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影响血液凝固的因素 生理学教研室 徐 杰
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【病 例】 某患者，男，10岁，因反复出血不易停止而就诊主述：轻伤之后皮肤黏膜出血，出现顽固的持续性渗血，可长达数日或数周之久。查体：关节肿胀、压痛、活动障碍，皮下出血，形成血肿。实验室检查：血小板计数260×109/L，出血时间（bleeding time）正常，凝血时间（clotting time）延长，激活的部分凝血活酶时间( APTT )延长，凝血因子活性测定显示因子Ⅷ促凝活性降低.临床初步诊断为：血友病，输注浓缩凝血因子后，症状暂时消除。
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【分析与思考】 1.什么是血友病？其发病机制如何？ 2.什么是生理性止血？其基本过程如何？ 3.生理性止血功能减退或亢进时会导致什么后果？如何初步评价毛细血管的止血能力？ 4.什么是出血时间呢？临床上测定出血时间的方法有哪些？ 5.如果采用Duke法测定出血时间，需要注意哪些事项？
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6.什么是血液凝固？血液凝固的本质是什么？ 7.凝血功能障碍会导致什么后果？如何初步筛检凝血功能是否存在缺陷？ 8.什么是凝血时间？临床上测定凝血时间的方法有哪些？ 9.如果采用玻片法测定凝血时间，需要注意哪些问题？ 10.血液凝固的基本过程是什么？
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11.血液凝固的途径有哪些？ 12.哪些因素可以影响血液凝固的速度？其作用机制是什么？ 13.如果采家兔血液来观察温度、接触面粗糙程度、Ca2+以及肝素对血液凝固的影响作用,应如何合理设计实验，并需要注意哪些事项？ 14.如果加入肝素和草酸钾的试管不出现凝血，再加入适量的CaCl2溶液，血液是否会发生凝固？
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【目的与原理】 掌握纸片法测定出血时间和玻片法测定凝血时间的方法，并通过测定不同条件下的血液凝固时间，观察温度、接触表面粗糙程度以及一些化学因素和抗凝剂对血液凝固的影响。
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【实验对象】:人和家兔 【实验用品】:采血针、手表、滤纸条、75%酒精棉球、大头针、载玻片、台秤、兔手术器械一套、10ml注射器、20%乌拉坦溶液，动脉夹、动脉插管、三通、干燥试管、肝素、2%草酸钾溶液、2%氯化钙溶液、冰块、液态石蜡、纱布碎屑、恒温水浴箱、烧杯等。
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【实验步骤与观察项目】 （一）出血时间的测定 1．对象：人 2．步骤：用75%酒精棉球常规消毒耳垂，用采血针在耳垂刺一深2mm的伤口，让血液自行流出，不要加压力。每隔半分钟用干净滤纸吸干流出的血液，直至血液不再流出为止。计数滤纸上的出血点，将出血点数除2即可算出出血时间（分）。 出血时间（分）= 出血点数 2
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3. 注意事项： ①采血时避开充血、水肿，冻伤等处，血液应自动流出，不可用手挤压出血点。 ②穿刺伤口应标准，太浅或太小时，皮肤的天然弹性可使伤口封闭而不出血，影响结果。
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（二）凝血时间的测定 1．对象：人 2．步骤：用75%酒精棉球常规消毒耳垂，用采血针在耳垂刺一深2mm的伤口，将第一滴血滴在载玻片上，每隔半分钟用大头针或者牙签在血滴中挑一次，直到挑出丝状物为止，这段时间就是凝血时间。
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3．注意事项： ①采血时避开充血、水肿，冻伤等处。 ②将载玻片置于实验台上，不用手持，排除温度因素的干扰。 ③用大头针挑的时候要按一定的方向，且动作不要太快。
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（三）影响血液凝固的因素的观察： 1．对象：家兔 2．步骤： （1）每组事先准备7只试管，编号备用，按照以下要求进行处理。
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（2）家兔称重、麻醉、固定 （3）游离颈动脉：沿前正中线将颈部皮肤切开约5cm，分离皮下组织和肌肉，暴露气管，在气管旁沟内找到颈动脉鞘，游离出大约3-5cm的颈动脉
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（4）颈总动脉插管 --动脉夹夹住近心端 --死结结扎远心端 --穿绳，活结备用 --V形斜口，插管 --固定
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（5）打开止血钳，向每个试管中放入血液1ml左右。
（6）从血液置入试管中起开始计时，每隔半分钟将试管缓慢倾斜45度一次，观察液面情况，若液面不再流动，判定血液已凝固。记录各管血液凝固的时间，填入下表。
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3．注意事项： ①动脉插管要固定牢靠，以免滑脱。 ②尽量保持各试管口径及放血量一致。 ③放入血液后，立即将血液与试管内物质混匀，然后再计时。
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