第十二章:喹啉与青蒿类抗疟药物的分析 The analysis of antimalarial drugs

治疗疟疾的药物称为抗疟药，会依疟疾的种类及严重程度选用不同的药物。 抗疟疾最著名的药物是奎宁。口服和肌肉注射都有效。 1969年－1972年间，屠呦呦领导的523课题组发现并从黄花蒿中提取了青蒿素，是由菊科植物黄花蒿所提炼出来的倍半萜内酯化合物，是治疗恶性疟原虫所引发的疟疾的特效药。 非重症的疟疾可以用口服药物治疗，最有效的疗法是青蒿素配合其他抗疟药一起服用（称为青蒿素联合疗法，简称ACT），可以减轻对单一药物的抗药性。其他的抗疟药包括阿莫地喹、本芴醇、甲氟喹（mefloquine）或磺胺多辛/乙胺嘧啶。另一建议的联合疗法是双氢青蒿素和喹哌。若用在非重症疟疾，青蒿素联合疗法有效的比率约有90%。若是治疗孕妇的疟疾，世界卫生组织建议在怀孕初期（前三个月）用奎宁和克林霉素，在中后期则用青蒿素联合疗法在2000年左右，在东南亚已经出现对青蒿素有抗药性的疟疾。

第一节:喹啉类药物结构特征 苯 环 稠和 而成 吡 啶 喹啉类药物 典型 药物

典型 药物

典型 药物

典型 药物

典型 药物

典型 药物 磷酸咯萘啶

典型 药物

吡啶与苯环具有共轭结构,也有紫外吸收光谱特性 主要 性质 碱性 含有N原子,一般都有碱性 旋光性 含有手性原子,一般都有旋光性 荧光特性 具有平面共轭结构,一般具有荧光 紫外吸收光谱特性 吡啶与苯环具有共轭结构,也有紫外吸收光谱特性

（二）主要化学性质 1、具有碱性 脂环氮，碱性强，可以与硫酸成盐 奎宁、奎尼丁：二元酸－硫酸（喹核碱含脂环氮，碱性强） 奎宁 (左旋体)：pKb1为5.2 pKb2为9.8，饱和水溶液pH为8.8，易溶于氯仿－无水乙醇(2:1) 奎尼丁 (右旋体)：pKb1为5.4 pKb2为10，易溶于沸水或乙醇 芳环氮，碱性较弱，不能与硫酸成盐 2

2、旋光性 差别：喹核碱部分立体结构不同 ◆硫酸奎宁为左旋体：-237°～ -244° ◆硫酸奎尼丁为右旋体： +275°～ +290° ◆二盐酸奎宁为左旋体： -223°～ -229° ◆磷酸哌奎、磷酸咯奈啶无手性

3、荧光特性： 硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光 4、紫外吸收光谱特征

二、鉴别反应Identification （一）、绿奎宁反应（Thalleioquin） ——奎宁的鉴别 取其水溶液加溴试液2～3滴和氨试液1ml，即显翠绿色； 加酸至中性显蓝色； 酸性则呈紫红色； 翠绿色可转溶于醇、氯仿中不溶于醚。 二醌基亚胺的胺盐

二、Identification （二）、光谱特征 UV－磷酸氯喹：取本品，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含10μg的溶液，照分光光度法(附录Ⅳ A)测定，在 222nm、257、329与343nm的波长处有最大吸收。 FLD－硫酸奎宁：取本品约20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即显蓝色荧光。 IR 红外光谱也可以应用于鉴别

二、Identification 基于无机酸盐的鉴别 硫酸盐 加BaCl2生成白色沉淀 不溶于盐酸和稀硝酸 加醋酸铅生成白色沉淀 溶于醋酸铵或NaOH 加HCl不产生沉淀

二、Identification 基于无机酸盐的鉴别 加稀硝酸和硝酸银生成白色凝乳状沉淀 氯化物 加铵试液溶解,加硝酸再沉淀 加二氧化锰产生氯气使KI试纸遇淀粉变蓝

二、Identification 基于无机酸盐的鉴别 磷酸盐反应 加硝酸银生成浅黄色沉淀 在铵试液或稀硝酸中均易溶解 加氯化铵镁生成白色结晶性沉淀 加钼酸铵试液与硝酸后,加热生成黄色沉淀

三、Detection of specific impurities 硫酸奎宁 1.酸度－酸性杂质 取本品0.2g，加水20ml溶解后，测定pH值应为5.7～6.6 。 2.氯仿－乙醇不溶物 取本品2g，加氯仿－无水乙醇 (2:1) 的混合液15ml，在50℃加热10min后，用称定重量的垂熔坩埚滤过，滤渣用上述混合液分5 次洗涤，每次10ml ，在105 ℃干燥至恒重，遗留残渣不得过2mg。 3.其他金鸡纳碱 (TLC-ChP、HPLC-BP)

三、Detection of specific impurities 磷酸咯萘啶的纯度检查 1.酸度取本品1.0g，加水25ml溶解，测定pH值应大于2.4。 2.水中不溶物加水溶解，过滤干燥，残渣不得超过4mg（注射用）7mg（口服用）. 3.氯化物氯化物检查法（标准氯化钠溶液3.0ml对照液比较） 4. 甲醛品红亚硫酸试液显色，与1.0ml新制甲醛溶液比对，不得更深 5.四氢吡啶亚硝基铁氰化钠乙醛溶液不得显蓝紫色

四 含量测定 硫酸奎宁含量测定 非水溶液滴定法 CHP USP HPLC法 注意样品处理 体内测定 甲磺酸的作用? 醋酸的作用? 四 含量测定 硫酸奎宁含量测定 非水溶液滴定法 CHP 甲磺酸的作用? USP HPLC法 醋酸的作用? 乙二胺的作用? 注意样品处理 体内测定

含量测定 硫酸奎宁测定 3 H+

每lml的高氯酸滴定液(0.lmol/L)相当于24.90mg的(C20H24N2O2)2·H2SO4）。 （QH+）2·SO42-+3HCLO4→QH22+·HSO4-·CLO4- ＋QH22+·2CLO4- 1摩尔的硫酸奎宁可消耗3摩尔的高氯酸。 每lml的高氯酸滴定液(0.lmol/L)相当于24.90mg的(C20H24N2O2)2·H2SO4）。

硫酸奎宁片的含量测定 考虑到片剂中共存物的干扰（也需消耗高氯酸滴定液）， 把硫酸奎宁片粉经强碱溶液碱化，生成奎宁游离碱，用氯仿提取后，再与高氯酸反应: (QH+)2·SO42+ + 2NaOH → 2Q + Na2SO4 + 2H2O 2Q + 4HCLO4 →2[(QH22+)·(CLO4-)2] 因此，1摩尔的硫酸奎宁可消耗4摩尔的高氯酸。

USP硫酸奎宁片的含量测定 HPLC 色谱条件与系统适用性实验：ODS（300*3.9）；水-乙腈-甲磺酸溶液-二乙胺溶液；235nm，R大于1.2 测定法：外标法以峰面积计

五、HPLC测定人体血液中的氯喹 色谱条件： 样品采集： 方法学考察

第二节:青蒿素(artemisinin)类药物的分析 青蒿素又名黄蒿素,是我国从菊花科植物黄花蒿(Artemisia annua Linn )中提取分离得到的一个含过氧基团的新型倍半萜内酯

研究历史:资料来源于baidu 2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药———青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。

青蒿素类药物结构与性质

青蒿素类药物结构与性质

青蒿素类药物结构与性质

青蒿素类药物结构与性质

环状结构虽然不具有共轭特性,但取代基具有一定吸收特性 青蒿素类药物化学性质 氧化性 过氧桥键具有氧化性 旋光性 手性原子,具有旋光性 紫外吸收特性 环状结构虽然不具有共轭特性,但取代基具有一定吸收特性

酸性条件下能将碘离子氧化成碘与淀粉指示液显蓝紫色 青蒿素类药物的鉴别试验 呈色反应 过氧桥键具有氧化性 酸性条件下能将碘离子氧化成碘与淀粉指示液显蓝紫色

含内酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯类化合物在碱性条件下与羟胺反应生成羟肟酸。在稀酸溶液中与高铁离子呈色 青蒿素类药物的鉴别试验 羟肟酸铁反应 含内酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯类化合物在碱性条件下与羟胺反应生成羟肟酸。在稀酸溶液中与高铁离子呈色 显紫色

使分子中的羧基脱水，增加双键位移，分子缩合反应生成其轭系统，在酸作用下形成阳碳离子盐而显色 青蒿素类药物的鉴别试验 香草醛-硫酸反应 使分子中的羧基脱水，增加双键位移，分子缩合反应生成其轭系统，在酸作用下形成阳碳离子盐而显色

青蒿素类药物的鉴别试验 吸收光谱特征 红外，与标准谱图对照 紫外，取代基末端吸收以资鉴别

青蒿素类药物的鉴别试验 色谱法 HPLC法 保留时间定性

青蒿素类药物的鉴别试验 纯度检查 HPLC法 TLC法

青蒿素类药物的含量测定 HPLC法

青蒿素类药物的体内药物分析 HPLC/MS/MS 注意样品处理