乙肝病毒前S1蛋白在乙型肝 炎临床诊断中的意义和应用

病 毒 性 肝 炎 的 主 要 特 性 如 下 分 型 项 目 甲型 乙型 丙型 丁型 戊型 分 型 项 目 甲型 乙型 丙型 丁型 戊型 病 原 27 nm 42 nm 30-60 nm 36 nm 27-38 nm RNA病毒 DNA病毒 RNA病毒 RNA病毒 RNA病毒 主要传播途径 粪→口 血液、母婴 血 液 血 液 粪→口 流 行 性 散发或流行 散 发 散 发 散 发 流行或散发 潜 伏 期 30 天 90 天 5 周 4－20 周 36 天 （15－50） （ 45－160） （ 2－26 ） （ 15－75 ） 起 病 急性较多 多 缓 慢 多 缓 慢 多 缓 慢 急性较多 慢 性 肝炎 或 无 有 有 有 无 慢性病毒携带 血清病毒性肝炎 标 志 物 检 测 EIA EIA EIA EIA EIA、IEM 以及基因检测 RT-PCR PCR RT-PCR RT-PCR

在我国建立简便、灵敏、重复性好的检测 乙型肝炎病毒试剂盒是及其重要的。 我国为病毒性肝炎的高发区，特别是乙型 肝炎，我国人群乙型肝炎病毒的感染率达 45- 85%，HBsAg携带者有1.2亿以上，10% 以上转为 慢性肝炎，部分演变为肝硬变，进而引发肝癌。

前S1蛋白分子生物学特性

1、乙肝病毒(HBV)基因结构 HBV为嗜肝DNA病毒，由一个不完 全双链 DNA 组成，约 3200 个氨基酸； 长链L(-)含4个开放读码框架（OFR)，为病 毒蛋白的编码区：S 区、C 区、P 区、X 区； 短链S(+)相当于长链的50—100%。其不固 定端可被内源性DNA多聚酶延长，使病毒成为完 整的双链。

外膜 核壳 负链DNA 正链DNA DNA 多聚酶 乙型肝炎病毒（HBV） 图 解

HBV 基因组：编码 HBV 抗原的基因 DNA polymerase P gene HBsAg S gene preS2 preS1 HBcAg HBeAg C gene Pre C HBxAg X gene X gene HBV 基因组：编码　HBV 抗原的基因

编码不同形式表面抗原（HBsAg) 的 HBV 基因区域 “major”or”small” HBsAg 226 aa s 226 aa 55 aa 281 aa”middle” HBsAg s preS2 226 aa 55 aa 108 aa 389 aa”large” HBsAg s preS2 preS1 编码不同形式表面抗原（HBsAg) 的 HBV 基因区域

乙 型 肝 炎 病 毒 血 清 学 检 测 的 临 床 意 义 缩 略 语 临 床 意 义 HBsAg 乙 肝 五 项 抗HBs HBeAg 检测名称 HBV感染，高滴度的 HBsAg 常表示病毒的高复制 水平，低滴度则表示病毒低复制或不复制。 HBsAg 抗HBs 乙型肝炎的保护性抗体。当HBV感染趋向恢复时， 抗 HBs 开始产生并逐渐增多。 HBeAg 临床上病毒复制的指标。HBeAg与ALT结合， 用于病期和病情判断。 抗HBe 通常表示病毒复制减弱和肝病渐趋恢复。前c/A83变异， HBeAg不表达，抗HBe(+)，病毒持续复制，肝病转慢。 抗HBc HBV现症或既往感染标志。流行病学研究的指标。 乙 肝 五 项 （HBV －M ) 缩 略 语 临 床 意 义

复制和传染性。Pres1抗原的转阴是病毒清 乙肝IgM 核心抗体 检测名称 缩 略 语 临 床 意 义 抗 HBcIgM HBV的急性感染和重新活动的慢性 感染标志。 前S1蛋白 Pres1 抗原 HBV感染的最早期出现，提示HBV的感染， 复制和传染性。Pres1抗原的转阴是病毒清 除最早迹象，如持续阳性提示肝病转慢。 抗体 急性HBV感染最早出现的抗体。它即反 应了病毒的清除又反应了病变的活动。 动物试验表明抗前S1有抗病毒的作用。 乙 型 肝 炎 病 毒 血 清 学 检 测 的 临 床 意 义

S 基 因 变 异 状 况 1. 前 S1 变异株以前 S1 蛋白 C 端 AA 183 缺失突变较多见，这种 突变因影响 HBsAg 正常分泌，并使 L 蛋白发生蓄积而引起肝 细胞病变和肝细胞对炎性因子的损伤更敏感。 2. 前 S1 基因起病密码下游 230 位核苷酸（nt 230）可因突变形成 终止密码并影响前 S2 起始密码，可使 HBV 逃避干扰素治疗和 宿主免疫清除。 3. S基因变异是疫苗免疫失败的重要原因： ① HBsAg aa 145 变异株。 ② HBsAg aa 126，129，132，133，134等变异株。 ③ 理想的疫苗应能诱导覆盖野毒株和变异株保护性免疫。 4. S 基因变异导致形成 HBsAg / 抗 HBs 双阳性（aa 126，130，145） 5. S 基因变异导致形成 HBsAg 阴性，抗 HBs 阳性，HBV-DNA 持续 阳性的慢性乙型肝炎的重要原因（aa 126，131，145）

乙肝病毒前S1的研究表明：前 S1蛋白及其抗体与HBV-DNA、HBeAg、肝 脏损害、乙肝的转归、乙肝疫苗有效成分等都 有极其密切的关系。 乙肝病毒前S1蛋白及其抗体可 作为乙肝病毒感染、复制和乙肝病人的诊断、 治疗和预后的新标志和新检测系统。

不同形式的血清学 HBV 标记物和它们的解释 HBsAg anti- anti-HBc HBeAg anti- HBV/ preS1 preS1 HBs IgM tot HBe DNA 抗原 抗体 ＋　 　－　 ＋＋　 ＋　 －　 ＋ ＋ ＋／－ ＋ 　　－　 ＋＋ － ＋/－　 ＋ ＋ ＋／－ ＋ 　　－　 ＋＋　 － 　＋/－ － － ＋／－ ＋ 　　－ －＋ 　 － ＋/－ － － － －　 －　 ＋＋ － 　 －　 － － － 　 －　　 ＋　 －＋ －　 ＋ / － － － － 　 － 　 ＋ －－ 　 －　 － 　－ － － 病 毒 活 动 （ 主 要 为 野 生 型 ） 病 毒 活 动（主要为 前核负链变异型） 正 在 消 退 的 急 性 肝 炎 健 康 携 带 者 “核 心 窗 口 ” 期 自 然 感 染 后 的 免 疫 疫 苗 接 种 后 的 免 疫 不同形式的血清学 HBV 标记物和它们的解释 意　　义

前S1、HBV免疫检测结果 合 计 HBV标志 + 前S1 (＋) 例数 例 数 阳 性 率 ( % ) 阳 性 率 ( % ) HBsAg (＋) HBeAg (＋) 抗HBc (＋) 107 94 87.9 HBsAg (＋) 抗HBe (＋) 抗HBc (＋) 119 68 57.1 HBsAg (＋) HBeAg (＋) 21 16 76.2 HBsAg (＋) 抗HBc (＋) 37 11 29.7 HBsAg (＋) HBeAg (＋) 抗HBe (＋) 4 1 25.0 HBsAg (＋) 抗HBe (＋) 13 0.77 HBsAg (＋) 抗HBs (＋) 抗HBe (＋) 抗HBc (＋) HBsAg (＋) 抗HBs (＋) 19 HBsAg (＋) 抗HBs (＋) 抗HBe (＋) 2 HBsAg (＋) 合　计 330 191 57.9

HBV 携带者血清病毒学标志物的转换曲线 HBV-DNA 年 0 10 20 30 感 染 PreS1抗体(IgG) 抗HBs HBsAg PreS1抗体(IgM) PreS1抗原 抗HBc(IgG) 抗HBe HBeAg 年 0 10 20 30 HBV 携带者血清病毒学标志物的转换曲线

n 前S1蛋白与 HBV-M 和 HBV-DNA 测定结果 PreS1 HBV-DNA （＋） 阳性率 HBV-M HBsAg, HBeAg, 抗 HBc HBsAg, 抗HBe, 抗 HBc HBsAg, 抗 HBc 抗HBs, 抗HBe，抗HBc 抗HBs， 抗 HBc 抗 HBc HBsAg, 抗 HBs 387 347 89 351 91 236 76 32 82 35 108 23 21 29 27 21 0 0 0 0 30 0 0 0 0 36 0 0 1 2.7 4 0 0 0 0

急性乙肝不同病期的免疫标志动态 25 22 病 日 例数 前S1抗原(＋) 抗前S1抗体(＋) HBsAg(＋) HBeAg(＋) 抗HBs 病　日 例数 前S1抗原(＋) 抗前S1抗体(＋) HBsAg(＋) HBeAg(＋) 抗HBs 入院日　　 25 22 23 18 入院后一月 17 14 入院后二月 8 13 5 入院后三月 21 2 12 4 1 15

急性乙型肝炎前S1抗体动态变化

不同类型 HBV 感染的前S蛋白及其抗体的检出率 ％ HBV （杂交） 前S1蛋白 前S2 蛋白 前S1抗体 前S2抗体 急性乙型肝炎 极期 恢复6月内 恢复0.5-2年 趋向慢性 暴发性乙型肝炎 慢性无症状携带 HBeAg(+) 抗HBe(+) 慢性乙型肝炎 95 97 92 87 82 0 0 26 98 95 0 0 0 0 30 95 90 65 0 12 22 30 67 5 28 82 99 97 0 0 3 12 40 0 0 71 85 92 81 68 13 53 70 65 80 * 据骆抗先文献综合

结 语

乙型肝炎病毒前Ｓ1抗原研究进展 国内外对前Ｓ蛋白/抗前Ｓ蛋白临床意义的基本共识 一· 前Ｓ蛋白 一·　前Ｓ蛋白 　１．前Ｓ1病毒蛋白出现在急性 HBV 感染的最早期，是病毒 　　　清除的最早迹象。　 　２．前 Ｓ1 病毒蛋白持续存在者将发展至慢性肝炎。 　３．前Ｓ1 病毒蛋白与HBV-DNA, HBeAg 高度相关。与肝内 　　　HBV-DNA, HBcAg 检出高度相关。 　４．在抗　HBe(+)　的　HBV　感染者中，检出前Ｓ1蛋白 　　　可表明病毒的复制。

５．病毒附着于肝细胞膜上，最重要的介导部位是前Ｓ1 蛋白的 氨基酸 (AA) 21-47片段。变异的病毒只要这 一区段完好就有传染性。仅仅是对 (AA) 21-47 肽的 前Ｓ1抗体才能中和病毒。 ６．前 S1 蛋白颗粒表面具有高度的免疫原性，常作为 乙肝疫苗的主要成分。 ⒎ 前 S1 抗原主要存在于血清中完整 HBV 表面。

二．抗前Ｓ蛋白 1. HBsAg 消失后才转换为抗 HBs ，而 前Ｓ抗体常与 其抗原同时存在。 　 前Ｓ抗体同时反映病变的活动和对病毒的清除。 　　1. HBsAg 消失后才转换为抗 HBs ，而 前Ｓ抗体常与 其抗原同时存在。 　　2. 前Ｓ抗体通过对感染细胞的破坏而清除病毒，因而 　　　 同时参与病变活动性和免疫清除机制。抗 HBs则通 过中和作用预防病毒再感染。 　　3. 早期出现抗前Ｓ，可能是病毒将清除，感染将结束 　　　 的最早标志物。即使在暴发性肝炎，出现抗前Ｓ也 　　　 可能预示垂危中的生机。 　　4. 猩猩试验表明，抗前Ｓ有对抗 HBV 的保护作用。

PreS1抗原试剂盒的临床应用 1. 对拟查“二对半”的患者，同时加查PreS1， 可起到确诊与补充的作用，如感染与复制、 急性与慢性、预后与疗效等； 2. 非肝炎住院病人常规检测，PreS1 比“二对 半” 更有意义； 3. 献血员筛查，检测前S1可减少乙肝病毒感染 者漏检； 4. 创伤性检查病员应检测PreS1，如内窥镜检 查、 牙科手术等。