北京市海淀区疾病预防控制中心 微生物检验科 刘方遥 实验室生物安全培训 北京市海淀区疾病预防控制中心 微生物检验科 刘方遥 www.med126.com www.med126.com

主要内容 生物安全相关法律法规 生物安全防护 感染性物质的运送与接收 实验室检测设备的生物安全及应急处置 www.med126.com

生物安全相关法律、法规 《中华人民共和国传染病防治法》 《医疗废物管理条例》 《病原微生物实验室生物安全管理条例》 《医疗卫生机构医疗废物管理办法》 《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》 《人间传染的病原微生物名录》 《医疗废物分类名录》 《医疗机构临床实验室管理办法》 《北京市与人健康有关的实验室生物安全事件应急处置工作方案》 《医学实验室安全要求》 《实验室生物安全通用要求》 《北京市与人体健康有关的实验室生物安全事件应急处置工作方案》 www.med126.com www.med126.com

人间传染的病原微生物名录 中华人民共和国卫生部 2006.1.11 人间传染的病原微生物名录 中华人民共和国卫生部 2006.1.11 www.med126.com www.med126.com

各级生物安全实验室的个人防护要求 BSL－1实验室 工作人员实验时应穿工作服，戴手套,必要时戴防护眼镜。 离开实验室,必须脱下工作服,留在实验区,不得穿着进入办公区 工作服应定期消毒 www.med126.com www.med126.com

BSL-1 www.med126.com www.med126.com

各级生物安全实验室的个人防护要求 BSL－2实验室 除符合BSL－1的要求外，还应该符合下列条件： 1.在实验室中应穿专用工作服或防护服。 2. 如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。 -- 一次性手套不得清洗和再次使用。 3. 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。 www.med126.com www.med126.com

BSL-2 www.med126.com www.med126.com

生物安全防护-穿戴防护用品顺序 实验服 口罩 帽子 防护眼镜 鞋套 第一层手套 防护服 第二层手套 1、大小尺寸 2、N95的合理使用 3、气密性检测 4、用后回收消毒处理 www.med126.com www.med126.com

口罩 www.med126.com www.med126.com 口罩仅可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染 仅适用于一、二级防护中使用 N95 使用者在使用前需试戴、测试 www.med126.com www.med126.com

正确佩戴和卸下外科口罩示意图 www.med126.com www.med126.com 一般在使用时可同时佩戴面罩，以组合使用的方法保护整个面部, 单独使用不能对工作人员提供呼吸保护。 正确佩戴和卸下外科口罩示意图 www.med126.com www.med126.com

口罩-气密性检测 正确佩戴N95口罩 使用要点： 1. 佩戴时选择合适和合格的口罩 2. 遮盖住鼻子、口和下颚 3. 用橡皮筋（松紧带）固定在头部 4. 调整在合适的面部位置并加以检验 5. 吸气时防毒面具应该有塌陷状 6. 呼气时在面具周围不应该漏气 www.med126.com www.med126.com

穿戴防护用品顺序 实验服 口罩 帽子 防护眼镜 鞋套 第一层手套 防护服 第二层手套 1、大小尺寸 2、漏气检查 3、套在防护服外 乳胶手套 1、大小尺寸 2、漏气检查 3、套在防护服外 4、不可重复使用 www.med126.com www.med126.com

穿戴防护用品顺序 实验服 口罩 帽子 防护眼镜 鞋套 第一层手套 防护服 第二层手套 1、大小尺寸 2、防护等级需求 www.med126.com www.med126.com

实验服、防护服 连体防护 隔离衣 实验服 www.med126.com www.med126.com

安全脱卸个人防护装备 考虑要点部位和区域：污染、清洁 口罩 第一层手套 帽子 实验服 鞋套 防护眼镜 防护服 第二层手套 防护服 第一层手套 www.med126.com www.med126.com

防护服 第一层手套 帽子 第二层手套 鞋套 防护眼镜 口罩 实验服 消毒 洗手 防护服 第一层手套 帽子 第二层手套 鞋套 防护眼镜 口罩 实验服 消毒 洗手 所有个人防护装备消毒，放入黄色垃圾袋中集中处理 www.med126.com www.med126.com

样本转运交接中的生物安全 人间传染的病原微生物名录 中华人民共和国卫生部 2006.1.11 www.med126.com 人间传染的病原微生物名录 中华人民共和国卫生部 2006.1.11 www.med126.com www.med126.com

感染性物质的运送 良好沟通 充分准备 规范包装 依法运送 目的 种类 事前联系 数量 www.med126.com

准运证书 规范包装 依法运送 良好沟通 充分准备 www.med126.com www.med126.com

规范包装 依法运送 良好沟通 充分准备 www.med126.com www.med126.com

主容器 www.med126.com www.med126.com

辅助容器（A类） www.med126.com www.med126.com

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外层包装（A类） www.med126.com www.med126.com

规范包装 依法运送 良好沟通 充分准备 X X X www.med126.com www.med126.com

感染性物质的接收 环境设施 合理准备 物资器具 双人接收 固定收样室 www.med126.com www.med126.com 专用电梯

勿忘询问 接收和拆封 清洁区内打开外包装 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 做好防护 清洁区内打开外包装 BSC内打开辅助容器 擦拭消毒辅助容器 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 www.med126.com www.med126.com

勿忘询问 接收和拆封 清洁区内打开外包装 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 做好防护 清洁区内打开外包装 BSC内打开辅助容器 擦拭消毒辅助容器 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 www.med126.com www.med126.com

勿忘询问 接收和拆封 清洁区内打开外包装 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 做好防护 清洁区内打开外包装 BSC内打开辅助容器 擦拭消毒辅助容器 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 口罩仅可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染 仅适用于一、二级防护中使用 N95 使用者在使用前需试戴、测试 核对信息 www.med126.com www.med126.com

勿忘询问 接收和拆封 清洁区内打开外包装 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 做好防护 清洁区内打开外包装 BSC内打开辅助容器 擦拭消毒辅助容器 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 双方签字，开具接收回执 www.med126.com www.med126.com

勿忘询问 接收和拆封 清洁区内打开外包装 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 做好防护 清洁区内打开外包装 BSC内打开辅助容器 擦拭消毒辅助容器 清洁区内做好评价记录 清洁区内完成接收程序 终未消毒与实验废物规范处置！ www.med126.com www.med126.com

单位内部感染性物质运送要求 单位内部不同建筑物间感染性物质运送可以使用两层包装系统。（如：病房与病房之间、采样点到实验室以及大楼内部的样品转移。） www.med126.com www.med126.com

生物安全柜 生物安全柜VS超净工作台 超净工作台提供的是对样品的保护，对操作者和环境是不提供保护的；广义上的生物安全柜同时提供对操作者、环境和样品的保护。所以，从您需要的保护情况上，可以得出正确的选择 www.med126.com www.med126.com

生物安全柜原理等级和种类 原理: 气流原理和实验室通风橱一样，不同之处在于排气口安装有HEPA（高效空气粒子过滤器）过滤器。由前窗操作口向内吸入的负压气流保护人员的安全，而排出的气流须经HEPA过滤来保护环境不受污染。 保护样品 保护实验者 保护环境 www.med126.com www.med126.com

原理等级和种类 等级： 生物安全柜biosefety cabinets 共分为三个级别共六种型号 种类： I级 II级：A1型、A2型、 B1型、B2型 III级 www.med126.com www.med126.com

生物安全柜（BSC）种类 BSC 排气 循环 进风(m/s) 送风(m/s) 排处 连接 Ⅰ 100% 0% 0.38 室外 硬管 Ⅱ A1 室外 硬管 Ⅱ A1 30% 70% 0.4 室内 无 Ⅱ A2 套管 Ⅱ B1 0.5 Ⅱ B2 Ⅲ 不适 均可 www.med126.com www.med126.com

Ⅰ级生物安全柜原理图 Ⅰ级生物安全柜不能保护样品 目前已较少使用 A：前开口， B：可视窗， C：排风HEPA过滤器， D：压力排风系统。 www.med126.com www.med126.com

Ⅱ级生物安全柜 二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型，是有前窗操作口的安全柜，操造者可以通过前窗操作口在安全柜内进行操作，对操作过程中的人员、产品及环境进行保护。 www.med126.com www.med126.com

Ⅱ级A1型生物安全柜原理图 A：前开口；B：窗口； C：排风HEPA过滤器； D：后面的压力排风系统； E：送风HEPA过滤器；F：风机 www.med126.com www.med126.com

Ⅱ级A2型生物安全柜原理图 70%气体循环使用 30%气体排出，既可以接管道外排，也可以不接管道直接排放在实验室 环境空气 污染的空气 HEPA 过滤的空气 含压的污染空气 www.med126.com www.med126.com

Ⅱ级B2型生物安全柜原理图 “全排” 0% 气体循环利用. 100% 气体外排，适用于P3实验室 环境空气 污染的空气 HEPA 过滤的空气 負压的污染空气 www.med126.com www.med126.com

Ⅱ级B2型生物安全柜 www.med126.com www.med126.com

Ⅱ级B2型生物安全柜 www.med126.com www.med126.com

Ⅲ级生物安全柜 三级生物安全柜是为4级实验室生物安全等级而设计的，柜体完全气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验。 www.med126.com www.med126.com

Ⅲ级生物安全柜 www.med126.com www.med126.com

生物安全柜操作 个人防护 使用安全柜时必须穿防护服、戴手套、口罩和帽子，手套应套在防护服的外面。 操作前准备 紫外灯照射30分钟，关闭紫外灯。打开安全柜的日光灯和风机5分钟以上。将实验用品集中消毒擦拭后按从洁净区到污染区的方向摆放。 www.med126.com www.med126.com

生物安全柜操作 理想的工作台摆放原则（清洁——污染区） 干净的物品 废弃物托盘 垃圾袋 被污染的区域 在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行 干净的物品 废弃物托盘 垃圾袋 被污染的区域 www.med126.com www.med126.com

生物安全柜操作 工作时操作规范 双臂垂直缓慢进入前面的开口，在生物安全柜中等待大约一分钟，以使安全柜调整完毕后才可对物品进行处理。 所有操作应在离前窗10cm以外的工作区进行。 废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容器。 www.med126.com www.med126.com

操作注意事项 缓慢移动原则：为了避免影响正常的风路状态，柜内操作时手应该尽量平缓移动。 物品平行摆放原则：为了避免物品和物品之间的交叉污染现象产生，在柜内摆放的物品应该尽量呈横向一字摆开，避免回风过程中造成交叉污染。同时避免堵塞背部回风隔栅影响正常风路。 避免震动原则：柜内尽量避免震动仪器（例如离心机、旋涡振荡器等）的使用，因为震动会使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落，导致操作室内部洁净度降低，同时如果在前操作面平衡失败还会引起安全柜对操作者的污染。 www.med126.com www.med126.com

操作注意事项 不同样品柜内移动原则：柜内两种及以上物品需要移动时，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移动原则，避免污染性高的物品在移动过程中产生对柜体内部的大面积污染。 明火使用原则：柜内尽量不要使用明火！因为在明火使用过程中产生的细小颗粒杂质将被带入滤膜区域，这些高温杂质会损伤滤膜。无法避免一定需要使用的时候，宜使用低火苗的本生灯或电热灭菌器。 www.med126.com www.med126.com

操作注意事项 工作结束后 要求继续运行安全柜至少3分钟完成净化。柜内物品应使用消毒剂擦拭后才能移出柜外，然后全面擦拭生物安全柜的内壁和台面。等待5分钟后，关闭前窗，关灯，关风机，紫外灯照射30分钟。 www.med126.com www.med126.com

操作注意事项 生物安全柜维护保养 保持生物安全柜表面清洁和无污染状态 用75%酒精或者合适的消毒剂擦拭内壁和工作台面； 如果使用漂白剂等腐蚀性消毒剂后，需要用无菌水再次进行 擦拭除去残余的消毒剂； 定期抬起工作台面对其下面的区域进行清洁； 消毒后，用玻璃清洁器对前窗玻璃和紫外灯进行清洁 定期保养 用湿布擦拭内壁和工作台面。 每年按需要更换紫外灯和日光灯。 www.med126.com www.med126.com

操作注意事项 污染清除 甲醛、过氧化氢熏蒸等方法应由有资质的专业人员来完成。 在以下情况下需要进行熏蒸： 在检查和维修之前； 在更换HEPA滤器之前； 在移动安全柜之前； 安全柜被严重地污染； 变换使用目的； 长时间未用； 需要熏蒸的其它时间。 www.med126.com www.med126.com

应急处置 操作时被针头刺伤、吸入气溶胶、摄入微生物、接触污染物 微生物可通过消化道、呼吸道、损伤或健康皮肤、眼结膜等进入人体 www.med126.com www.med126.com

感染性物质溢洒应急处理程序 1. 启动“微生物实验室生物安全应急预案 ”，设立“生物危害，禁止进入”的标识，即时划定警戒区，封闭实验室。 2.尽快脱掉已污染的防护服、手套、鞋套放入有“生物安全”标识的垃圾袋内封好，注意防止次生污染。 3.用纸巾从外围向中心将溢洒区域覆盖后，由外围向中心倾倒消毒剂，消毒面积至少为污染区面积的二倍。 4.用应急电话如实详细向实验室领导汇报事件进展情况。包括事件涉及病原体类别、发生时间、地点、溢洒面积、暴露人数、原因、已采取的措施等。 5. 撤离实验室。撤离前脱去个体防护装备，将已污染的防护服放入黄色垃圾袋内封好，洗手后关门离开（紫外照射）。 www.med126.com www.med126.com

感染性物质溢洒应急处理程序 6. 实验室负责人应即时通知生物安全员，并告知科内全体人员关注事件、禁入警戒区。 7.实验室主管领导通知保卫科、医务科、感染办、消毒科等相关人员应对事件。 8. 准备相应消毒物品和清理用具。 9.佩戴个体防护装备（鞋、防护服、口罩、双层手套）后进入实验室。需要两人共同处理溢洒物。 10. 使消毒剂与溢洒物混合并作用至少30分钟。 11. 小心由外围向中心收集吸收了溢洒物的纸巾及溢洒物，放到黄色垃圾袋中，破碎的玻璃（锐器）要用镊子夹取到有“生物安全”标识的利器盒，最后反复用新的吸收材料将剩余物质擦净。 www.med126.com www.med126.com

感染性物质溢洒应急处理程序 12.处理的溢洒物以及处理工具（包括收集锐器的镊子等）全部置于专用的收集袋或容器内封好。 13.终末消毒：用消毒剂喷洒或擦拭可能被污染的区域（包括手套、鞋套和防护服前部及肘腕部）。 14.脱去个体防护装备，将暴露部位向内折，置于专用的收集袋中，封好。 15.洗手。 16.填写“实验室暴露事故记录”表。 《北京市与人体健康有关的实验室生物安全事件应急处置工作方案》 www.med126.com www.med126.com

应急处置 www.med126.com www.med126.com

应对突发 www.med126.com www.med126.com

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应急物资储备 急救箱：包括常用的伤口处理药品和特殊的解毒剂等 应急电话：安装在缓冲区 房间消毒设备，如喷雾器和甲醛熏蒸器 划分危险区域界限的器材和警告标示 全套防护服（ *连体防护服、手套和头套—用于涉及第一类和第二类病原微生物的事故） 有效防护化学物质和颗粒的全面罩式防毒面具 溢洒处理工具 www.med126.com www.med126.com

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