—————————— Soochow University 生理学实验 实验七 家兔减压神经放电 实验七 家兔减压神经放电.

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—————————— Soochow University 生理学实验 实验七 家兔减压神经放电 实验七 家兔减压神经放电

内 容 1 实验目的 2 实验步骤 3 注意事项 本次实验内容包括实验目的、实验步骤、注意事项、实验结果和实验讨论。 4 实验结果 5 讨论

实验目的 学习引导减压神经放电的电生理学实验方法, 了解减压神经放电的特征, 理解其减压神经放电与动脉血压之间的关系。 我们从已学习过的理论课得知: 减压神经为主动脉弓、颈动脉窦血管壁上压力感受器的传入纤维,多数哺乳动物的减压神经在颈部混入迷走神经到达延髓,其传入中枢的冲动引起压力感受性反射。然而,在家兔此神经自成一束,走行在颈部的迷走神经和交感神经周围。由于家兔的减压神经解剖学特征的独特性,其易被分离并广泛应用在心血管研究中。减压反射具有稳定动脉血压的作用。动脉血压升高或降低时,减压神经到达心血管中枢的传入冲动相应地增强或减弱,使血压降低或升高。因此,减压反射是一种负反馈调节,其生理意义在于维持动脉血压的相对稳定。通过本实验,学习引导减压神经放电的电生理学实验方法,了解减压神经放电的特征以及其减压神经放电与动脉血压之间的关系。

实验步骤 麻醉与固定 1 用4%乌拉坦按4 mL/kg的剂量由耳缘静脉缓慢注入。 动物麻醉后,仰卧固定于手术台上。 由耳缘静脉缓慢注入麻药时,一边注射,一边观察动物的整体表现,如角膜反射、肌张力、呼吸频率与幅度、皮肤夹捏反应等,也就是说麻醉剂量以动物麻醉效果为依据,剂量过小无法固定和手术,剂量过大容易引起动物死亡。

实验步骤 2 手术 (1)分离减压神经:剪家兔颈前毛,沿颈正中线作一8~10 cm的皮肤切口,分离皮下组织及肌肉,暴露气管,找出一侧减压神经,穿线备用。 (2)插动脉插管和气管插管 将充满12.5 u/mL肝素生理盐水的动脉插管插入动脉,以记录血压;在甲状软骨下3-4节软骨处切开气管,做一倒‘T’型切口,向肺的方向插入气管插管并用棉线捆绑固定牢固。 (3)安放引导电极 在颈部切口皮下放一块约1 cm2的铜片以接地。用银制钩状保护电极将减压神经悬空钩起(不宜拉得太紧),不要触及周围组织,用止血钳提起颈部皮肤做成皮兜,滴入38℃~40℃的液体石蜡以保温和防止组织干燥。 接下来在动物手术操作过程中,先剪去家兔颈前部的毛,沿颈正中线作一8~10 cm的皮肤切口,分离皮下组织及肌肉,暴露气管,在气管旁找出一侧颈总动脉鞘,钝性分离鞘膜,暴露颈总动脉、迷走神经、交感神经和减压神经,用玻璃分针小心分离减压神经和颈总动脉,并分别穿线备用。 将充满12.5 u/mL肝素生理盐水的动脉插管插入动脉向心端,结扎插管后用以记录血压;在甲状软骨下3-4节软骨处切开气管,做一倒‘T’型切口,向肺的方向插入气管插管并用棉线捆绑固定。电极的放置请同学们按实验指导操作。

实验步骤 3 连接和调整实验记录系统 (1)将记录电极通过电缆线连接到记录装置的第一通道,用以记录减压神经放电;连接监听器;将一根接地线连接至切口处的铜片,用以防止静电干扰。 (2)将血压换能器连接到记录装置的第三通道上,用于记录动物血压。 点击Medlab菜单“实验/生理学实验”,选择“家兔减压神经放电”。Medlab放大器、采样和刺激参数按下表设置。 实验步骤3 连接和调整实验记录系统,请同学们按实验指导操作,并设定相关参数。

Sampling parameters Recorder 20 s 200:1 Display mode Recorder Sampling interval 20 s X axis compression ratio 200:1 Channel Channel 1 Channel 2 DC/AC AC DC Handling name Neural discharge Blood pressure Magnification 10000~50000 100~200 Y axis compression ratio 8:1 4:1 首先在电脑上点击Medlab菜单“实验/生理学实验”,选择“家兔减压神经放电”。Medlab放大器、采样和刺激参数按此表设置。

实验步骤 项目观察: 4 (1)观察正常状态下减压神经放电,同时记录动脉血压,用于观察神经放电和心跳及血压的关系。   (2)耳缘静脉注射1∶10000去甲肾上腺素0.2~0.3 mL,观察减压神经放电频率和幅度的变化,观察动脉血压变化。 (3)等血压恢复到正常后,耳缘静脉注射1∶10000乙酰胆碱0.2~0.3 mL,观察减压神经放电频率和幅度的变化,观察动脉血压变化。 实验步骤5 为各项观察内容。以正常状态下减压神经放电、动脉血压、心率变化作为实验的对照组,以来分别观察静脉注射1∶10000去甲肾上腺素或1∶10000乙酰胆碱后的上述参数变化。

注意事项 麻醉不宜过浅,以免动物躁动,产生肌电干扰。 1 分离神经要轻柔,分离后及时滴加温热液体石蜡,保护神经。 2 请严格遵守上述注意事项。

实验结果 正常状态下减压神经放电曲线 1 药物对于减压神经放电的影响曲线 2 请在实验报告中描述你的实验结果。

实验结果 此图为兔减压神经放电的实验结果展示,上栏为减压神经放电表现,下栏是心电图反应。

讨 论 正常减压神经放电有何特点? 1 静脉注射去甲肾上腺、乙酰胆碱,减压神经放电有何变化? 为什么? 2 讨 论 正常减压神经放电有何特点? 1 静脉注射去甲肾上腺、乙酰胆碱,减压神经放电有何变化? 为什么? 2 结合所学理论知识,分析讨论上述问题,预祝同学们实验顺利,下面开始动手实验。