第16章 衣原体 Chlamydiae 病原教研室
教学目的 掌握 熟悉 -衣原体的发育周期 肺炎衣原体的致病性 了解 衣原体的概念 种类 沙眼衣原体的致病性 衣原体病原生物学检查 教学大纲 掌握内容:衣原体的主要概念与主要特征;衣原体主要生物学性状,包括形态及发育周期、培养特性、抵抗力、抗原构造与分类;沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肺炎衣原体引起疾病 熟悉内容:衣原体微生物学检查法及防治原则 了解内容:放线菌的微生物学诊断及防治原则及传播途径
衣原体(Chlamydiae) 一类能通过细菌滤器、严格细胞内寄生 具有独特发育周期的原核细胞型微生物 1956年汤飞凡等首次分离培养出沙眼衣原体
四种衣原体的性状比较
共同特性 1.有细胞壁,G-,呈圆形或椭圆形 2.有DNA和RNA两种核酸 3.严格的细胞内寄生 具有独特的发育 周期,二分裂繁殖 4.通过吞饮进入细胞,形成包涵体 5.含核糖体、酶系统 6.对多种抗生素敏感
第一节 概 述
生物学性状
1. 发育周期与形态染色 包括原体和始体
原体(Elementary body, EB): 呈球形、椭圆形或梨形 直径0.2-0.4 µm,是发育成熟的衣原体 具有强感染性,细胞外较稳定,无繁殖能力 Giemsa染色呈紫色,Macchiavello染色呈红色
始体,亦称网状体(Initial body,RB): 圆形或椭圆形 直径0.5-1.0µm 无胞壁,代谢活跃,二分裂繁殖 网状体是衣原体的繁殖型,不具感染性 Macchivello 染色呈蓝色 每个发育周期约 48-72h
衣原体的发育周期 原体吸附于细胞,8小时后发育成始体并增殖;30小时后始体开始分化为原体,并在细胞形成包涵体;48小时后细胞破裂,释放的原体继续感染邻近细胞
原体和始体的比较 性状 原体 始体 大小(µm) 0.2~0.4 0.5~1.0 细胞壁 + - 代谢活性 胞外稳定性 强 弱 感染性 无 繁殖能力 RNA:DNA比 1:1 3:1
包涵体 细胞内含繁殖的始体和子代原体的空泡 沙眼衣原体包涵体 透射电镜 5000
2.培养特性 鸡胚接种:鸡胚卵黄囊--包涵体、 原体 始体颗粒 组织细胞培养:HeLa、McCoy或HL 3. 化学组成及抗原结构 属特异性抗原:脂多糖 种特异性抗原:主要外膜蛋白 型特异性抗原:血清型或生物型依据
4.抵抗力 对热、60℃ 5-10min 耐低温 消毒剂敏感 75%乙醇半分 抗生素敏感 红霉素 四环素
致病性与免疫性
(一)致病机制 衣原体--内毒素样物质--抑制宿主细胞代谢- 破坏宿主细胞 MOMP--阻止--吞噬体+溶酶体融合-表位变异 --逃避抗体的中和-感染细胞 热休克蛋白(HSP)--巨噬细胞-TNF-α、 IL-1、IL-6等炎症性细胞因子
(二)免疫性 细胞免疫和体液免疫 免疫力不强 易造成持续感染和反复感染
第二节 主要致病性衣原体
沙眼衣原体
衣原体发现 生物分型 1956年汤飞凡等首次分离培养出沙眼衣原体 沙眼生物亚种(Biovar trachoma) 性病淋巴肉芽肿生物亚种 (biovar lymphogramuloma venereum, LGV) 鼠生物亚种
沙眼衣原体始体的镜下形态(Giemsa染色) 生物学性状 原体:圆形或椭圆形,Giemsa染色呈紫红色 原体能合成糖原,故被碘溶液染成棕褐色 网状体:核质分散,Giemsa染色为深蓝或暗紫色 沙眼衣原体始体的镜下形态(Giemsa染色) 碘染色
血清学分型 沙眼衣原体:19个血清型 (MOMP) 沙眼生物亚种:15个血清型 LGV生物亚种:L1、L2、L2a和L3共4个血清型
1.沙眼 致病性 眼-手-眼 眼-物 5亿患者 A、B、Ba和C血清型引起 结膜→包涵体→结膜充血及滤泡增生→早期 眼-手-眼 眼-物 5亿患者 A、B、Ba和C血清型引起 结膜→包涵体→结膜充血及滤泡增生→早期 流泪-后期结膜瘢痕、睑内翻、倒睫及角膜 血管翳-角膜损害-影响视力或致盲
2.包涵体结膜炎 成人包涵体结膜炎:性接触、游泳池水 新生儿包涵体结膜炎:产道
3.泌尿生殖道感染 沙眼生物型D-K血清型引起 男性:尿道炎,合并附睾炎、前列腺炎、直肠炎 女性:尿道炎、宫颈炎、输卵管炎与盆腔炎等 非淋菌性尿道炎50%-60%由沙眼衣原体引起
女性:会阴、肛门、直肠,会阴-肛门-直肠 组织狭窄 4.性病淋巴肉芽肿 L1、L2、L2a和L3 性接触 男性:化脓性淋巴结炎 慢性淋巴肉芽肿 常形成瘘管 女性:会阴、肛门、直肠,会阴-肛门-直肠 组织狭窄
免疫性 免疫力不强 可反复或持续感染
肺炎衣原体
1983年自美国西雅图一位急性呼吸道 感染病人的咽部分离出另一株 衣原体属的一个新种 1965年自一名台湾小学生眼结膜中分离 ----命名为TWAR
一、生物学性状 (一)形态染色 原体: 0.38µm,梨形 Giemsa--紫红色 (二)细胞培养 该法包涵体的定位比碘染法敏感 目前常用 HEp-2 和 HL细胞系
二、致病性与免疫性 所致疾病 肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等 起病缓慢,症状与肺炎支原体相似 表现为咽痛、咳嗽、咳痰、发热等 一般症状较轻 与冠心病、动脉粥样硬化等慢性病 密切相关,机制尚待深入研究
第三节 衣原体的检查与防治原则
沙眼衣原体感染宫颈刮取物直接图片(荧光染色) (一)病原生物学检查 1.标本 2.病原体检测 (1)检查包涵体 结膜刮片--Giemsa(碘液及荧光抗体)--观察— 包涵体 沙眼衣原体感染宫颈刮取物直接图片(荧光染色) 沙眼衣原体包涵体的镜下形态(碘染色)
(2)抗原检查法 ELISA:LPS MOMP PCR和LCR: DNA (3)分离培养 3.血清学试验检测抗体 渗出液或刮取物--鸡胚卵黄囊(传代细胞)— IFA(ELISA)-衣原体 3.血清学试验检测抗体
(二)防治 预防: 注意个人卫生,避免直接或间接的 接触传染 治疗: 多西环素、阿莫西林、阿奇霉素 目前尚无有效疫苗
思考题 1、简述致病性衣原体的种类及致病性? 2、试比较原体和始体的性状?