第四节 含量测定 一、酸碱滴定法（中和法） （一）. 直接滴定法 pKa3～6 都有游离羧基，显酸性。 第四节 含量测定 一、酸碱滴定法（中和法） （一）. 直接滴定法 pKa3～6 都有游离羧基，显酸性。

阿司匹林 ChP（2000） 取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。

讨论 中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯键水解。快速摇动防止局部水解。

优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸） 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定。

多国药典测类似酸性药物都采用此方法： 如双水杨酸酯，苯甲酸，丙磺舒，布洛芬等。

（二） 水解后剩余滴定法 这是酯含量测定的一般方法。阿司匹林加过量的碱，加热水解，用硫酸回滴剩余碱。

USP（24）方法：取本品约1. 5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0. 5mo1/L）50 USP（24）方法：取本品约1.5g，精密称定,加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。

水解： 剩余滴定： 2NaOH（过量）＋H2SO4 ＝Na2SO4＋2H2O

由反应式得知，硫酸标准液与阿司匹林的摩尔比为1∶1 优点：消除了酯键水解的干扰 缺点：酸性杂质干扰

2 羟苯乙酯含量测定 分子量116.18 。加定量过量氢氧化钠滴定液1mol/l，回流水解酯键。剩余碱用硫酸（0 .5mol/l）回滴。滴定度116.2。碱液受热易吸收二氧化碳，形成碳酸钠。使最终的测定结果偏低。

（三） 两步滴定法 1 阿司匹林片的测定 因片剂中可能加入酒石酸或枸橼酸作稳定剂，也可能有水解酸性产物水杨酸，醋酸等，不能用直接滴定法，而是先中和共存的酸，再水解其目的物-酯。

第一步 中和

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，此时中和了原来的游离酸，阿司匹林也同时成为钠盐。

第二步 水解后剩余滴定 水解：

再精密加氢氧化钠滴定液（0. 1mol/L）40m1。置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0 再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1。置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4

剩余滴定： 反应摩尔比为0.5∶1 本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰，消除供试品中共存的酸性杂质。 阿司匹林肠溶片也采用此法。 2NaOH（过量）＋H2SO4 ＝Na2SO4＋2H2O 反应摩尔比为0.5∶1 本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰，消除供试品中共存的酸性杂质。 阿司匹林肠溶片也采用此法。

片剂含量测定结果的计算

剩余滴定法

2 氯贝丁酯含量测定 先加入氢氧化钠成中性，消除了酸性杂质，再用过量氢氧化钠加热回流水解，生成对氯苯氧异丁酸钠和乙醇。用盐酸回滴剩余氢氧化钠。

取氯贝丁酯2g，精密称定，置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）10ml，加酚酞指示液数滴，滴加氢氧化钠滴定液（0 取氯贝丁酯2g，精密称定，置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）10ml，加酚酞指示液数滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）20m1。

加热回流1h，至油珠消失。用盐酸酸滴定液（0. 5mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0 加热回流1h，至油珠消失。用盐酸酸滴定液（0.5mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.5 mo1/L）相当于121.4mg。

二、亚硝酸钠滴定法 具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物。能在盐酸存在下发生重氮化反应。可用此法测对氨基水杨酸钠及其制剂的含量。用永停法指示终点，测定含量。

三 双相滴定法 芳酸碱金属盐 苯甲酸钠易溶于水，其水溶液呈碱性，虽可用盐酸滴定，但游离酸不溶于水，使滴定终点pH突越不明显，不利于终点判断。但苯甲酸溶于有机溶剂，故，加一有机层。减少了苯甲酸在水中的浓度，使滴定反应完全，终点清晰，同时可降低苯甲酸的解离。

如苯甲酸钠 ChP(2000) 溶剂：水——乙醚（苯甲酸在水中的溶解性很小）

取本品1. 5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基指示液2滴，用盐酸滴定液（0 取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,

加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液0. 5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0 加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。

乙醚的作用是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底 滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，而且反复两次进行。使滴定反应完全，终点清晰。优点：消除了反应产物的干扰。

紫外分光光度法 （一）直接紫外分光光度法 丙磺舒在盐酸乙醇液中在249nm处有最大吸收，以此定量其片剂。

也称过滤后的紫外分光光度法 丙磺舒片取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200m1量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9→100）4m1，置70℃水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，

精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→100）2m1，用乙醇稀释至刻度，摇匀。于1cm吸收池中，以溶剂为空白，在249nm的波长处测定吸收度，按C13H19NO4S的吸收系数（ ）为338计算。

（二） 离子交换后紫外分光光度法 氯贝丁酯 强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，对照法定量测定氯贝丁酯含量

原料药 对照法

（三） 柱分配色谱—紫外分光光度法 USP（24）阿司匹林胶囊 可同时定量测定阿司匹林和水杨酸 （1）水杨酸的限量测定 固定相：FeCl3 SA保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量 （2）含量测定 固定相：NaHCO3 AAS、SA保留 冰醋酸洗脱，280nm测总量

五 HPLC （一） 阿司匹林栓剂 ChP（2000） 为了分离原料药和制剂中的杂质，辅料及稳定剂等，用离子抑制色谱法，内标法定量

（二） 丙磺舒原料的含量测定 USP（24） 离子抑制色谱法 外标法定量

第五节 体内药物分析 一 血清中阿司匹林和水杨酸的HPLC法

（二） 尿中丙磺舒的SPE-HPLC净化分离分析法

复习题

鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（C） A. 碘化钾 B. 碘化汞钾 C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E. 亚铁氰化钾

乙酰水杨酸片剂可采用的测定方法为（CD） A. 非水滴定法 B. 水解后剩余滴定法 C. 两步滴定法 D. 柱色谱法 E. 双相滴定法

测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是（BC） A. 重量法 B. 酸碱滴定法 C. 高效液相色谱法 D. 络合滴定法 E. 高锰酸钾法

两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量=180.16）的量是（A） A. 18.02mg B. 180.2mg C. 90.08mg D. 45.04mg E. 450.0mg

反应摩尔比为1∶1 T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数 c——滴定液浓度，mol/L M——被测物的摩尔质量，g/mol n——1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比为1∶n

苯甲酸钠的含量测定，中国药典（1995年版）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（D） A. 水—乙醇 B. 水—冰醋酸 C. 水—氯仿 D. 水—乙醚 E. 水—丙酮

双相滴定法可适用的药物为（E） A. 阿司匹林 B. 对乙酰氨基酚 C. 水杨酸 D. 苯甲酸 E. 苯甲酸钠

A．两步酸碱滴定法 B．直接酸碱滴定法 C．两者皆是 D．两者皆不是 1. 苯甲酸钠的测定（D） 2. 氯贝丁酯的测定（A） 3. 盐酸的测定（B） 4. 酸碱滴定法（C） 5. 阿司匹林片的测定（A）

采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时，已知阿司匹林的分子量为180. 2，所用氢氧化钠滴定溶液的浓度为0 采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时，已知阿司匹林的分子量为180.2，所用氢氧化钠滴定溶液的浓度为0.1mol/L，请问1ml氢氧化钠滴定溶液相当于阿司匹林的量应是（C） A. 180.2mg B. 180.2g C. 18.02 mg D. 1.802mg E. 9.01mg

阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是（C） A. 苯酚 B. 乙酰水杨酸 C. 水杨酸 D. 醋酸钠 E. 醋酸苯酯

水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的pH值是（D） A. pH10.0 B. pH2.0 C. pH7～8 D. pH4～6 E. pH2.0±0.1

两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（B） A. 测定阿司匹林含量 B. 消除共存酸性物质的干扰 C. 使阿司匹林反应完全 D. 便于观测终点 E. 有利于第二步滴定

对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是（B） A. 水杨酸 B. 间氨基酚 C. 氨基酚 D. 苯酚 E. 苯胺

能用与FeC13试液反应产生现象鉴别的药物有（ABC） D．氢化可的松 E．丙酸睾酮

采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（A） B. 乙醚层在水上面，防止样品被氧化 C. 消除酸碱性杂质的干扰 D. 防止样品水解 E. 以上都不对

采用双步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与标准溶液的反应摩尔比为（A） A. 2:1 B. 1:2 C. 1:1 D. 3:1 E. 以上都不对

阿司匹林中含量最高的杂质为（C） A. 乙酰水杨酸酐 B. 乙酰水杨酸水杨酸 C. 水杨酸 D. 水杨酰水杨酸 E. 以上都不对

区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用的试液是（C） A. 碘化钾 B. 碘化汞钾 C. 三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E. 亚铁氰化钾

在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是（D） A. 水杨酸钠 B. 对氨基水杨酸钠 C. 乙酰水杨酸 D. 苯甲酸钠 E. 扑热息痛

对氨基水杨酸钠的含量测定方法有（ABCDE）

用直接滴定法测定阿司匹林含量（ABE） A. 反应摩尔比为1：1 B. 在中性乙醇溶液中滴定 C. 用盐酸滴定液滴定 D. 以中性红为指示剂 E. 滴定时应在不断振摇下稍快进行

含量测定方法为 A. 直接中和滴定法 B. 两步滴定法 C. 两者均可 D. 两者均不可 阿司匹林片（B） 阿司匹林原料药（A） 对氨基水杨酸钠（D） 阿司匹林栓剂（D） 阿司匹林肠溶剂（B）

完

胺 芳胺 芳伯氨基

羧酸 芳酸

4. 异羟肟酸铁反应 五、UV 六、IR

直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺 间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯

三、双水杨酯中有关物质的检查 BP（1998）TLC 水杨酸：杂质对照品法 有关物质：高低浓度对比法

（1）测定方法及计算 Ka=3.27×10-4 反应摩尔比为1∶1

5. 非水碱量法 芳酸碱金属盐 冰醋酸作溶剂 高氯酸的冰醋酸溶液作滴定剂 结晶紫作指示剂指示终点 或电位法指示终点

6. 缩合后酸碱滴定法 氨甲苯酸 加入甲醛使与氨甲苯酸作用，生成Schiff碱后，用碱液滴定

氨甲苯酸 取本品约0.3g，精密称定，加水30ml，加热使溶解，放冷，加甲醛与甲酚红指示液，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定至溶液显淡紫色，并将滴定结果用空白试液校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于15.12mg的C8H9NO2。

酚磺乙胺注射液 ChP（2000） 精密量取本品适量（约相当于酚磺乙胺0.25g），置200ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2m1，置100ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。

在1cm吸收池中，以溶剂为空白，于305nm的波长处测定吸收度，按C10H17NO5S的吸收系数（ ）为159计算含量。

注射液含量测定结果的计算 紫外分光光度法 吸收系数法

2. 对氨基水杨酸钠 USP（24） 离子对反相HPLC 内标法定量

4. 酚磺乙胺 ChP（2000） 正相HPLC 内标法定量

铵

紫外分光光度法 吸收系数法