Experiment Four 李玉军.

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Experiment Four 李玉军

化脓菌分离鉴定过程(四)

甘露醇发酵试验 药敏实验

细菌的抑菌环直径解释标准和相应的MIC解释标准 (来源于CLSI M100-S17和NCCLS M31-A2) 分类 抗生素 适用的细菌 纸片含药量(μg/片) 抑菌环(圈)直径(mm) 耐药 (R) 中介 (I) 敏感 (S) 青霉素类 氨苄西林 Ampicillin 1 10 ≤13 14~16 ≥17 2 ≤28 - ≥29 3 ≤16 苯唑西林 Oxacillin ≤10 11~12 ≥13   青霉素G Penicillin G 10IU ≤14 ≥15 青霉素/新生霉素 Penicillin/Novobiocin 10IU/30 15~17 ≥18 β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂 阿莫西林/克拉维酸 Amoxicillin/Clavulanic Acid 20/10 14~17 ≤19 ≥20 氨苄西林/舒巴坦 Amplicillin/Sulbactam 1,2 10/10 ≤11 12~14 哌拉西林/他唑巴坦 Piperacillin/Tazobactam 100/10 ≤17 18~20 ≥21 头孢类 头孢唑啉 Cefazolin 30 头孢噻吩 Cephalothin 头孢哌酮 Cefoperazone 75 ≤15 16~20 头孢曲松 Ceftriaxone 14~20 头孢他啶 Ceftazidime

碳青霉烯类 厄他培南 Ertapenem 1 10 ≤15 16~18 ≥19 亚胺培南 Imipenem 1,2 ≤13 14~15 ≥16 美洛培南 Meropenem 单环内酰胺类 氨曲南 Aztreonam 30 16~21 ≥22 氨基糖甙类 庆大霉素 Gentamicin ≤12 13~14 ≥15 3 120 ≤6 7-9 ≥10 卡那霉素 Kanamycin 14~17 ≥18 妥布霉素 Tobramycin 大环内酯类 阿奇霉素 Azithromycin 2 15 四环素类 四环素 Tetracycline 1,2,3 ≤14 15~18 诺氟沙星 Norfloxacin 13~16 ≥17 氧氟沙星 Ofloxacin 5 13~15 15~17 氟洛沙星 Fleroxacin 氯霉素 Chloramphenicol 13~17 利福平 Rifampin ≤16 17~19 ≥20 万古霉素 Vancomycin - 克林霉素 Clindamycin 15~20 ≥21 1:肠杆菌科 2:葡萄球菌属 (2-1凝固酶阳性葡萄球菌,2-2凝固酶阴性葡萄球菌)3:肠球菌属

Bacteriological Detection

Serological diagnosis Samples: Widal’s test ------ S. typhi and paratyphi Weil-Felix Test ------ Richettsia(立克次体属)

Widal’s Reaction Definition: a specific reaction consisting in agglutination of typhoid bacilli or paratyphoid bacilli when mixed with serum from a patient having typhoid fever or other salmonella infection and constituting a test for the disease . Usage: to assist to diagnosis typhoid fever or other salmonella infection.

Materials Antigens: TO TH PA PB Antibody: serum of suspected patient Normal saline Reaction plate Straws

PROCEDURE Reagent (ml) 1 2 3 4 5 6 7 Make the mark Add reagents as the following: Reagent (ml) 1 2 3 4 5 6 7 Saline 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 Patient serum 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 discard Serum dilution 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 - Bacteria suspension 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 Final serum 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 - dilution Bacteria suspension: TO TH PA PB Shaking several times, put it in 37℃ water bath for 2 hours.Then let it stand at room temperature over night.

Judgment: Observation: 1. Control tube: no agglutination (-) 2. Lowest titer tube: absolutely agglutination (++++) 3. Other tubes: three quarters agglutination(+++) half agglutination (++) one quarter agglutination (+) no agglutination (-) Judgment: Agglutination titer: the highest dilution of serum which appears (++) bacteria agglutination.

Analysis H抗体与O抗体的性质及其消长的意义 体内出现情况 抗体类型 与正常值比较 出现较早 维持时间短 O抗体 IgM 高 高 低 出现较晚 维持时间长 H抗体 IgG 高 低 高 感染早期 预防接种 非特异性回忆反应 伤寒的可能性很大 O凝集的交叉反应

Precautions Make the mark Make sure the procedure carefully use the straws Correctly Judge the results

细菌特殊结构观察 荚膜 芽孢 鞭毛 异染颗粒 抗酸染色 荚膜染色法:菌体紫色,荚膜无色或淡紫色 芽孢染色法:菌体蓝色,芽孢红色 鞭毛染色法:菌体棕黑色,鞭毛浅棕黑色 异染颗粒 异染颗粒染色法:菌体浅黄色,异染颗粒深蓝紫色 抗酸染色 抗酸性细菌:红色 非抗酸性细菌:蓝色

模拟题 在SS琼脂平板上,致病性肠道杆菌菌落特征是____________,非致病性肠道杆菌的菌落特征是____________。 斜面培养基主要用于 __________;半固体培养基主要用于__________。分离肠道杆菌常用_________培养基。 现有一名患者,怀疑被沙门菌感染了,请问你应该通过哪些试验进行鉴定?