Step 1: Adsorption(吸附) Virus attachment proteins glycoproteins, peplomers(包膜子粒), capsid proteins Cell receptors Protein molecules

Step 2: Penetration(穿入) Fusion(融合) Viropexis(胞饮)

Fusion Herpesviruses(疱疹V) Hepadnavirus(肝DNA V)

Viropexis

Step 3: Removal of caspid Migration to nucleus Removal of protective capsid(脱壳) Release of viral DNA into Nucleus

Migration to nucleus

Release of DNA into nucleus

Exception: Poxviruses(痘V)

穿入 penetration 脱壳 uncoating 直接穿入 融合 胞饮

Step 4 :Biosynthesis 以dsDNA为例,学习病毒的增殖过程

1、Early Phase Early Viral Proteins are made

Early viral Proteins 组成: 1、DNA多聚酶; 2、脱氧胸腺激酶; 3、调控病毒基因转录和抑制宿主细胞 代谢的酶类

Early viral proteins

2、Late Phase 病毒DNA复制 合成晚期蛋白:结构蛋白和其它蛋白

Late Phase

Step 5: Assembly and Release Capsid Assembly Nucleocapsid assembly

释放方式: 裂解式:裸露病毒或RNA病毒 出芽式: 包膜病毒 整合式:致瘤病毒 融合式:

Release by Exocytosis (Enveloped virus)

Release by Lysis( Naked Capsid) Accumulates in the nucleus until lysis of the cell

病毒的复制过程

病毒的复制过程

㈢病毒的异常增殖与干扰现象 1、病毒的异常增殖:在细胞内复制时不能产生完整的病毒体,即V的异常增殖。 1)顿挫感染(流产性感染) 细胞条件不合适,病毒进入细胞但不能复制 容许性细胞:能支持病毒完成正常增殖的细胞 非容许性细胞:构成顿挫感染的细胞

2)缺陷病毒:基因组不完整的病毒体 缺陷病毒+ 辅助病毒 可复制产生完整V体 如 腺病毒伴随病毒(缺陷病毒) 腺病毒(辅助病毒) HDV(缺陷病毒) HBV(辅助病毒)

⑴概念:当两种病毒同时感染同一细胞时, 可发生一种病毒的增殖抑制了另一种病毒增殖的现象。 2、干扰现象interference ⑴概念:当两种病毒同时感染同一细胞时, 可发生一种病毒的增殖抑制了另一种病毒增殖的现象。 ⑵类型: 异种干扰 同种干扰 同型干扰 同株干扰 灭活V对活V的干扰 缺陷病毒干扰:缺陷性干扰颗粒(DIP)

⑶ 意义: 1、机体早期抗病毒的非特异性免疫的重 要主成部分,中止病毒感染,促进宿 主康复; 2、接种病毒活疫苗应避免干扰现象,以 防降低疫苗免疫效果。

⑷ 机制 1)诱导宿主细胞产生干扰素 2)阻止被干扰病毒的吸附 3)改变宿主细胞的代谢

四、理化因素对病毒的影响 灭活:病毒受理化因素作用后,失去感染性。 特点:灭活的病毒保留其有关特性:抗原性、 红细胞吸附、血凝、细胞融合等。 1、物理因素: 1)温度:病毒耐冷不耐热 2)PH值:多数PH 5-9 3)射线和紫外线:

2、化学因素: 1)脂溶剂 2)酚类 3)氧化剂、卤素及其化合物 4)抗生素与中草药

五、病毒的分类 (一)分类原则 1、核酸的性质和结构 2、病毒体形状和大小 3、衣壳对称性和壳粒数目 4、有无包膜 5、对理化因素的敏感性 6、抗原性 7、生物学特性

按核酸类型和结构分为三大类 DNA病毒 RNA病毒 DNA 和RNA 逆转录病毒

(二)亚病毒 1、类病毒( Viroid):植物病毒 很小 (250-400nt) ,杆状 RNA 分子,有二级结构; 无衣壳或包膜 ; 在核内增殖,严格细胞内寄生; 多与植物疾病相关。

2、卫星病毒satellites 多数与植物病毒有关; 分类: ①可编码自身衣壳蛋白的卫星病毒 ②拟病毒:卫星病毒RNA分子(需辅助 病毒才能复制)

3、阮粒 本质:传染性蛋白因子,主要成分是一种 蛋白酶抗性蛋白(PrP) 特性:1) 与已知病毒特征明显不同; 2)不具有病毒结构,未检出核酸; 3)对福尔马林、蛋白酶、加热、电 离辐射、紫外线抵抗力强;

第三节 真 菌 学 一、概述 1、定义:具有细胞壁和典型的细胞核, 不含叶绿素,无根、茎、叶的 真核细胞型微生物。

2、特点: 1)在自然界广泛分布,种类繁多 2)多数对人有益,仅少数导致人类疾病 感染性疾病 中毒性疾病 超敏反应性疾病 真菌与肿瘤

二、真菌的形态与结构 (一)单细胞真菌 酵母菌:孢子,无菌丝 类酵母菌:芽生孢子,假菌丝

(二)多细胞真菌 丝状菌(霉菌):孢子和菌丝

1、菌丝 适宜温/湿度 芽管 孢子 延长呈丝状 菌丝 营养、气生、生殖菌丝 分支交织成团 菌丝体

菌丝分类 无隔菌丝:(整条菌丝是)一个多 核单细胞 有隔菌丝:紧密相连的一串细胞 菌丝多形态:菌种鉴定

2、孢子 1)孢子与芽胞的区别 真菌的繁殖结构,一条菌丝可生成 多个孢子 孢 子 芽 胞 细菌休眠结构,抵御不良环境 作用 真菌繁殖结构 孢 子   芽 胞 细菌休眠结构,抵御不良环境 作用 真菌繁殖结构 不强,加热60~70℃ 短时间即可死亡 强,有的可耐100℃数小时 抵抗力

2)孢子的分类 有性孢子:同一/不同菌体上两细胞融合减数 分裂而成 无性孢子:菌丝上细胞分化生成,不发生细 胞融合。

无性孢子 大分生孢子 分生孢子 小分生孢子 芽生孢子 叶状孢子 厚膜孢子 关节孢子 孢子囊孢子 大多真菌行有性/无性生殖 ,病原性真菌多以无性生殖为主。

大分生孢子的形态 生殖菌丝末端细胞分裂或收缩形成;也可从菌丝侧面出芽形成

假菌丝:芽生孢子与母细胞不脱离而相互连接成链 芽生孢子的形态 通过细胞发芽形成圆形或卵形的孢子 假菌丝:芽生孢子与母细胞不脱离而相互连接成链

厚膜孢子形态 关节孢子形态

孢子囊孢子形态 菌丝末端形成一种囊状结构

三、真菌的繁殖与培养 (一)真菌的繁殖方式:无性繁殖为主 1、芽生 2、裂殖 3、萌管 4、隔殖

抑制成分:放线菌酮 (一)真菌的培养 1、营养要求不高, 常用 沙保弱培养基 基本成分:葡萄糖、蛋白胨、NaCl、琼脂 1、营养要求不高, 常用 沙保弱培养基 基本成分:葡萄糖、蛋白胨、NaCl、琼脂 生长条件:pH4.0~6.0 温度22~28℃(深部真菌 37℃) 较高的湿度、O2 抑制成分:放线菌酮 氯霉素 抑制污染性真菌 抑制污染细菌

(1)酵母型/类酵母型(单细胞真菌菌落形式) 2、菌落类型 (1)酵母型/类酵母型(单细胞真菌菌落形式) 特征:菌落湿润、柔软而致密,形态似一般细菌菌落 酵母菌落型 类酵母菌落类型

(2)丝状菌落(多细胞真菌菌落形式) 特征:菌落呈棉絮状、绒毛状、粉末状(气生菌丝体) 菌落正背面呈现不同颜色(可为鉴定依据) 曲霉菌 青霉菌

四、变异性与抵抗力 (一)变异性 易发生变异:形态、结构、菌落性状、 色素、生理性状等 (二)抵抗力:不强 1、对2%石碳酸、0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感 2、对抗细菌感染的抗生素不敏感; 3、抗真菌药(灰黄霉素、制霉菌素、克霉唑、酮 康唑、伊曲康唑)

病毒、细菌、真菌的区别