小白鼠TSSK基因的抽取,純化,與表現 台大生化所 朱善德老師實驗室 891641 陳依文.

Slides:



Advertisements
Similar presentations
元大京華證券 組員名單 : A 楊之奇 A 廖本揚 A 宋俊承 A 陳冠廷 A 郭峻瑋 A 指導教授 : 許素華 副教授.
Advertisements

行政院原住民族委員會 法規暨訴願審議委員會 102 年度原住民身分法實例演練講習: 原住民身分認定及救濟程序.
本校自民國 78 年於顏前校長世錫任內創設本系 設立鑑識科學學系大學部,專責鑑識人才之培養, 為目前國內唯一專門培育鑑識科學人才、研究鑑識 科學學術之大學學系,設系剛滿 20 年。自 85 年於姚 前校長高橋任內,設立鑑識科學研究所招收碩士生 ,民國 88 年於謝前校長瑞智任內先後獲內政部、教.
病历书写 中山医院呼吸科 张 新. 定 义 病历是临床医生根据问诊、体格检查、实验 室和其他检查获得的资料经过归纳、分析、整理, 按照规定的格式而写成的;是关于病人发病情况, 病情发展变化,转归和诊疗情况的系统记录。 病历是临床医生根据问诊、体格检查、实验 室和其他检查获得的资料经过归纳、分析、整理,
第十二章 病历书写与要求 病历病历 医务人员在医疗中形成的文字、符号、图表、 影像、切片等资料的总和。 病历书写 通过诊法、诊断、治疗、护理等医疗活动获得有关资 料,进行归纳、分析、整理形成医疗活动记录行为。 病历意义 A 诊疗等的源文件; B 复 / 转 / 会诊,解决医疗纠纷、判定法律责任、医疗保险等的资料和依据;
第二节 基因在亲子代间的传递. 1. 什么叫做遗传? 2. 什么叫做性状? 3. 性状是由什么决定的?
1 Mammalian expression vector speaker : Yen-chin Liu 劉 燕 琹.
揭日本人让人理解不了的20件事 今天先来看看日本人的自我剖析︰日本人的20个“为什么”?这“20个为什么”的内容来源于日本影视名人北野武所主持的一个节目。虽然不是网友来信中提出过的问题,但看看日本人自己对自己的分析,是挺有意思的。而且,仔细看看下面这“日本人的20个为什么”,会发现其实有些东西对于中国人来说并不陌生。毕竟汉字圈里的文化,是有共融之处的。
你想过吗? 最新款的摩托车.
选修3 现代生物技术专题第三节 蛋白质工程.
第二章:生物科學與食品 第三節:基因改造食品.
第三章 现代教育与人的发展.
強制認領私生子首例 第十組組員:4970T012 劉柏宇 4970T013 黃偵泰 4970T035 陳建儒 4970T100 蔡維哲
重组DNA技术和基因工程Recombinant DNA technology and Genetic Engineering
如何理解和把握选修3 人民教育出版社生物室 吴成军
第21课时 生物圈中的微生物 考 点 聚 焦 专 项 突 破 1.
國民中學 自然與生活科技 第二冊 第3章 生殖 3-1 細胞分裂 3-2 無性生殖 3-3 有性生殖.
報告人 方萱玉 100上學期教學組業務報告.
学校核心发展力 上海市建平中学 程红兵.
必修二 生物 (人教版).
分子生物学软件介绍 刘吉平讲师
想一想 议一议 P74 我们常吃的蘑菇有根、茎、叶吗? 它们的生长是否需要光? 为什么说它们是真菌而不是植物呢?
三次科技革命 学习目标: 1.知道三次科技革命的时间、标志、发源地、理论基础、主要成就、主要特点及影响。 2.培养归纳历史知识的能力
基因在亲子代间的传递.
第一章 基因工程 第二节 基因工程的原理和技术.
王永慶遺產分配 第三組民法報告 4970T011 劉昭妤 4970T037 吳品怡 4970T090 袁如意
台南在地美食文化介紹 台南市鳳凰城文史協會 理事長 歐財榮.
台灣的名勝古蹟.
PCR 及分子标记.
一、作者概說:    王壽來,民國三十八年生,山西省 五臺縣人,中興大學 法律系畢業,美國 喬治城大學碩士、臺灣師範大學 美術研究所碩博士。長期從事文化與外交工作,現任文建會 文化資產總管理處籌備處主任。   王壽來靈感多取自生活經驗,善用中外名言,描繪人生百態。著有《公務員快意人生》、《藝術‧收藏‧我》、《公務員DNA》、《和世界偉人面對面》等書。
导入新课 波能绕过障碍物产生衍射。既然光也是一种波,为什么在日常生活中难以观察到光的衍射现象呢?.
高中生物学必修Ⅰ 分子与细胞 前 言.
基因对性状的控制.
台灣史總複習.
关注生物技术的 伦理问题.
水 痘 冬春季呼吸道传染病防控 感染性疾病科 马伏英.
2015年高考历史质量分析报告 兰州市外国语高级中学 杨彩玲.
肝功能正常的小三阳注意事项.
突變 突變是指遺傳物質發生改變, 而影響到性狀的表現 例:白化症.
 DNA cloning Section 1: Gene manipulation (Basic concept & basic techniques) section 2: Cloning vectors (Compare various Cloning vectors) Section 3:
河北医科大学第四医院暨河北省肿瘤医院肿瘤研究所
國文報告 儒家生死文化討論 不死鳥 組員 972BP001 彭科強 972BP008 王薪榕 972BP025 彭裕宗
司法机关.
王梁华 生物化学与分子生物学教研室 第二军医大学基础部
分子生物學實驗 part 1 presentation
生物技術 Ch8.基因轉殖植物 阮雪芬 Oct22&23, 2002 NTUT
生物五界的分類方式.
基因工程实验流程总览.
外源基因在真核细胞中的表达 Expression In Eukaryotic Host Cells.
微生物遺傳學實驗 東吳大學微生物學系 曾惠中 教授.
Molecular Biology Xu Liyan Chapter 14
基本概念介紹 生命是什麼? 生命的密碼~DNA 解讀生命的執行者~RNA 生命舞台的主演者~蛋白質 DNA、RNA、蛋白質的三角關係
TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO.,LTD
中国医科大学 卫生部细胞生物学重点实验室 教育部医学细胞生物学重点实验室 医学基因组学教研室 主讲: 罗阳 教授
Date: Speaker: Wei-Yu Lee
重組DNA技術的條件: 1. 基本工具:enzymes
功能基因组学 中英联合实验室.
Pull-down assay (His-Tag or GST-Tag)
Drug Resistance Gene Transferred by Plasmid
 基改食品 王鳳英副教授 國立新竹教育大學.
第二节、真核生物基因结构及功能 一、基因的概念 基因的概念随着分子遗传学、分子生物学、生物化学领域的进展而不断完善。 从遗传学角度看:
Molecular Biology Presentation
1.了解引物设计原则 ; 2.掌握primer premier的基本使用方法 。
第五章 目的基因的获得 第一节 PCR扩增获得目的基因或cDNA 第二节 基因组文库的构建与基因分离 第三节 cDNA文库的构建与筛选
人是由什么发育而来的? 一个受精卵.
聖方濟各英文小學 升中派位結果(2002/2004) 入讀英文中學:95.9% 第一組別(Band 1)學生:80.2%
      基 因 突 变 第一节        基因突变的基本概念 第二节        基因突变的分类 第三节        随机突变 第四节        DNA的定位诱变及点突变技术.
非同源染色体:不是同源染色体的两条染色体
全台灣最美的日出好美…好美… 這就是傳說中的潑墨二寮,耳聞她的日出有如國畫般 所以稱為潑墨二寮
证据运用 第八章 证据的运用 第一节 证据体系的结构及运用规则.
Presentation transcript:

小白鼠TSSK基因的抽取,純化,與表現 台大生化所 朱善德老師實驗室 891641 陳依文

實驗目的 “TSSK”---Testis specific kinase----為由小白鼠testis表現的一種protein kinase,並且推定其substract為p90,因此,必須先將其由組織內純化,並表現其蛋白質product,才能觀察其與p90的反應是否能將p90磷酸化以便研究其進一步的功能與作用

實驗方法 Primer的設計 所選用的vector為pET-21a,含有T7-tag,His-tag所以不在primer內加入stop codon. 以EcoR1與Xhol1為兩端的cutting site 抽mRNA 取小白鼠的testis搗碎取得

實驗方法 RT-PCR 跑電泳確認PCR成果 Annealing溫度為56度 TSSK大小為900bp所以應在1000-750之間看到major band

實驗方法 Elution 挖下屬於TSSK的 band以便純化

實驗方法 Ligation Transformation 將elute下來的DNA以restriction enzyme處理成sticky end 與vector ligate在一起 Transformation 把含有TSSK gene的vectortransform到E-coli內

實驗方法 TSSK expression  dosage

實驗方法 Western

實驗結果 TSSK的特性 作PCR反應時需要較高濃度的鎂離子以利其primer可以specific bind我們所需要的部分 Annealing溫度為56度

心得感想 實驗失敗不要氣餒 失敗時要確實檢討每一個步驟,以找出失敗的原因 Kit附的protocol只能參考參考,要實際做做看才知道到底是怎樣 欲速則不達