柑橘皮中黄酮两种提取方法的探索 及含黄酮类饮料生产工艺改进 柑橘皮中黄酮两种提取方法的探索 及含黄酮类饮料生产工艺改进 08级生物科学 陈燕君 08级生物科学 黄洁琳 09级生物科学 龙志泳
一、实验目的 二、方法原理 三、实验步骤 四、数据分析 五、结论分析 六、思考
一、实验目的 比较黄酮两种提取方法提取率以及成本的高低, 进行用乙醇作为提取剂时的最佳提取时间,最佳提取温度,最佳提取浓度的探索; 探索用水作为提取溶剂时的最佳pH, 最佳温度,以及酵母和果胶添加剂的影响的探索,为更有效地开发利用黄酮类物质提出建议。
二、方法原理 以0.1836mg/ml芦丁溶液作为对照绘制标准曲线,利用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠体系分光光度法(在碱性条件下,亚硝酸盐存在时,黄酮与硝酸铝形成红色络合物,在510nm有吸收峰),在510nm波长下分别测定两种方法提取出的提取液的光吸收值。通过计算分别得两种方法提取黄酮的含量。
三、实验步骤 1、标准曲线的绘制 2、两种方法提取黄酮 3、最佳提取率的乙醇的条件的探究 4、最佳提取率的水的条件的探究
1、标准曲线的绘制 分别吸取芦丁标准溶液(0.1836mg/ml), 1.0ml,2.0ml,4.0ml 6.0ml,8.0ml , 分别置于5个25ml容量瓶中, 用30%乙醇补充至12.5ml, 加入0.75ml亚硝酸钠溶液(1:20), 摇匀, 放置5min后, 加入0.75ml(1:10)硝酸铝,5min后, 再加入10ml 1mol/L氢氧化钠溶液, 摇匀, 用30%乙醇稀释至刻度, 10min后用分光光度计在波长510nm处进行测定, 以试剂为空白参比。得到芦丁标准溶液的标准曲线。
2、两种不同的方法提取黄酮
3、最佳提取率的乙醇的条件 的探究 (1)提取温度对黄酮提取效果的影响 (2)提取时间对黄酮提取效果的影响 3、最佳提取率的乙醇的条件 的探究 (1)提取温度对黄酮提取效果的影响 (2)提取时间对黄酮提取效果的影响 (3)乙醇浓度对黄酮提取效果的影响
4、最佳提取率的水的条件的探究 第一组:水温:60℃;pH:7.0 第二组:水温:60℃;pH:9.0 第三组:水温:60℃;pH:11.0
四、数据分析 1、标准曲线 2、最佳提取率的乙醇的条 件的探究 3、最佳提取率的水的条件 的探究
1、数据表格+标准曲线图
2、最佳提取率的乙醇的条件的探究 (1)表一 温度对黄酮提取效果的影响
(2)表二 提取时间对黄酮提取效果的 影响
(3)表三 乙醇浓度对黄酮提取效果 的影响
结论一: 提取柑桔中黄酮的最佳条件为温度70℃,时间20min,乙醇浓度80%
4种不同条件的水的提取率
结论二: 在碱性的水中柑橘皮黄酮提取率最大;加入酵母与果胶作为添加剂后提取率增大。
思考 实验还有很多不足之处…..