第十九章 中药及其制剂分析概论

例：人参 Ch.P.（2010） 【性味与归经】甘，微苦。归脾、肺、心经 【功能与主治】大补元气，复脉固脱，补脾 益肺，生津，安神。用于体虚欲脱，肢冷 脉微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴， 内热消渴，久病虚赢，惊悸失眠，阳痿宫 冷，心力衰竭，心源性休克。

中药分析： 是以中医药理论为指导，应用现代分析理论和方法研究中药材和饮片、提取物和中药制剂质量的一门应用学科。

新版药典特点 1. 品种大幅增加 2. 中药饮片首次有了明确的定义和定位 3. 中药质量标准更符合中药特色 4. 应用现代新技术和方法 5. 中药安全性评价更受重视

第一节 概述

一、中药的特色与分析特点和对策 （一）中药及其制剂的生产和使用有中医理论的指导 1. 运用整体观理论对中药进行化学成分定性轮廓分析 2. 运用组方的“君臣佐使”理论对制剂中君药及贵重药中的主要成分进行定量分析 3. 运用中药药性理论，针对中药药性的化学表征发展科学的分析方法

例 万氏牛黄清心丸 透邪泄热，开窍安神 牛黄 黄连 黄芩 栀子 朱砂 郁金 行气开窍 清心解毒豁痰开窍 清心安神 清热泻火 佐使 君 臣 例 万氏牛黄清心丸 透邪泄热，开窍安神 10g 200g 120g 120g 60g 80g 牛黄 黄连 黄芩 栀子 朱砂 郁金 行气开窍 清心解毒豁痰开窍 清心安神 清热泻火 佐使 君 臣

同一味药在不同的方中作用不同 例 左金丸 泻火，舒肝，和胃，止痛 （黄连、吴茱萸） 君药 例 黄连上清丸 清热通便，散风止痛 （黄连、栀子、连翘、蔓荆子、防风等）

选择有临床疗效成分为分析重点 黄连 小檗碱（抗菌消炎） 麻黄 麻黄碱（治疗支气管哮喘） 洋地黄 强心苷（强心） 延胡索 延胡索乙素（镇痛） 黄连 小檗碱（抗菌消炎） 麻黄 麻黄碱（治疗支气管哮喘） 洋地黄 强心苷（强心） 延胡索 延胡索乙素（镇痛） 乌头 乌头碱（毒性）

根据临床作用选择分析重点 山楂 有机酸 消食健胃 黄酮类 降压、活血、强心

一、中药的特色与分析特点和对策 （二）中药及其制剂的质量有多环节多因素的影响 种类繁多、成分复杂、产地分散、替代品多 生长环境、采收季节、加工炮制 生产工艺、包装运输、储藏 质量控制环节更为复杂

品种的影响 同名异物 例 重楼 百合科Paris polyphylla Smith. 的根茎 又名 草河车、七叶一枝花、蚤休

产地的影响 例 曼陀罗 日照可提高其叶中生物碱的含量 例 不同产地高低含量的差异（%） 高 低 金银花 绿原酸 3.42 0.45 例 曼陀罗 日照可提高其叶中生物碱的含量 例 不同产地高低含量的差异（%） 高 低 金银花 绿原酸 3.42 0.45 淫羊藿 淫羊藿苷 3.00 0.14

药用部位的影响 例 不同部位人参皂苷的含量（%） 重量比 总皂苷 周皮 6.9 2.60 韧皮 46.6 3.04 例 不同部位人参皂苷的含量（%） 重量比 总皂苷 周皮 6.9 2.60 韧皮 46.6 3.04 木质部 46.5 0.31

采收季节的影响 例 丹参酮 11、12月份含量最高 例 薄荷脑 秋季叶变黄时含量最高 例 益母草 水苏碱 营养期含量最高 例 丹参酮 11、12月份含量最高 例 薄荷脑 秋季叶变黄时含量最高 例 益母草 水苏碱 营养期含量最高 益母草碱 营养期含量最低

一、中药的特色与分析特点和对策 （三）中药及其制剂的成分有复杂多变的特点 1. 单一植物中含有多类不同结构的多种成分 2. 不同来源中药中的同一待测成分含量差异巨大 3. 中药在煎煮炮制和制剂过程中化学成分有量和质的变化

活性成分含量悬殊 例 五倍子 鞣质＞70% 例 槐米 芦丁＞20% 例 长春花 长春新碱百万分之一 例 美登木 美登木碱千万分之一

毒 加工方法的影响 流通蒸汽蒸制草乌 酯型生物碱↓ 总生物碱稳定

制剂工艺的特殊性 （四）中药不同工艺和不同制剂中同一成分的质量标准有不同的要求 例 3个地区生产的“黄精丸” 全浸膏、半浸膏、水提、酒提 例 3个地区生产的“黄精丸” 全浸膏、半浸膏、水提、酒提 同一制备工艺，不同生产企业有差别

辅料的特殊性 蜡丸 蜂蜡 蜜丸 蜂蜜 糊剂 糯米粉、黄米粉 水丸 药汁、生姜、大枣汤 曲剂 发酵 胶剂 豆油、黄酒、冰糖

二、 中药及其制剂的分类与质量分析要点 （一）中药材和饮片 药材是中药生产过程中质量保证的首要环节。 二、 中药及其制剂的分类与质量分析要点 （一）中药材和饮片 药材是中药生产过程中质量保证的首要环节。 饮片系指药材经过炮制后可直接用于中医临床或制剂生产的处方药品。 显微鉴别是药材和饮片的特色鉴别方法。 含量测定应强调专属性。 指纹谱和特征谱作为质量控制的手段。

（二）植物油脂和提取物 二、 中药及其制剂的分类与质量分析要点 从植物、动物中制得的挥发油、油脂、有效部位和有效成分。 强调方法的专属性。 二、 中药及其制剂的分类与质量分析要点 （二）植物油脂和提取物 从植物、动物中制得的挥发油、油脂、有效部位和有效成分。 强调方法的专属性。 药典收载的多种提取物均有特征图谱或指纹图谱标准。

（三）中药成方和单方制剂 1. 丸剂 检查项目： 显微鉴别、水分检查、 重（装）量差异、 溶解时限 微生物限度

2. 散剂 检查项目： 显微鉴别、粒度、外观均匀度、水分和装量差异、装量、无菌、微生物限度检查等

3. 颗粒剂 检查项目： 显微鉴别、粒度、水分、溶化性、装量差异、装量、微生物限度

4. 合剂与口服液 药典规定： 不得有酸败、异臭、产生气体或其他变质现象。 要求检查相对密度、 pH、装量。

5. 其他中药制剂 酒剂与酊剂 质量分析： 总固体（适于尚未建立含量测定 项目的品种，以控制提出组分的量作 为质量评价的指标。） 5. 其他中药制剂 酒剂与酊剂 质量分析： 总固体（适于尚未建立含量测定 项目的品种，以控制提出组分的量作 为质量评价的指标。） 乙醇量、甲醇量、最低装量、微 生物限度。

三、中药分析用样品制备方法 （一）取样与样品保存 取样要有一定的代表性。 取样原则：均匀、合理。 严格按照规定的取样方法取样。

1. 中药材和饮片取样法 贵重药材 逐件取样 ＜ 5件 逐件取样 ＜ 100件 取5件 100 ～ 1000件 按5%取样 贵重药材 逐件取样 ＜ 5件 逐件取样 ＜ 100件 取5件 100 ～ 1000件 按5%取样 ＞ 1000件 超过部分按1%取

2. 中药制剂取样法 （1）粉状中药制剂 取样 100g （2）液体中药制剂 取样 200mL （3）固体中成药 片剂 200片 （3）固体中成药 片剂 200片 丸剂 10丸 胶囊 20个 （4）注射剂 取样 200支

(二)中药分析用样品的制备 1. 样品的提取 （1） 萃取法 （2） 冷浸法 （3） 回流提取法 （4） 连续回流提取法 （5） 水蒸气蒸馏法 （6） 超声提取法

（7） 超临界流体萃取（SFE） 超临界流体： 物质在三相点下气、液、固三态处于平衡状态，当物质处于临界温度和临界压力以上，此时的物质既不是气体也不是液体而始终保持流体，称为超临界流体（supercritical fluid，SF）。

超临界流体的特点： 密度与液体相似，故溶解性能较强 扩散系数与气体相似，传质快 表面张力为0，故易渗透到样品中带走组分 正常状态下变为气体逸出，易浓集 选择性强，通过改变萃取的压力和温度可以选择性地萃取某些成分。

2. 样品的分离和纯化 液—液萃取法 沉淀法 色谱法 水蒸气蒸馏法

第二节 中药的鉴别

中药及其制剂的鉴别主要是根据中药材、中药制剂的性状、组织学特征以及所含化学成分的理化性质，采用一定的分析方法来判断该中药材及其制剂的真伪。

中药及其制剂的鉴别药味的选取原则 ①单味制剂，直接选取单一药味。复方制剂，按照君臣佐使依次选择药味。 ②当药味较多时，应首选君药、臣药、贵重药、毒性药进行鉴别研究。 ③原粉入药者，应作显微鉴别。有显微鉴别的，可同时进行其他方法的鉴别。 ④原则上处方中的每一药味均应进行鉴别研究，选择尽量多的药味制订在标准中，但最少也要超过处方的1/3药味。

利用其外观、形状及感官性质等特征作为真伪鉴别的依据。 一、 性状鉴别 利用其外观、形状及感官性质等特征作为真伪鉴别的依据。 性状鉴别是评价药材及其制剂质量的一项重要指标。

二、显微鉴别 利用显微镜对药材切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别。鉴别时选择具有代表性的供试品，根据各品种鉴别项的规定制片。

Ch.P.（2010）一部 附录ⅡC 显微鉴别法 显微鉴别的特点 A. 处方中的主要药味及化学成分不清楚或尚无化学鉴别方法的药味，应做显微鉴别，选择专属性与特征性较强的方法进行鉴别。 B. 处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为定性的鉴别方法，否则只投其中一味。 C. 显微特征应明显、易查见，否则可能做出假阴性的判定。

三、理化鉴别 利用中药中所含主要成分的理化性质，采用物理、化学或物理化学的方法进行鉴别，从而判断其真伪。

1. 微量升华法 适用于具有升华性成分的鉴别 大黄→ 菱状针晶或羽状结晶（蒽醌类） 牡丹皮→长柱状、针状或羽状结晶（丹皮酚） 大黄→ 菱状针晶或羽状结晶（蒽醌类） 牡丹皮→长柱状、针状或羽状结晶（丹皮酚） 冰片→ 白色不定形片状结晶 冰片

2. 化学鉴别反应 二妙丸（苍术、黄柏）中苍术的鉴别 苍术酮 苍术炔

分离度好、灵敏度高、专属性强、应用范围广等特点。 四、色谱鉴别法 分离度好、灵敏度高、专属性强、应用范围广等特点。 TLC法： 应用最多 GC法： 适用于含挥发性成分的药物 HPLC法：常与含量测定同时进行

TLC法 色谱条件选择： 固定相选择 常用硅胶 生物碱 氧化铝 黄酮类和酚类 聚酰胺 氨基酸 纤维素 生物碱 氧化铝 黄酮类和酚类 聚酰胺 氨基酸 纤维素 分别取供试品、对照药材或对照品溶液点于同一薄层板上，展开检视，供试品 溶液中应有与对照主斑点相对应的斑点。

阴性对照 对照品 对照药材 供试液

第三节 中药的检查项目与内容

中药检查的对象是指药材及其制品在加工、生产和贮藏过程中可能含有并需要控制的物质或物理参数，内容包括安全性、有效性、均一性与纯度要求四个方面。

一、杂质检查法 所指的杂质为药材中混存的杂质，包括：来源与规定相同，但其性状或部位与规定不符；来源与规定不同的有机杂质和无机杂质。 检查方法：取规定量的供试品拣出杂质 将各类杂质分别称重，计算其在供试品中的含量。

二、 水分测定法 1.烘干法（不含或少含挥发性成分） 2.甲苯法（含挥发性成分） 3.减压干燥法（含挥发性成分的贵重药） 4.气相色谱法

例 鹿角胶 Ch.P.（2010） 【检查】水分 取本品1g，精密称定，加水2 ml，加热溶解后，置水浴上蒸干，使厚度不超过 2～3mm，照水分测定法（附录Ⅸ H 第一法）测 定，不得过15.0%。

三、 总灰分和酸不溶性灰分 总灰分的测定 △ 酸不溶灰分的测定 △ △

四、 重金属及有害元素测定法 铅：百万分之五 镉：千万分之三 砷：百万分之二 汞：千万分之二 铜：百万分之二十 一般应先有机破坏后再检测。

五、残留农药量测定法 对中药及其制剂进行农药残留量检查已成为必然，尤其是出口中药材及中药制剂则必须进行该项检查。

附录ⅨQ 农药残留量测定法 本法是用气相色谱法测定药材及制剂中部分有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类农药。

例 黄芪 Ch.P.（2010） 【检查】有机氯农药残留量 照农药残留量 测定法（附录Ⅸ Q有机氯农药残留量测定）测 定，六六六（总BHC）不得过千万分之二；滴 滴涕(总DDT）不得过千万分之二；五氯硝基苯 （PC-NB)不得过千万分之一。

六、有关杂质的检查 提高用药安全性，药典中规定了一些中药中有关物质的检测项目。 毒性成分 阿多尼弗林碱 银杏酸 莨菪碱 雄黄

七、其他 （一）黄曲霉素测定法 （二）乙醇量测定法 GC 蒸馏法 （三）膨胀度测定法 （四）酸败度测定法

第四节 中药及制剂中成分的含量测定和质量整体控制

中药制剂组成复杂，产生的临床疗效不是某单一成分的作用结果。 测定任何一种活性成分都不能反映制剂的整体疗效。

一、中药及制剂中化学成分的含量测定 （一）指标成分选择的原则 1.复方制剂首选君药及贵重药建立含量测定方法，若上诉药物基础研究薄弱或无法进行含量测定的，也可依次选臣药及其他药测定含量。 2.含有毒性药物必须建立含量测定项目，若含量太低无法测定应规定限度检查。 3.选择中药中专属性强的有效成分或指标成分测定含量。有效成分类别清楚的，可以测定某一类总成分的含量。

（一）指标成分选择的原则 4.测定成分应尽量与中医理论、用药的功能主治相近。 5.测定成分需考虑与生产工艺的关系。 6.测定成分应归属于某单一药味，若两味或以上药材均含有的成分，则不应选为定量指标。 7.若确实无法进行含量测定的，测定药物的总固体量。

（二）化学成分含量测定的主要方法 1. 化学分析法 包括容量法、重量法。 2. 紫外—可见分光光度法 3. 高效液相色谱法 4. 气相色谱法

B 1 A C

（三）中药及其制剂的多指标成分的含量测定 中药及其制剂中含有众多成分，仅以单一成分作为质量控制的指标不能全面地反映药材的质量，更不能保证药效。目前，中药及其制剂分析大都选择多指标成分进行含量测定，力求更客观地表征其内在质量。

（四）中药一测多评的含量测定方法 该方法适用于对照品难得、制备成本高或不稳定的情况下的同类多成分的同时测定。其原理在一定的线性范围内，成分的量与检测器响应成正比。 所选择的质控指标原则上应选择药材中有效成分或指标性成分；做内参物的对照品应是相对易得的。待测成分应有相对较高的含量，原则上应≥1mg/g。

二、中药及其制剂质量的整体控制和指纹图谱 （一）中药指纹图谱的含义和研究意义 1. 中药指纹图谱的含义 药材、饮片、提取物或中药制剂等经适当处理后，采取一定的分析技术和方法得到的能够标示其化学的、生物学的或其他特性的图谱。

2. 中药指纹图谱研究的意义 对中药质量控制的补充和提高。有利于控制中间体、成品的一致性，减少批间差异。 运用中药指纹图谱定性与指标成分定量相结合的质量标准控制模式，可以在中药材的种植、采收加工、生产、临床、贮存和流通等各个环节全面控制中药的质量，提供质量优良、均一和特异的中药用于临床。

3. 中药指纹图谱的类别及特点 （1）按测定手段分类 中药化学和中药生物指纹图谱 1） 中药化学指纹图谱 2）中药生物指纹图谱

（2） 按应用对象分类 中药材指纹图谱 中药原料药指纹图谱 生产工艺过程中间产物指纹图谱 中药制剂指纹图谱

（二）中药色谱指纹图谱研究的技术关键 研究对象的确定 样品的选择与收集 供试品的制备 参照物的选择 研究方法的选择

色谱条件的选择 （1）色谱柱 指纹图谱一般选用5~10μmC18填料柱，以4.6mm× 250mm较适宜，其它特殊的色谱柱，如氨基柱、腈基柱、酸性柱、碱性柱等，可视研究对象的不同而采用。

（2）流动相：乙腈、甲醇、水、四氢呋喃等 醇-水系统由于热力学和可压缩性因素，易导致基线漂移。 加入改善色谱峰分离程度及改善峰形的改性剂： RP-HPLC，乙腈-水系统比较适合梯度洗脱。 醇-水系统由于热力学和可压缩性因素，易导致基线漂移。 加入改善色谱峰分离程度及改善峰形的改性剂： 磷酸、乙酸、三乙胺、二乙胺、正丁基溴化胺、十二烷基磺酸钠 磷酸-磷酸氢二钠/磷酸二氢钠、乙酸-乙酸钠缓冲溶液。 部分成分的极性较小，在流动相中可加入少量异丙醇、THF、 氯仿、环糊精等，增加流动相对样品的溶解性，可改善峰形以 及快速洗脱。

（3）检测器 检测波长选择有以下方法： ①参照样品和对照品的全波长紫外吸收光谱，选择吸收峰值； ②根据君、臣、佐、使的组方理论，在尽可能兼顾佐使药的同时，主要选择君、臣药中有效成分的吸收峰值； ③一个检测波长下的色谱图如不能达到控制质量的目的，可建立多个检测波长下的指纹图谱； ④一个检测器不能解决的也可同时采用多个检查手段。

（4）柱温 柱温的选择与恒定是影响指纹图谱技术稳定的主要因素之一。适宜的柱温不仅影响色谱峰的分离效果，而且柱温变化将导致色谱峰保留时间的迁移，技术参数的设置就失去了意义，因此，柱温必须限定。 当色谱图某个色谱峰因溶解度差而峰形较“钝”时，可适当提高柱温（30~50℃）；如样品中组分在常温或高温下不稳定，易发生水解、分解等变化时，可降低柱温。

（5）进样量 进样量对指纹图谱的结果影响不大，但加大进样量，可以减弱梯度洗脱时基线漂移的程度；然而色谱柱的载样量有一定的限度，进样量过大，色谱柱超载，导致色谱峰峰宽增加或色谱峰尖钝化，并影响柱的寿命。研究发现，进样量应控制最高色谱峰的吸收值在1000mAU以下适合。当等度洗脱时，基线平稳，进样量较平稳，进样量应尽量减少，一般控制最高色谱峰的吸收值在100mAU左右，不宜超过500mAU。

6. 指纹特征选择与技术参数 指纹图谱一旦建立，按照《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》（暂行）规定，除提供指纹图谱外，还应说明相应的技术参数。用大量的相对保留时间、共有峰峰面积比值等技术参数，不能直观地用来鉴定和判断。 通过大样本的指纹图谱的挖掘，找出隐藏其中的指纹特征，是指纹图谱研究的直接目的。

复习内容 掌握中药及其制剂分析的特点；中药制剂分析的程序；中药指纹图谱的定义、基本属性及技术关键 熟悉中药及其制剂中待测成分的提取分离与纯化方法；中药指纹图谱研究的类型 了解中药及其制剂的分类