果蝇杂交实验

一、实验目的 二、实验材料 三、实验器具和药品 四、实验内容 （一）果蝇形态的观察 （二）果蝇的饲养 （三）果蝇的杂交

五、实验数据的统计及分析 六、实验报告 七、注意事项

一、实验目的 2017/3/21

学会杂交实验设计的方法 理解遗传的三大定律 学会运用统计学和遗传学的理论分析实验现象 初步学会论文的撰写方法 学会杂交实验设计的方法 理解遗传的三大定律 学会运用统计学和遗传学的理论分析实验现象 初步学会论文的撰写方法 2017/3/21

二、实验材料 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)品系 18＃、6＃、e#、2 # 2017/3/21

三、实验器具和药品 显微镜、培养瓶、棉塞、量筒 麦片、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等 三、实验器具和药品 显微镜、培养瓶、棉塞、量筒 麦片、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等 2017/3/21

四、实验内容 2017/3/21

（一）果蝇的形态观察 2017/3/21

1、果蝇雌雄的区别 雄： 腹部狭长，末端浑圆 腹背有5条横纹，粗细不一致，末端2－3条横纹“连成一片”，呈现“黑屁股”一样； 前足附节端表面有黑色“性梳”，在显微镜下呈黑梳子； 雌： 腹部宽大，末端突尖，腹背有7条横纹，色淡，粗细一致，前足附趾无性梳； 雌蝇体内有一储精囊，一次受精，终身够用，所以杂交时必须选择处女蝇 2017/3/21

2、其他性状的观察 眼色：白眼与红眼； 翅形：长翅（正常翅）、短（小）翅、残翅； 体色：黑檀体、灰身； 刚毛：直刚毛、焦刚毛； 2、其他性状的观察 眼色：白眼与红眼； 翅形：长翅（正常翅）、短（小）翅、残翅； 体色：黑檀体、灰身； 刚毛：直刚毛、焦刚毛； 2017/3/21

果蝇几种品系的性状 品系 体色 眼色 翅形 雌 雄 2＃ 6＃ e# 18＃

3、其他 卵：圆形，前端有两条触须突起，通常附在瓶壁上； 幼虫：蛆状，奶白色，前端尖，后端钝，头部收缩迅速； 蛹：黄色 3、其他 卵：圆形，前端有两条触须突起，通常附在瓶壁上； 幼虫：蛆状，奶白色，前端尖，后端钝，头部收缩迅速； 蛹：黄色 2017/3/21

（二）果蝇的饲养 2017/3/21

1、果蝇的生活史和生活习性 2017/3/21

羽化后的成虫一般要经过至少12小时才能交配，此时的成虫又称为处女蝇； 温度越低，生活周期越长，25℃平均10－12天一个世代；但超过30℃ 易出现变异； 生活习性：果蝇是以水果上的酵母为食，所以实验室内凡能发酵的基质都可作为果蝇的饲料。 2017/3/21

2、培养基的配制（以100ml量为例） 70ml水 + 0.85g琼脂 + 7g蔗糖 煮开至琼脂溶化 煮开约3分钟

稍凉后加入1g酵母粉，0.4-0.5ml丙酸，混匀 分装,乘热塞上棉花塞。

3、果蝇的麻醉（示范） 注意： 不可在培养瓶内麻醉； 如果进行形态观察可进行深度麻醉至死——腹部向前弯；双翅向背后与胸部成45° 如果进行杂交，一般成自然停飞状态为宜； 2017/3/21

4、转瓶（示范）

5、处死

6、取处女蝇 在培养瓶中出现第一个蛹后，除去所有的成虫，每隔9h观察一次，此时出现的雌蝇还未能进行交配，分离出来后即为处女蝇。

（三）果蝇杂交的流程 2017/3/21

以 6＃♀ × 2#♂为正交 2017/3/21

每一培养瓶要贴标签，注明（杂交）品系，时间，班别，姓名 取原种（纯种） 每一培养瓶要贴标签，注明（杂交）品系，时间，班别，姓名 6＃5－6对 于一培养瓶 2#5－6对 于另一培养瓶 7－8天后，出现第 一个蛹时除去原种 7－8天后，出现第 一个蛹时除去原种

杂交之前，反复检查雌内是否混有雄蝇，或雄蝇内是否混有雌蝇！ 若混有雌蝇，除去后，雄蝇仍可用 超过9h的雌蝇坚决不能用于杂交, 若混有一只雄蝇，所有雌蝇都无用！ 每隔9h取一 次处女蝇， 共6－7对于一 培养瓶中 取6－7对雄蝇 于一培养瓶中 杂交之前，反复检查雌内是否混有雄蝇，或雄蝇内是否混有雌蝇！ 用同样方法做反交实验 6＃♀与2#♂放 入一培养瓶内 杂交

出现第一个蛹后，除去亲本，之后 出现的成虫即为F1代； 若想增加F1的数量，可将亲本进行 转瓶一次；

统计F1的 性状 取F16-7对于一培养 瓶内做自交实验 统计F2的性状 7－8天后除去F1，或转一次瓶 数量为400只以上 统计天数为7－8天 列表统计F1的性别、体色、翅形、眼色及是否有异常，数量：250－300只 统计F1的 性状 取F16-7对于一培养 瓶内做自交实验 为什么自交不需要处女蝇？ 7－8天后除去F1，或转一次瓶 数量为400只以上 F1自交可做2瓶 统计F2的性状

五、实验数据的统计及分析

将原始数据(眼色、翅形、体色、性别）列表归纳统计； 用统计学原理和遗传学原理对数据进行分析、假设和判断； 将原始数据(眼色、翅形、体色、性别）列表归纳统计； 用统计学原理和遗传学原理对数据进行分析、假设和判断；

2＃（红眼、残翅）× 6＃（白眼、小翅） 分析要点： 显隐性的判断； 常染色体遗传和性染色体遗传的判断； 是否连锁的判断； 2＃（红眼、残翅）× 6＃（白眼、小翅） 分析要点： 显隐性的判断； 常染色体遗传和性染色体遗传的判断； 是否连锁的判断； 若是连锁则要计算它们之间的交换率； 若是非连锁则要计算它们之间的组合比例； 分析时从一对性状 两对性状 三对性状；

实验结果（模拟） 2＃♂×6 ＃♀（正交） 2＃♀ ×6＃♂反交） F1 ♀: 红长82 ♀ 红长 111 ♂：白小98 ♂ 红长 75 ♂：白小98 ♂ 红长 75 F2 ♀:红长62 ♂：红长52 ♀：红长165 ♂：红长38 红小57 红小55 红残47 红小37 红残37 红残50 红残24 白长35 白长53 白长32 白小49 白小48 白小36 白残37 白残31 白残28

e＃（红眼黑檀体长翅）× 6＃（白眼灰身小翅） 分析要点： 显隐性的判断； 常染色体遗传和性染色体遗传的判断； 是否连锁的判断； 若是连锁则要计算它们之间的交换率； 若是非连锁则要计算它们之间的组合比例； 分析时从一对性状 两对性状 三对性状；

实验结果（模拟） e＃ ♀ ×6＃♂（正交） e＃ ♂ ×6＃ ♀(反交） F1 红长灰♀：116 ♀ ：红长灰108 ♂：112 ♂：白小灰121 F2 ♀红长灰108 ♂47 ♀:红长灰70 ♂：74 红长黑 35 4 红长黑6 0 红小灰 0 26 红小灰18 6 红小黑 0 7 红小黑16 22 白长灰 0 18 白长灰13 14 白长黑 0 6 白长黑11 12 白小灰 0 57 白小灰83 85 白小黑 0 5 白小黑0 0

七、实验报告

封面：果蝇杂交实验 实验人： 实验时间： 实验地点：

前言：主要讲述实验的原理和目的； 1、实验材料及方法 1.1、实验材料：品系及性状 1.2、实验用品 1.3、培养基的配置 1.4、实验流程

2、实验结果及分析 2.1、一对性状的结果及分析 2.2、两对性状的结果及分析 2.3、三对性状的结果及分析 3、结论与讨论 4、体会与建议 2、实验结果及分析 2.1、一对性状的结果及分析 2.2、两对性状的结果及分析 2.3、三对性状的结果及分析 3、结论与讨论 4、体会与建议

七、注意事项： 准备记录本做好每日的工作记录； 检查实验流程之后方可开始实验； 实验之前做好所有的准备工作； 培养基按比例用多少配多少，不能浪费； 取处女蝇时，出现幼虫后天天观察是否有蛹出现； 你是否明白以下问题：

1、取原种放入新的培养瓶中继续培养的目的 是什么？ 2、什么时候除去原种？ 3、怎样保证所取的雌蝇为处女蝇？ 4、怎样进行正交和反交？ 5、怎样扩充子代数量？