指導老師:林家妤 組員:497H0007 黃夙銘 497H0009 王冠翔 497H0029 林冠宏 497H0912 王浩洋 生物產業安全與倫理之 DNA指紋鑑定 指導老師:林家妤 組員:497H0007 黃夙銘 497H0009 王冠翔 497H0029 林冠宏 497H0912 王浩洋
前言: 法醫科學(forensic science)為法律和科學的交集科目, 許多訴訟案件會根據科學證據而進行判決。科學界已 經發展出新的技術,如DNA的鑑定。這種方法是採 集犯罪現場中犯人無意留下的唾液、毛髮等來進行 DNA的鑑定來確認犯人的身分。這種技術同時也可 以運用在現實生活上,如現在知名八點檔”天下父X 心”中不停提到親子鑑定是最常使用。
親子鑑定起源: 自古親子鑑定的戲碼就一直在不同場景中上演,例《 南史》中記載了梁武帝蕭衍之子蕭綜「滴血認親」的 故事,但是科學根據都十分薄弱。醫學界在1935年 開始使用血型來鑑定親子關係。然而,A、B、O、 AB等4種血型的重複性太高,排除率只有60%(意 即在100個『假』父親中,只能排除60個),辨別度 太低,加上「亞孟買型」等特殊血型陸續發現,以血 型來判斷親子關係可能出錯,甚至因此造成家庭與法 律的糾紛。
1976年,醫學界使用「人類白血抗原」(HLA)的 檢查來作親子鑑定,鑑別度可提高到90%左右,但仍 然無法滿足實際需求。DNA比對開始被應用在親子 鑑定上約在1990年代,而台灣亦在1999年通過「去 氧核醣核酸(DNA)採樣條例」, 2000年起正式實 施。
每人都有兩條DNA,一半的DNA來自父親,另一半 來自母親,因此為了判斷親子關係,可將父母的 DNA型別與孩子的DNA型別加以比較,而且除了真 正雙胞胎外, 每人的DNA是獨一無二的,所以一舉將 排除率提高到99.99%以上,被認為是十分準確的檢 驗法。
原理: 每個人都攜帶一套獨特的基因組,DNA的化學構造 通常是一樣的,但是鹼基對的序列則是不一樣,所謂 的科學證據就是利用這種獨特性來確認犯人的身分。 雖然DNA的鹼基序列每個人都不一樣,但如果有血 緣關係的話,其DNA的序列會雷同,親子鑑定就是 利用這種特性來做判斷。
可以在不同的樣本上進行測試, 包括血液, 口腔黏膜 、含有毛囊之頭髮、指甲、精液、牙齒、胎兒絨毛、 胎兒羊水、組織、臍帶血 可以在不同的樣本上進行測試, 包括血液, 口腔黏膜 、含有毛囊之頭髮、指甲、精液、牙齒、胎兒絨毛、 胎兒羊水、組織、臍帶血....等。人體細胞的DNA上 有許多STR(短片段重覆序列Short Tandem Repeat),這些DNA片段在個體間有著不同的重複次 數,這就是DNA的多型性。
DNA上每個人特有的片段綜合起來,利用PCR- STR (聚合脢連鎖反應-短片段重覆序列)、RFLP ( 限制酵素片段長度多型性)技術來執行分析,我們就 可以將不同的個體依基因型加以區分,這就是DNA 親子鑑定的原理。
在親子關係鑑定上,鑑定Y-STR基因,可以證明是 否具有相同父系關係;鑑定粒線體DNA,可以證明 是否具有相同母系關係。
方法: 一、法醫鑑定: 當樣本被收集到之後,技術人員會用化學方法(清潔 劑)或機械法(離心),來將DNA的獨特標誌轉變 成可以被看見的證據。 步驟如下:1.PCR 2.RFLP 3.南方墨點法 4.雜交現象 5.自動放射攝影術
1.PCR方法: 進行一次RFLP分析操作需要數千個細胞,這個數量 遠超過通常在一個犯罪現場中所能收集的數量。所以 會使用一個稱為PCR(聚合酶連鎖反應)的過程來讓 樣本”生長”或者增量到,可以被進行分析的數量範圍。 主要藉由Taq聚合酶和DNA核苷酸,加熱和冷卻的 循環周期可以讓DNA重複地進行分離和複製。
2.RFLP分析: 使用被稱為限制核酸內切酶(restriction endonuclease) 的酵素來處理DNA,這是無論特定序列出現在長鏈的 哪一個位置,都能夠瞄準並切斷DNA雙股螺旋的一種 酶素,藉由這些酵素就能將DNA長鏈切成片段。
3.南方墨點法: 只讓特定之待測碎片被看的見。在電泳法處理之後, 使用鹼性溶液來處理凝膠,而將DNA去活化;接著 將使用稱為墨點法的技術將碎片轉移在尼龍或者硝化 纖維薄膜之上。藉由使用瓊脂凝膠電泳方法來分離 DNA碎片混合物。
4.雜交現象: 當DNA永遠固定在硝化纖維薄膜或者尼龍薄膜上之 後,就將薄膜至於含有稱為探針和放射性(或者螢 光)DNA長鏈的介質中進行培養,而探針在此時就會 與樣本結合在一起。探針是單鏈型的DNA片段或者 RNA片段,而含有針對特定鹼基對序列的互補密碼, DNA片段和它的互補性探針所發生的鍵結現象,就 稱為雜交現象。
可能是氫鍵讓兩者結合在一起。因為形成氫鍵的條件 是相當嚴謹的,探針只能鍵結到互補性片段。經過雜 交反應之後,沒有和樣本中的DNA鍵結在一起的任 何探針不分,都會被沖洗走。
5.自動放射攝影術: 將X-光底片(或照相底片)放置在薄膜上。因為標的 DNA在此時是具有放射性的(或者螢光的),並且會放 射出光粒子所以在照相底片上就會形成一個影像。
二、親子鑑定: 美國FBI之CODIS系統所採用之13個DNA鑑定標記 為基礎,利用DNA複製儀器(PCR),再經由核酸 自動定序儀檢出其組合基因型,由於其檢體需求量少 ,靈敏度高,組合基因型組數多,且所需檢體的新鮮 度不若傳統血清學嚴苛,因此DNA技術逐漸取代血 清學成為科學鑑識的主流。STR應用於親子關係鑑 定上,親子關係機率可以達到99.99%以上。
這種方法大部分應用在刑案被害人身分的確認被害 人遭殺害,如遭分屍或焚屍,或疑為謀殺詐領保險金 時,需做親子鑑定進一步確認死者身分或 無名屍身 分的確認當某地發現的無名屍已死亡多日,面貌特徵 無法辨識,親屬關係的鑑定,有助於家屬找尋失蹤的 親人。
討論: 在現今社會常發生令人費解的案件,各種案件上,經 常用現場殘留的DNA來作為有利的證據,有時甚至 於是破案定罪的關鍵。同時,DNA的技術也應用在 日常生活上,如親子的鑑定,DNA的鑑定準確度比 起其他方法更有公信力。
2010年5月6日國道三號走山事件四位罹難者遺體挖 出後,基隆地檢署檢察官王亞樵、張志明廿八日清晨 偕法醫相驗後,迅速將遺體交由家屬領回。但為求慎 重,檢方已採集DNA 進行親子鑑定,確認身分。
然而,這種方法並非只有利而沒有弊。現今社會DNA 技術的進步所產生的隱憂也不得不讓人重視。雖然先 進DNA未來將能協助人類對抗一些藥物上無法治癒得 遺傳性的疾病,如第一型糖尿病。同時DNA的獨特性 也可以增加破案的效率。但將DNA建檔在電腦上,個 人資料外流可能性會增加,這些資料對當事人來說也 許是並不想其他人知道的個人隱私。此外,一些特例 會影響鑑定結果,如雙胞胎或是嵌合體(Chimera)。
1999年 發生一宗女大學生遭強暴案件,此案迄今未 破,警方最近在偵查本案時,查出三十六歲的泰隆. 庫柏的DNA樣本,與當年犯罪現場蒐證採集取得的 基因物質相符。 但今年4月,密西根州警察犯罪實驗 室,比對出傑洛米.庫柏的DNA樣本,也和犯罪現 場取得的基因樣本相符;傑洛米.庫柏不是別人,正 是泰隆.庫柏的雙胞胎 兄弟。每個人的DNA均帶 有個人獨特的基因密碼,但因長相相同的雙胞胎,是 由同一個受精卵所生出,因此被認為是「唯二」會帶 有幾近相同的基因藍圖者。
嵌合體(Chimera),又名喀邁拉现象,是動物學 的一種特殊現像,指動物的兩顆受精卵融合在一起身 為一個個體並成長。 嵌合現像亦在人類出現。根據統計,現時全球總共有 30宗嵌合人的個案。對於部份特殊例子,嵌合人可 能由一男一女、二男或二女所組成。嵌合人可能同時 會有兩套性器官。
2002年,美國籍婦女Lydia Fairchild在懷孕時離婚 申請社會救濟,並向醫院申請DNA報告以証明小孩 的親屬關係;結果發現小孩不是她的,DNA報告顯 示她和她的小孩完全沒有血緣關係,她認為是醫院弄 錯了,因此向醫院申請第二次DNA報告,結果和上 一份相同。Fairchild因此被控誘拐別人小孩和詐騙 社會福利,並被強迫與她的孩子分開;而醫院先前的 出生證明則被忽視。當她要生第三個小孩時,法官這 次要求見證人全程錄影,並保證她與小孩的血液樣本 被立刻送往化驗。兩個星期後,報告出爐,她也不是 那第三個小孩的母親。
後來發現Fairchild是一位人類嵌合體,她頭髮和皮 膚的DNA和她子宮組織的DNA完全不同;也就是說 ,在她身體不同的器官有著不同組的染色體。最後使 得法院撤銷了起诉。
隨著科技的進步,DNA不再是我們細胞內一大串難 懂的密碼了。然而,對於解讀DNA這項壯舉是福是 禍,各派學者持不同的理論,其中有人認為這是種褻 瀆上帝的行為。尤其是1990年的”人類基因計劃”開 始實行時,更引起了熱烈討論有關人類的DNA的秘 密是否應該成為商品販售。儘管眾說紛紜,但DNA 的時代已經悄然來臨的,對人類產生何種的影響,也 許答案早已寫在我們細胞核內的密碼中,並會在未知 的未來將會揭曉。
參考: 生物技術概論 原著Thieman/Palladino 譯者 方嘉德 中時日報 國道三號走山意外 http://tw.news.yahoo.com/article/url/d/a/100429/4/ 24qfo.html 維基百科 http://zh.wikipedia.org/zh/%E5%B5%8C%E5%90 %88%E9%AB%94
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