细菌感染的检查方法与防治原则 内 容 细菌学检查方法 抗生素治疗 人工免疫预防
一、细菌学检查方法 (一)标本采集与送检原则 标本采集时应注意无菌操作,避免杂菌污染; 根据致病菌在不同病期的体内分布和排出部位,采取不同标本; 应在使用抗菌药物前采集标本,否则在培养时应加入拮抗剂; 尽可能采集病变明显部位的材料; 标本必须新鲜,采集后尽快送检; 送检过程中要采取适当的保存方式。
(二)细菌学检查流程 致病菌的检验程序 标本 生化试验 血清学试验 动物试验 药敏试验 直接涂片检查 分离培养 分子生物学技术 (核酸杂交、PCR) 其它 (HPLC)
分离培养 生化试验
血清学诊断 人体受致病菌感染后,其免疫系统被刺激后发生免疫应答而产生特异性抗体。抗体的量常随感染过程而增多,表现为效价(滴度)的升高。因此,用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异抗体和其效价的动态变化,可作为某些传染病的辅助诊断。一般采取病人的血清进行试验,故称为血清学诊断(serological diagnosis)。
血清学诊断试验最好取患者急性期和恢复期双份血清标本,当后者的抗体效价比前者升高大于等于4倍时方有意义。 常用方法:直接凝集试验、乳胶 凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、中和试验、ELISA。
动物实验 小鼠腹腔接种 家兔耳静脉接种
乳鼠脑内接种 乳鼠腹腔接种
对照小鼠 肉毒毒素中毒 死亡小鼠
药敏试验 分子生物学技术 其它(HPLC)
三、人工免疫预防治疗 (一)人工主动免疫(artificial active immunity):将疫苗(vaccine)或类毒素接种于人体,使机体产生获得性免疫力的一种防治微生物感染的措施,主要用于预防。
疫苗种类 死疫苗:选用免疫原性强的细菌,经人工大量培养后,用理化方法杀死而成。 活疫苗:用减毒或无毒力的活病原体制成。 类毒素:细菌外毒素经0.3%-0.4%甲醛液作用3-4周后,毒性消失但仍保持免疫原性。 亚单位疫苗:根据细菌抗原分析,查明不同致病菌的主要保护性免疫原存在的组分,然后将之制成的疫苗。
DNA重组疫苗:通过DNA重组技术制备所需的疫苗。
(二)人工被动免疫 人工被动免疫(artificial passtive immunity):注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白,或细胞因子等免疫制剂,使机体即刻获得特异性免疫,因而作用及时。但这些免疫物质不是病人自己产生的,故维持时间短。主要用于治疗或紧急预防。
抗毒素 抗菌血清 胎盘球蛋白、丙种球蛋白 细胞免疫制剂
(三)主动免疫与被动免疫的比较 抗原 慢,2-4周 预防 区别要点 人工主动免疫 人工被动免疫 免疫物质 免疫出现时间 快,立即 抗体或细胞因子等 免疫出现时间 慢,2-4周 快,立即 免疫维持时间 长,数月-数年 短,2-3周 主要用途 预防 治疗或紧急预防
第六节 病毒感染的检查方法 一、标本的采集 采集原则 二 、病毒的分离与鉴定 1. 动物接种 2 .鸡胚培养 3 .组织培养 (1)原代细胞 第六节 病毒感染的检查方法 一、标本的采集 采集原则 二 、病毒的分离与鉴定 1. 动物接种 2 .鸡胚培养 3 .组织培养 (1)原代细胞 (2)二倍体细胞 (3)传代细胞
4 . 病毒在培养细胞中增殖的指标 (1)细胞变化:细胞病变效应(CPE) (2)红细胞吸附 (3)细胞代谢改变 (4)干扰现象 5 .病毒的数量与感染性测定 (1)蚀斑测定 (2) ID50或TCID50 测定
三、 病毒感染的血清学诊断 中和试验 补体结合试验 血凝抑制试验 凝胶免疫扩散试验 四 、病毒感染的快速诊断 1.形态学检查 2.检查病毒抗原抗体 3.检查病毒核酸
第三节 真菌的微生物学检查法 标本 直接镜检:标本(皮屑、毛发)+10% KOH 分离培养 浅部感染真菌取毛发等标本 第三节 真菌的微生物学检查法 标本 浅部感染真菌取毛发等标本 深部感染真菌取痰、血液、脑脊液等 直接镜检:标本(皮屑、毛发)+10% KOH 假丝酵母菌--取材涂片,革兰染色 隐球菌--脑脊液离心,沉淀涂片,墨汁负染 结果判断:①阴性不能排除感染。 ②组织中分隔分枝的菌丝为曲霉; 粗大、不分隔或不分枝的菌丝为毛霉。③皮肤癣菌菌丝肥大粗长为处于活跃状态。④酵母型和二相型真菌在组织内常为孢子。 分离培养
①菌落类型 丝状型或酵母型; ②菌落大小 病原性真菌菌落小, 而条件致病性真菌菌落大; ③菌落颜色 病原性真菌颜色淡, 污染真菌颜色深; ④致病性真菌菌落下沉,有时使培养基开裂;污染性真菌菌落不下沉,很少引起开裂。
新生隐球菌脑脊液涂片
第四节 真菌感染的防治原则 卫生、干燥、消毒(福尔马林) 避免直接或间接与患者接触 第四节 真菌感染的防治原则 卫生、干燥、消毒(福尔马林) 避免直接或间接与患者接触 局部感染治疗:5%硫磺软膏、咪康唑霜、克霉唑软膏或0.5%碘伏 系统感染治疗:二性霉素B、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑