维生素类药物的分析

是维持人体正常代谢机能所必需的 微量营养物资。 第一节 概述 维生素： 是维持人体正常代谢机能所必需的 微量营养物资。 人体不能合成维生素。 人体需要从食物中摄取的8种必需氨基酸为:异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸.

一是按发现的历史顺序，以英文字母顺序命名，如维生素A、B、C、D、E等； 维生素(vitamin)是维持机体生命活动过程所必需的一类微量的低分子有机化合物。维生素的种类很多，化学结构各不相同，在生理上既不是构成各种组织的主要原料，也不是体内的能量来源，然而它在能量产生的反应中以及调节机体物质代谢过程中起着十分重要的作用。 一是按发现的历史顺序，以英文字母顺序命名，如维生素A、B、C、D、E等； 二是按其生理功能命名，如抗坏血酸、抗干眼病维生素和抗凝血维生素等； 三是按其化学结构命名，如视黄醇、硫胺素和核黄素等。 抗干眼病维生素即是维生素A，又叫视黄醇。 抗凝血维生素可能是维生素K或E 硫胺素又称维生素B1 ，核黄素又称维生素B2

维生素的特点： 1、维生素或其前体都在天然食物中存在，但是没有一种天然食物含有人体所需的全部维生素。 2、它们在体内不能提供热能，一般也不是机体的组成部分。 3、它们参与维持机体正常生理功能，需要量极少。 4、它们一般不能在体内合成，不能满足机体需要，必须经常由食物供给。

脂溶性 水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺 VitM VitPP VitA、D2、D3、 E、K1 等 （等吸收度法） 水溶性 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺 维生素K分为二大类，一类是脂溶性维生素，即从绿色植物中提取的维生素K1和肠道细菌（如大肠杆菌）合成的维生素K2。另一类是水溶性的维生素，由人工合成即维生素K3和K4。最重要的是维生素K1和K2。 VitM VitPP

脂溶性维生素的功能、缺乏症状和食物来源 维生素 生理功能 缺乏症状 良好食物来源 A 视紫红质合成，上皮，神经，骨骼生长，发育，免疫功能 儿童：暗适应能力下降干眼病，角膜软化 成人：夜盲症，干皮病 动物肝脏，红心甜薯，菠菜，胡萝卜，胡桃蒲公英，南瓜，绿色菜类 D 调节骨代谢 主要调节钙代谢 儿童：佝偻病 成人：骨软化症 在皮肤经紫外线照射合成，海水鱼、肝、蛋黄、鱼肝油 E 抗氧化 婴儿：贫血 儿童和成人：神经病变，肌病 在食物中分布广泛，菜籽油是主要来源 K 通过γ羧基谷氨酸残基激活凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ 儿童：新生儿出血性疾病 成人：凝血障碍 肠道细菌合成，绿叶蔬菜，大豆，动物肝脏 维生素D食物来源 晒太阳、紫外线灯预防性照射，海水鱼（如沙丁鱼）、肝、蛋黄等动物性食品及鱼肝油制剂

水溶性维生素的功能、缺乏症状和食物来源 维生素 生理功能 缺乏症状 良好食物来源 B1 (硫胺素) 参与α-酮酸和2-酮糖氧化脱羧 脚气病，肌肉无力，厌食，心悸，心脏变大，水肿 酵母，猪肉 豆类，葵花籽油 B2 (核黄素) 电子（氢）传递 唇干裂，口角炎，畏光，舌炎，口咽部粘膜充血水肿 动物肝脏，香肠，瘦肉，蘑菇 奶酪，奶油，无脂牛奶，牡蛎 B3 (尼克酸) 癞皮病：腹泻，皮炎，痴呆或精神压抑 金枪鱼，动物肝脏，鸡胸脯肉，牛肉，比目鱼，蘑菇 泛酸 酰基转移反应 缺乏很少见：呕吐，疲乏，手脚麻木、刺痛 在食物中广泛分布，尤其在蛋黄、肝脏、肾脏、酵母含量高 生物素 CO2转移反应羧化反应 缺乏很少见：常由于摄入含大量抗生物素蛋白的生鸡蛋所致,厌食，恶心 消化道微生物合成； 酵母，肝脏，肾脏 B6 (吡哆醇吡哆醛,吡哆胺) 氨基转移反应 脱羧反应 皮炎，舌炎，抽搐 牛排，豆类，土豆，鲑鱼，香蕉 叶酸 一碳单位转移 巨幼红细胞性贫血，腹泻，疲乏，抑郁，抽搐 布鲁氏酵母，菠菜，龙须菜萝卜，大头菜，绿叶菜类，豆类，动物肝脏 B12 (钴胺素) 甲基化高半胱氨酸为蛋氨酸转化甲基丙二酰-CoA为琥珀酰-CoA 巨幼红细胞性贫血，外周神经退化，皮肤过敏，舌炎 肉类，鱼类，贝壳 家禽，奶类 Vc (抗坏血酸) 抗氧化，胶原合成中 羟化酶的辅因子 坏血病，胃口差，疲乏无力，伤口愈合延迟，牙龈出血，毛细血管自发破裂 木瓜，橙汁，甜瓜，草莓 花椰菜，辣椒，柚子汁

第二节 维生素B1 HCl Cl- 氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)

结构与性质 一、 （一） 溶解性 1、易溶于水 2、水溶液呈酸性 （二） UV 共轭双键 λmax = 246nm

（三） 硫色素反应 （四） 碱性 嘧啶环 —— 伯氨 噻唑环 —— 季铵 1、可与酸成盐 2、与生物碱↓→↓ 3、含量测定 —— 非水碱量法

鉴别试验 二、 （一） 硫色素反应 ChP

＋2H 硫色素

（二） 沉淀反应 VitB1 H+ H+ H+ H+

S元素反应 （三） 其他反应 也可用醋酸铅 Cl- 反应

三、 含量测定 （一） 非水溶液滴定法 P208 喹那啶红－亚甲蓝 （紫红→天蓝）

（二） UV法

g/100ml ChP 片剂、注射剂 = 421 A = ECL （每片）相当于标示量的%= 规格 g/片 g

（每ml）相当于标示量的%= 规格 g/ml ml

（三） 硅钨酸重量法 重量法特点 1、 准确度高 灵敏度低 操作繁琐 设备简单

2×337.27 3479.22

测定方法 3、 取本品约50mg，精密称定，加水50ml溶解后，加盐酸2ml，煮沸，立即滴加硅钨酸试液4ml，继续煮沸2分钟，用80℃恒重的垂熔玻璃坩埚滤过，沉淀先用煮沸的盐酸溶液（1→20）20ml分次洗涤，再用水10ml洗涤1次，最后用丙酮洗涤2次，每次5ml，在80℃干燥至恒重，精密称定，所得重量与0.1939相乘，即得

(本品干燥失重项下测定结果为3.73%)

（四） 硫色素荧光法 原理 1、 NaOH

方法与计算 2、 激发波长365nm 发射波长435nm

S + NaOH + 铁氰化钾 + 异丁醇 + NaOH + 异丁醇 对照液 d + NaOH + 铁氰化钾 + 异丁醇 + NaOH + 异丁醇 A 供试液 b

特点 3、 （1）灵敏度高，线性范围宽 （2）代谢产物不干扰，适用于 体液分析

第三节 维生素C L－抗坏血酸

结构与性质 一、 （一） 溶解性 1、易溶于水 2、水溶液呈酸性

（二） 强还原性 二烯醇结构 二烯醇结构 二酮基结构

有活性 有活性 无活性

（三） 具糖的性质 结构与糖类相似 糖类的显色反应 △ 50℃

酸性 （四） 一元酸 C3－OH的 pKa = 4.17 C2－OH的 pKa = 11.57

（五） 光学活性 手性C（C4、C5） * L(+)－抗坏血酸 活性最强 * 天然氨基酸构型为L-型，基准为 ，相当与R/S标记的S型。

（六） 水解反应 与碱反应

（七） UV特征

鉴别试验 二、 与氧化剂的反应 （一）

(ChP2005) 1、与AgNO3反应 (ChP2005) 2、与2，6 - 二氯靛酚反应 氧化型 还原型 玫瑰红色 蓝色 OHˉ 2，6-二氯靛酚（2，6-二氯靛酚吲哚酚钠盐） 玫瑰红色 蓝色 OHˉ

（玫瑰色） （无色）

3、与碱性酒石酸铜反应 USP 4、与KMnO4反应

糖类的反应 （二） USP 或盐酸 吡咯 50℃

（戊糖） (糠醛) 50℃ (吡咯) （蓝色）

UV （三） BP 0.01mol/L HCl

含量测定 三、 碘量法 （一） 原理 1、 指示剂 淀粉指示液

H+

方法 2、 取本品约0.2g，精密称定，加新 沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶 解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴 定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝 色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液 (0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6

讨论 4、 （1）酸性环境 d . HCl 减慢VitC被O2氧化速度 （2）新沸冷H2O 赶走水中O2 （3）立即滴定 减少O2的干扰

（4）附加剂干扰的排除 片剂 —— 滑石粉 —— 过滤 注射剂 —— 抗氧剂 —— 丙酮 甲醛 Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5

O a S 3 + H 2 N 5 C H O 2 H O N C S 3 a

2，6 - 二氯靛酚钠滴定法 （二） USP JP 原理 1、

方法 2、 自身指示终点法 偏磷酸－醋酸试液

讨论 3、 （1）酸性环境 HPO3-HAc 稳定VitC （2）快速滴定 2min内 防止其他还原性物质干扰 （3）剩余比色测定 （定量过量） （测剩余染料）

（4）缺点 不稳定 需经常标定 贮存≤一周 干扰多 氧化力较强

HPLC法 （三） 1、HPLC的优点 灵敏度高 微量分析 选择性高 干扰少 分离分析同步 快速

2、HPLC法分离VitC常用方法及测 定对象 方法 离子交换色谱法 离子对色谱法 分配色谱法（正、反相） 对象 制剂、生物样品、果汁 血、尿、组织、细胞等

例 多种维生素片中VitA、 VitB1、 VitB2 、VitB6 、烟酰胺、VitC、 VitE的含量测定 色谱柱 ODS （梯度洗脱） 抗氧剂 二巯基丙烷磺酸钠 ODS液相色谱柱，就是键合十八烷基的硅胶色谱柱

水溶性维生素 离子对色谱法（樟脑磺酸） 内标法 + 校正因子 内标物——苯酚 脂溶性维生素 外标法

1．在三氯醋酸或盐酸存在下，经 水解、脱羧、失水后，加入吡 咯即产生蓝色产物的药物应是 A. 氯氮卓 B. 维生素A C. 普鲁卡因 D. 盐酸吗啡 E. 维生素C

2. 下列药物的碱性溶液，加入 铁氰化钾后，再加正丁醇， 显蓝色荧光的是 A. 维生素A B. 维生素B1 C. 维生素C D. 维生素D E. 维生素E

3．既具有酸性又具有还原性的 药物是 A. 维生素A B. 咖啡因 C. 苯巴比妥 D. 氯丙嗪 E. 维生素C

4. 维生素C的鉴别反应，常采 用的试剂有 A. 碱性酒石酸铜 B. 硝酸银 C. 碘化铋钾 D. 乙酰丙酮 E. 三氯醋酸和吡咯

5. 测定维生素C注射液的含量 时，在操作过程中要加入 丙酮，这是为了 A. 保持维生素C的稳定 B. 增加维生素C的溶解度 C. 使反应完全 D. 加快反应速度 E. 消除注射液中抗氧剂的干扰

6. 能发生硫色素特征反应的药物是 A. 维生素A B. 维生素B1 C. 维生素C D. 维生素E E. 烟酸

7．使用碘量法测定维生素C的 含量,已知维生素C的分子量 为176.13，每1ml碘滴定液 (0.1mol/L) 相当于维生素C 的量为 A. 17.61mg B. 8.806mg C. 176.1mg D. 88.06mg E. 1.761mg

8. 可发生以下反应或现象的药物为 A.维生素B1 B.维生素C C.两者均能 D.两者均不能 ⅰ.与碘化汞钾生成黄色沉淀 ⅱ.麦芽酚反应 ⅲ.在乙醚中不溶 ⅳ.与2,6-二氯靛酚反应使颜色消失 ⅴ.硫色素反应 A D C B A

碱性 维生素B1 的噻唑环在 介质 中可开环，再与嘧啶环上氨基缩合 环合，然后经 等氧化剂氧 化生成具有荧光的 ，加 荧 光消失，加 荧光又显出；此反应 称为 反应。 铁氰化钾 硫色素 酸 碱 硫色素

维生素C是 元弱酸，具有强 性，易被氧化剂氧化，常用 作其它制剂的 剂。 一 还原 抗氧

中国药典维生素C的含量测定 取本品约0.2g，精密称定，加新 沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶 解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴 定液(0.05mol/L)滴定，至溶液显蓝色， 并在30秒内不褪。每1ml碘滴定液 (0.05mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6。 已知：取样量为0.2084g，消耗碘滴 定液（0.09981mol/L）22.75ml。

要求：（1）解释划线部分 （2）计算本品的含量是否符合 规定 （规定本品含C6H8O6应不低于99.0%）

VitB1片UV法含量测定 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于VitB1 25mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)约70ml，振摇15分钟，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度。用干 燥滤纸滤过，精密量取续滤液5.0ml，置 另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液 (9→1000)稀释至刻度，摇匀，在246nm 处测定吸收度，按C12H17ClN4OS·HCl的 吸收系数（ ）为421计算，即得。

已知 20片重 = 1.4070g A246=0.461 取样量 = 0.1551g 规格 = 10mg/片 求 本品含量是否符合药典规定？ （应相当于标示量的90.0～110.0%)