Experiment Four 李玉军

化脓菌分离鉴定过程（四）

甘露醇发酵试验 药敏实验

细菌的抑菌环直径解释标准和相应的MIC解释标准 （来源于CLSI M100-S17和NCCLS M31-A2） 分类 抗生素 适用的细菌 纸片含药量（μg/片） 抑菌环（圈）直径（mm） 耐药 （R） 中介 （I） 敏感 （S） 青霉素类 氨苄西林 Ampicillin 1 10 ≤13 14～16 ≥17 2 ≤28 - ≥29 3 ≤16 苯唑西林 Oxacillin ≤10 11～12 ≥13   青霉素G Penicillin G 10IU ≤14 ≥15 青霉素/新生霉素 Penicillin/Novobiocin 10IU/30 15～17 ≥18 β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂 阿莫西林/克拉维酸 Amoxicillin/Clavulanic Acid 20/10 14～17 ≤19 ≥20 氨苄西林/舒巴坦 Amplicillin/Sulbactam 1,2 10/10 ≤11 12～14 哌拉西林/他唑巴坦 Piperacillin/Tazobactam 100/10 ≤17 18～20 ≥21 头孢类 头孢唑啉 Cefazolin 30 头孢噻吩 Cephalothin 头孢哌酮 Cefoperazone 75 ≤15 16～20 头孢曲松 Ceftriaxone 14～20 头孢他啶 Ceftazidime

碳青霉烯类 厄他培南 Ertapenem 1 10 ≤15 16～18 ≥19 亚胺培南 Imipenem 1,2 ≤13 14～15 ≥16 美洛培南 Meropenem 单环内酰胺类 氨曲南 Aztreonam 30 16～21 ≥22 氨基糖甙类 庆大霉素 Gentamicin ≤12 13～14 ≥15 3 120 ≤6 7-9 ≥10 卡那霉素 Kanamycin 14～17 ≥18 妥布霉素 Tobramycin 大环内酯类 阿奇霉素 Azithromycin 2 15 四环素类 四环素 Tetracycline 1,2,3 ≤14 15～18 诺氟沙星 Norfloxacin 13～16 ≥17 氧氟沙星 Ofloxacin 5 13～15 15～17 氟洛沙星 Fleroxacin 氯霉素 Chloramphenicol 13～17 利福平 Rifampin ≤16 17～19 ≥20 万古霉素 Vancomycin - 克林霉素 Clindamycin 15～20 ≥21 1：肠杆菌科 2：葡萄球菌属 （2-1凝固酶阳性葡萄球菌，2-2凝固酶阴性葡萄球菌）3：肠球菌属

Bacteriological Detection

Serological diagnosis Samples: Widal’s test ------ S. typhi and paratyphi Weil-Felix Test ------ Richettsia(立克次体属)

Widal’s Reaction Definition: a specific reaction consisting in agglutination of typhoid bacilli or paratyphoid bacilli when mixed with serum from a patient having typhoid fever or other salmonella infection and constituting a test for the disease . Usage: to assist to diagnosis typhoid fever or other salmonella infection.

Materials Antigens: TO TH PA PB Antibody: serum of suspected patient Normal saline Reaction plate Straws

PROCEDURE Reagent (ml) 1 2 3 4 5 6 7 Make the mark Add reagents as the following: Reagent (ml) 1 2 3 4 5 6 7 Saline 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 Patient serum 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 discard Serum dilution 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 - Bacteria suspension 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 Final serum 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 - dilution Bacteria suspension: TO TH PA PB Shaking several times, put it in 37℃ water bath for 2 hours.Then let it stand at room temperature over night.

Judgment: Observation: 1. Control tube: no agglutination (-) 2. Lowest titer tube: absolutely agglutination (++++) 3. Other tubes: three quarters agglutination(+++) half agglutination (++) one quarter agglutination (+) no agglutination (-) Judgment: Agglutination titer: the highest dilution of serum which appears (++) bacteria agglutination.

Analysis H抗体与O抗体的性质及其消长的意义 体内出现情况 抗体类型 与正常值比较 出现较早 维持时间短 O抗体 IgM 高 高 低 出现较晚 维持时间长 H抗体 IgG 高 低 高 感染早期 预防接种 非特异性回忆反应 伤寒的可能性很大 O凝集的交叉反应

Precautions Make the mark Make sure the procedure carefully use the straws Correctly Judge the results

细菌特殊结构观察 荚膜 芽孢 鞭毛 异染颗粒 抗酸染色 荚膜染色法：菌体紫色，荚膜无色或淡紫色 芽孢染色法：菌体蓝色，芽孢红色 鞭毛染色法：菌体棕黑色，鞭毛浅棕黑色 异染颗粒 异染颗粒染色法：菌体浅黄色，异染颗粒深蓝紫色 抗酸染色 抗酸性细菌：红色 非抗酸性细菌：蓝色

模拟题 在SS琼脂平板上，致病性肠道杆菌菌落特征是____________，非致病性肠道杆菌的菌落特征是____________。 斜面培养基主要用于 __________；半固体培养基主要用于__________。分离肠道杆菌常用_________培养基。 现有一名患者，怀疑被沙门菌感染了，请问你应该通过哪些试验进行鉴定？